一種能使吖啶酯抗原抗體結合物穩定的稀釋液及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于化學分析技術領域，具體設及一種能使叮晚醋抗原抗體結合物穩定的 稀釋液及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 化學發光免疫分析法是用化學發光劑直接標記抗原或抗體的免疫分析法，叮晚醋 是較為理想的發光底物，在堿性條件下，叮晚醋分子受到過氧化氨攻擊可生成二氧乙燒，二 氧乙燒不穩定而分解為C〇2和電子激發態的Ν-甲基叮晚酬，當其回到基態時發出波長為 430nm的光。
[0003] 叮晚醋標記物在化學結構上有產生發光的特殊基團，在發光免疫分析過程中直接 參與發光反應。通常運類物質沒有本底發光，在反應中能用于檢測低濃度或微量濃度的樣 品，是一類發光效率很高的發光劑。叮晚醋ι、π分子和叮晚酷胺m均可與抗體(或抗原）結 合，生成具有化學發光活性強、免疫反應特異性高的標記抗體(或抗原）。
[0004] 從目前的技術水平來看，叮晚醋在一般的緩沖液中不穩定、易水解，結合物稀釋至 工作濃度時，由于結合物在稀釋液中濃度的降低所引起的試劑的穩定性下降，從而導致試 劑的保存期縮短。從體外診斷試劑行業市場來看，叮晚醋抗原抗體結合物的穩定性好壞和 使用效期長短，也會直接影響試劑盒整體的性能指標。
【發明內容】
[0005] 針對現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種能使叮晚醋抗原抗體結合物穩 定的稀釋液，該稀釋液克服了叮晚醋在緩沖液不穩定、易水解的缺點，對叮晚醋抗原抗體結 合物起到保護作用，提高了叮晚醋抗原抗體結合物的穩定性，同時延長了使用的效期，還能 充分利用到體外診斷試劑盒中。
[0006] 本發明的另一目的在于提供一種能使叮晚醋抗原抗體結合物穩定的稀釋液的制 備方法。
[0007] 實現本發明的目的可W通過采取如下技術方案達到：
[000引一種能使叮晚醋抗原抗體結合物穩定的稀釋液，其是由如下質量百分數計的組分 制備而成： 碳水化合物 0.1-2% 多無醇 1-說％ 氨基酸. 0.1-1% 蛋白穩定劑 0.01-2.5%
[0009] 整合劑 0.001-0.1% 表面活性劑 0.01-0.5% 際腐劑 0.01-0.1% 添加劑 0.05-1%: 緩沖液 余量。
[0010] 優選地，所述碳水化合物由薦糖和海藻糖組成，所述薦糖和海藻糖的重量比為（1- 3):1。
[0011] 優選地，所述多元醇為山梨醇、肌醇、異丙醇或甘油其中的一種或兩種W上的混合 物;所述氨基酸為絲氨酸、甘氨酸、丙氨酸或賴氨酸其中的一種或兩種W上的混合物。
[0012] 優選地，所述蛋白穩定劑為牛血清白蛋白（BSA)、脫脂奶粉、酪蛋白、小牛血清、牛 IgG或鼠 IgG其中的一種或兩種W上的混合物。
[0013] 優選地，所述蛋白穩定劑選自質量百分比為0.1-2.5%的BSA、0.1-1.5%的酪蛋白 或0.01 -0.1 %的牛IgG中的一種或兩種W上的混合物。
[0014] 優選地，所述馨合劑為抓TA或DTPA其中的一種或兩種的混合物;所述表面活性劑 為Tween-20、Tween-40、乙基苯基聚乙二醇(NP-40)、Triton X-100或十二烷基硫酸鋼其中 的一種或兩種W上的混合物;所述防腐劑為硫柳隸、Proclin 300、疊氮鋼或洗必泰其中的 一種或兩種W上的混合物。
[0015] 優選地，所述添加劑選自質量百分比為0.1-1%的聚乙二醇6000。666000)、0.05- 0.5 %的明膠、0.9 %的氯化鋼其中的一種或兩種W上的混合物。
[0016] 優選地，所述緩沖液選自濃度為0.01-0.2mol/L的巧樣酸鹽緩沖液、2-(N-嗎啡嘟） 乙橫酸緩沖液(MES緩沖液）、化is-HCl緩沖液或憐酸鹽緩沖液其中的一種。
[0017] 優選地，所述緩沖液為0.05-0.2mol/L巧樣酸鹽緩沖液或0.01-0.1mol/L MES緩沖 液。
[0018] -種能使叮晚醋抗原抗體結合物穩定的稀釋液的制備方法，其具體步驟如下：
[0019] 1)按配方量的碳水化各物、多元醇、氨基酸、蛋白穩定劑、馨合劑、表面活性劑、防 腐劑和添加劑加入緩沖液中，攬拌至完全溶解，得到混合液；
[0020] 2)將步驟1)得到的混合液攬拌混勻，加入HC1或化0H調節抑值為6-7,即得到稀釋 液。
[0021] 本發明的有益效果在于：
