一種仁果類水果中708種農藥殘留gc-q-tof/ms偵測技術的制作方法
【技術領域】
[0001 ]本發明設及農殘檢測領域，特別設及一種應用GC-Q-T0F/MS篩查仁果類水果中708 種農殘的偵測方法。
【背景技術】
[0002] 水果蔬菜與人們的生活息息相關，尤其是仁果類水果(蘋果、批把、梨和山植等）的 營養價值備受消費者的青睞。但是，目前在仁果類水果的種植，生長W及保藏過程中可能使 用的農藥及化學品已超過1100種。然而，伴隨了農藥的廣泛使用，其過量使用、濫用和誤用 等不規范行為也隨之產生，使得農藥殘留于農產品中，從而給人類健康造成潛在威脅，同時 也對農產品的進出口貿易產生了不利影響。
[0003] 早在1976年世界衛生組織(WHO)、糧農組織(FA0)和聯合國環境規劃署(UNEP)共同 建立了全球環境檢測系統/食品項目（Global Environment Monitoring System,GEMS/ 化od)，旨在掌握會員國食品污染狀況，了解食品污染物攝入量，保護人體健康，促進貿易發 展。現在，世界各國都把食品安全提升到國家安全的戰略地位。農藥殘留限量是食品安全標 準之一，也是國際貿易準入口檻。同時，對農藥殘留的要求呈現出品種越來越多，限量越來 越嚴格的發展趨勢，也就是國際貿易設立的農藥殘留限量口檻越來越高。現在歐盟已制定 了839種農藥的162248項Μ化標準，美國制定了351種農藥的39147項Μ化標準，日本制定了 579種農藥的51600多項MRL標準，我國2014年發布了381種農藥的3650項MRL標準。目前，國 際上普遍采用的一律標準限量為l〇yg/kg。因此，食品安全和國際貿易都呼喚高通量快速農 藥殘留檢測技術，運無疑也給廣大農藥殘留分析工作者提供了機遇和挑戰。在目前的眾多 農藥殘留分析技術中，色譜質譜聯用技術是實現高通量多殘留快速檢測的最佳分析手段。
[0004] 仁果類水果主要包括，蘋果、梨、山植和批把等，其中蘋果和梨是大宗消費的水果。 為了提高水果產量，果農往往會使用大量農藥。目前，農藥殘留分析多W氣相色譜、液相色 譜、氣相色譜-質譜和液相色譜-質譜聯用技術為主。運些檢測技術都首先需要農藥標準品 對照進行定性。例如，對100種農藥的檢測就需要準備相應的100種農藥標準品對照，而運 100種之外的農藥都會被漏檢。在農獸藥殘留實驗室的實際工作中，絕大多數實驗室都不會 儲備數百種農藥標準品，其原因是農藥標準品不僅價格昂貴，而且有效期只有2-3年，需要 重復投資。一般實驗室常備農藥標準品只有幾十種，其日常監測的農藥品種也就只限于運 幾十種，由此造成食品安全監測漏桐。
【發明內容】
[0005] 為了克服上述缺陷，本發明人團隊經過多年潛屯、研究，研發了 708種農藥的精確質 量數據庫W及一種果蔬中708種農藥殘留的GC-Q-T0F/MS偵測技術，實現了不需標準品對 照、即可對仁果類水果中708種農藥殘留進行快速偵測檢測，滿足了當前農產品中農藥殘留 高通量快速檢測的急需。
[0006] 一方面，本發明提供了一種GC-Q-T0F/MS檢測仁果類水果中708種農藥殘留的偵測 方法，其特征在于:建立708種農藥TOF/MS數據庫，同時對仁果類水果中708種農藥進行定性 偵測與確證;該方法包括W下步驟：
[0007] (1)將農藥標準品分別配制成l-5mg/L的標準溶液，設定條件下經GC-QT0F/MS-級 模式全譜數據測定每種標準溶液的全譜數據，分別得到每種農藥的化學分子式、保留時間、 碎片離子精確質量數、離子豐度比；
[0008] (2)將步驟(1)中獲得的一級模式全譜數據，經核實后的碎片離子全掃描質譜圖導 入PO)L軟件中，并與對應的農藥信息相關聯，建成T0F/MS精確質量數據庫，用于數據檢索分 析；