[0022] 1、本發明的稀釋液能夠使叮晚醋抗原抗體結合物保持穩定、不易水解，延長了試 劑的保存期；
[0023] 2、本發明的稀釋液能夠保持叮晚醋抗原抗體結合物的穩定性W及使用效期，解決 了試劑盒使用效期短的問題，保證了試劑盒整體的性能指標。
【具體實施方式】
[0024] -種能使叮晚醋抗原抗體結合物穩定的稀釋液，其是由如下質量百分數計的組分 制備而成： 碳水化合物 0.1-2% 多元醇 1-10% 氨基酸 0.1-1% 蛋白穩定劑 化則-2.5%
[0025] 整合劑 0.001-0.1% 表面活性劑 0.01-0.5% 防腐劑 0.01-0.1% 添加刺 0.05-1%: 緩沖液 余量。
[0026] 其中，碳水化合物：由薦糖和海藻糖組成，薦糖和海藻糖的重量比為（1-3):1,優選 為2:1;
[0027] 多元醇:選用山梨醇、肌醇、異丙醇或甘油其中的一種或兩種W上的混合物，優選 為甘油；
[0028] 氨基酸:選用絲氨酸、甘氨酸、丙氨酸或賴氨酸其中的一種或兩種W上的混合物， 優選為甘氨酸；
[0029] 蛋白穩定劑:選用BSA、脫脂奶粉、酪蛋白、小牛血清、牛IgG或鼠 IgG其中的一種或 兩種W上的混合物，優選為質量百分含量為0.1-2.5%BSA、0.1-1.5%酪蛋白或0.01-0.1 % 牛IgG中的一種或兩種W上的混合物；
[0030] 馨合劑:選用邸TA或DTPA其中的一種或兩種的混合物，優選為DTPA;
[0031] 表面活性劑:選用Tween-20、Tween-40、NP-40、TritonX-100或十二烷基硫酸鋼其 中的一種或兩種W上的混合物，優選為質量百分含量為0.01~0.5%的Tween-20或化iton X-100中的一種或兩種的混合物；
[0032] 防腐劑:選用硫柳隸、Proclin 300、疊氮鋼或洗必泰其中的一種或兩種W上的混 合物；
[0033] 添加劑:選自質量百分比為0.1-1 %的陽G6000、0.05-0.5%的明膠、0.9%的氯化 鋼其中的一種或兩種W上的混合物，優選為質量百分含量為0.05-0.5%PEG6000和0.9%氯 化鋼；
[0034] 緩沖液:選自濃度為0.01-0.2mol/L的巧樣酸鹽緩沖液、MES緩沖液、Tris-HCl緩沖 液或憐酸鹽緩沖液其中的一種，優選為0.05-0.2mol/L的巧樣酸鹽緩沖液或0.01-0.1mol/L 的MES緩沖液。
[0035] 稀釋液的配制方法如下：
[0036] 1)將上述原料混合，攬拌至完全溶解，得到混合液；
[0037] 2)將步驟1)得到的混合液攬拌混勻，加入肥1或化0H調節抑值為6.4± 0.1，即得到 稀釋液。
[003引實施例1:
[0039] -種能使叮晚醋抗原抗體結合物穩定的稀釋液，其是由如下質量百分數計的組分 制備而成： 篇糖 0 2% 海藻糖 0 1% 甘油 1% 甘氣釀 0.1% BSA 0.1%
[0040] DTPA 0 002% Tween-20 0 01% 疊氮尉] 0.05% PEG6000 0.05% 氯化銅 0.9% 梓橡酸鹽緩沖液 余量。
[0041 ]稀釋液的配制方法如下：
[0042] 1)按配方量的薦糖、海藻糖、甘油、甘氨酸、854、0了?4、1^6611-20、疊氮鋼、？666000 和氯化鋼加入0. 〇5mol/L巧樣酸鹽緩沖液中，攬拌至完全溶解，得到混合液；
[0043] 2)將步驟1)得到的混合液攬拌混勻，加入化0的周節抑值為6.4±0.1，即得到稀釋 液。
[0044] 用實施例1配制的稀釋液對下面結合物進行稀釋，結合物分別是日丫晚醋-FSH抗體 和叮晚醋-E2抗原，稀釋至工作濃度，得到日丫晚醋-FSH抗體稀釋液（1)和日丫晚醋-E2抗原稀釋 液（1)。兩種稀釋后的結合物各分出13瓶，每瓶大概1ml。其中3瓶放置37°C烘箱進行加速實 驗，另外5瓶放置2-8 °C冰箱保存，還有5瓶放置室溫保存。
[0045] 實施例2:
[0046] -種能使叮晚醋抗原抗體結合物穩定的稀釋液，其是由如下質量百分數計的組分 制備而成： 廉糖 2% 海藻糖 1% 甘凍 10% 甘氨酸 1% BSA 25%
[0047] DTPA 0 01% Tween-20 0 05% 疊氮擁 0.憐 PEG6000 0.5% 氯化納 0.少知
[004引梓橡酸鹽緩沖浪 余量。
[0049]稀釋液的配制方法如下：
[00加]1)按配方量的薦糖、海藻糖、甘油、甘氨酸、854、0了?4、1^6611-20、疊氮鋼、？666000 和氯化鋼加入0.2mol/L巧樣酸鹽緩沖液中，攬拌至