[0009] (3)與步驟(1)相同的設定條件下仁果類水果的測定待測樣品中農藥的全譜數據， 得到其含有的農藥的化學分子式、保留時間、碎片離子精確質量數、離子豐度比；
[0010] (4)對樣品測定結果經精確質量數據庫檢索，對符合鑒定依據的檢出農藥進行準 確鑒定，從而獲得仁果類水果中的農殘種類。
[0011] 優選的，通過對仁果類水果進行前處理W獲得仁果類水果的測定待測樣品，所述 前處理方法包括W下程序：
[0012] 樣品制備:仁果類水果樣品經0.5-5體積％醋酸乙臘勻漿提取，經脫水和離屯、、濃 縮后，再經化rbon/N出柱凈化，乙臘+甲苯洗脫殘留農藥，經再濃縮、過濾后制成待測樣液a。
[0013] 本發明所具有的有益效果：
[0014] 1、本發明W高分辨碎片離子精確質量數、保留時間、離子豐度比等化合物信息為 識別標準，建立的708種農藥偵測和確證技術方法，徹底改變了原有W化合物標準物為參比 的定性模式，是一種不需要標準物對照，快速、高通量、準確可靠的農藥殘留檢測新技術。
[0015] 2、本發明在不需標準物對照的前提下，實現了 708種農藥殘留的定性偵測和確證， 可W大大節省購買標準物的成本，也更加環保、安全。
[0016] 3、本發明可在1小時內完成708種農藥偵測、定性與確證，與傳統檢測方法相比較， 可W提高工作效率數百倍。
[0017] 4、本發明能夠做到對仁果類水果樣品中708種農藥殘留一次性提取凈化，一次進 樣檢測，與傳統檢測方法相比較，可W節省檢測成本、提高工作效率數百倍。
[0018] 5、本發明可W測試的仁果類水果樣品中農藥包括W下物質中的一類或幾類:有機 憐類農藥，氨基甲酸醋類農藥，苯并咪挫類農藥，橫酷脈類農藥，煙堿類農藥，除蟲菊醋類農 藥及其他類型的農藥及代謝物。
[0019] 6、本發明建立的GC-QT0F/MS偵現版術指標巧描范圍50-600m/z;現憶的精確質量 可達O.OOOlm/z;質量精度可控制在20ppmW內；掃描速度在50-600m/z范圍為每秒5次。
[0020] 7、本發明提供的一種應用氣相色譜四級桿飛行時間質譜(GC-Q-T0F/MS)快速篩查 仁果類水果中708種農藥殘留的高分辨質譜偵測技術在7個農藥殘留分析實驗室得到了推 廣和應用，經過對30多個省市多個市售仁果類水果樣品的偵測驗證，取得了重要的殘留偵 測數據。
[0021] 8、同時偵測的708種農藥中，偵測靈敏度一律低于標準10微克/千克，滿足各國農 藥殘留ML水平篩查的要求。
[0022] 本發明的其它特征和優點將在隨后的【具體實施方式】部分予W詳細說明。
【附圖說明】
[0023] 附圖是用來提供對本發明的進一步理解，并且構成說明書的一部分，與下面的具 體實施方式一起用于解釋本發明，但并不構成對本發明的限制。在附圖中：
[0024] 圖1是北京地區市售蘋果樣品GC-Q-T0F/MS技術檢出頻次最高農藥(氣草敏)結果 示例。
[0025] 圖2是北京地區市售蘋果樣品GC-Q-T0F/MS技術檢出的頻次最高農藥(氣草敏）的 質譜信息與數據庫進行比對的結果。
[0026] 圖3是沈陽地區市售蘋果樣品GC-Q-T0F/MS技術檢出頻次最高農藥（甲酸菊醋）結 果不例。
[0027] 圖4是沈陽地區市售蘋果樣品GC-Q-T0F/MS技術檢出的頻次最高農藥（甲酸菊醋） 的質譜信息與數據庫進行比對的結果。
[00%]圖5是濟南地區市售梨樣品GC-Q-T0F/MS技術檢出頻次最高農藥(毒死婢）結果示 例。
[0029] 圖6是濟南地區市售梨樣品GC-Q-T0F/MS技術檢出的頻次最高農藥(毒死婢）的質 譜信息與數據庫進行比對的結果。
[0030] 圖7是沈陽地區市售梨樣品GC-Q-T0F/MS技術檢出頻次最高農藥(威殺靈）結果示 例。
[0031] 圖8是沈陽地區市