取1.0X 10-3 mol/L Ru(bpy)32+進行苦參堿的電化學發光分析研究。
[0045] 8、儀器參數的優化選擇 在ECL儀器參數中，光電倍增管負高壓是其靈敏度和線性范圍的主要影響因素，為實現 檢測信號最佳，研究將Silica sol / MWCNTs-ZnO@Ag /Ti〇2 sol - Ru(bpy)32+修飾熱解石 墨電極放入含有1.0Xl(T5mol/L苦參堿的抑8.5憐酸鹽緩沖溶液中，考察了負高壓從-600 V變化到-900 V過程中對苦參堿-Ru(bpy) 32+體系電化學發光信噪比的影響，發現信噪比隨 負高壓增加先增大后減小，并在-800 V達到最佳值，故選擇-800 V。
[0046] 同時，在20 mV/s~120 mV/s掃描速率下，苦參堿-Ru(bpy) 32+體系的電化學發光峰 高隨掃描速率增加呈先增大后趨緩的趨勢，運可能與體系中Ru(bpy) 32+氧化速率及苦參堿 失電子后還原Ru(bpy) 33+的速率有關，兼顧到降低儀器損耗，W100 mV/s為最佳測試速率。
[0047] 9、E化傳感器的線性范圍與檢測線 在最優條件下，考察不同濃度苦參堿溶液在Silica sol / MWCNTs-ZnO@Ag / Ti化 sol - Ru(bpy)32+修飾熱解石墨電極上的電化學發光強度響應曲線，苦參堿濃度在1.0 X 1〇-8~1.0X10-5 mol/L范圍內與相對峰高呈良好線性關系(R2=0.9938，n=16)，其線性回歸方 程為：I(Counts)= 26.60 X 10化+1404.7，檢出限（S/N=3)為8.16 X 10-W mol/L(圖 8)。
[004引10、E化傳感器的重現性及抗干擾性 負載有Ru(bpy)32+的Silica sol / MWCNTs-Zn0@Ag / Ti02 sol - Ru(bpy)32+修飾熱 解石墨電極具有較好的重現性。在試驗選定的最佳條件下，用修飾電極對1.0 X 1(T5 mol/L 苦參堿連續測定10次，其ECL強度值的RSD為4.25%(圖9)，表明該傳感器用于電化學發光測 定苦參堿具有很好的重現性。
[0049] 此外，固定苦參堿標準品的摩爾濃度為1.0 Χ10-5 mol/L，考察了部分常見無機鹽 離子及其他類物質對體系E化的影響。結果表明，保持相對測量誤差< ±0.5%，1000倍的化 \r、Zn2+、S〇42-、Cr、C〇32-;50 倍的淀粉、葡萄糖；25 倍的 Fe2\Mg2\Fe3\Ca2+、Cu 2+;2 倍的薦 糖、麥芽糖對苦參堿的測定均不產生干擾。
【主權項】
1. 一種利用復合修飾劑負載熱解石墨電極電致化學發光行為測定藥物中苦參堿含量 的方法，其特征在于:包括以下步驟： A、將純化后的多壁碳納米管配制成O.OOlmol/L~l.Omol/L的多壁碳納米管溶液； 8、納米二氧化鈦溶膠的制備:將!1(：14通入乙醇中配制體積分數為3.5~4.5%的11(：14-EtOH溶液，取TiCl4_EtOH溶液并用氨水調節pH=8.5~9.0，抽濾，濾餅用去離子水洗滌至中 性，用H2〇2溶解，再加入硅溶膠和水，于92~98°C回流3.5~4.5h得到納米二氧化鈦溶膠； H2〇2、硅溶膠、水的用量按TiCl4_EtOH溶液:H2〇2:硅溶膠:水的體積比為1:1.4~1.6:0.2~ 0.3:3.2 ~3.4 計算； C、 納米氧化鋅-銀核殼量子點的制備： C-1、按0. lg硝酸銀:28~32mL乙醇計，將硝酸銀加入快速攪拌的乙醇溶液中，并在38~ 43 °C下分散5~15min，得到硝酸銀溶液； C-2、按lg聚乙烯吡咯烷酮:48~53mL乙醇計，將聚乙烯吡咯烷酮加入乙醇中并于58~ 63 °C溶解5~15min，得到聚乙烯吡咯烷酮溶液； C-3、將硝酸銀溶液逐滴加入到聚乙烯吡咯烷酮溶液中，硝酸銀溶液與聚乙烯吡咯烷酮 溶液的體積比為1:1~1.1，反應1.8~2.2h得銀溶膠； C-4、按O.Olg NaOH:22~28mL乙醇計，將NaOH在48~53°C下加入乙醇中分散15~ 25min，得到NaOH溶液； C-5、按O.lg無水醋酸鋅:20~25mL乙醇計，將無水醋酸鋅加入乙醇中，在58~63°C下持 續攪拌15~25min溶解，得到無水醋酸鋅溶液； C-6、將無水醋酸鋅溶液和銀溶膠混合均勻得混合溶液，無水醋酸鋅溶液與銀溶膠體積 比為1:1.9~2.2，混合溶液由最初的黃色逐步變為深灰色，最終穩定在灰色，此時加入混合 溶液體積分數3.0~3.6%的聚乙二醇，在48~53 °C條件下攪拌5~15min后，于30s內迅速加 入步驟C-4制備好的NaOH溶液，NaOH溶液的加入量為混合溶液體積分數64~70%，在38~43 °C下反應0.8~1.2h，得到ZnOAg核殼量子點； D、 傳感器的制備： D-1、熱解石墨電極經過打磨、拋光、清洗后，室溫晾干待用； D-2、將0.001mol/L~1.0mol/L的多壁碳納米管溶液與0.0025 mol/L的ZnOOAg核殼量 子點按體積比為1:19~21超聲分散25~35min，制備出MWCNTs-ZnOOAg復合材料，再與硅溶 膠、納米二氧化鈦溶膠按MWCNTs-ZnOOAg復合材料:硅溶膠:納米二氧化鈦溶膠體積比1:1:2 超聲混合均勻得到均一、穩定的Silica sol / MWCNTs- ZnOOAg / Ti02 sol復合溶液，按 聯吡啶釕溶液:硅溶膠:MWCNTs-ZnO@Ag復合材料:納米二氧化鈦溶膠體積比為1:1:1:2向該 Silica sol / MWCNTs- ZnOOAg / Ti〇2 sol復合溶液中加入0.001mol/L聯吡啶釕溶液，超 聲振蕩使其混勻，然后取卜4 yL加入聯吡啶釕溶液的Silica sol / MWCNTs- ZnOOAg / Ti02 sol復合溶液，滴加在步驟D-1得到的熱解石墨電極表面，于23~28°C下晾干，即可得 至丨JSilica sol / MWCNTs-ZnOOAg / Ti〇2 sol - Ru(bpy)32+修飾的熱解石墨電極； E、 測定藥物中苦參堿含量:使用步驟D制備得到的Silica sol / MWCNTs-ZnOOAg / Ti02 sol - Ru(bpy)32+修飾的熱解石墨電極，按照常規方法測定藥物中苦參堿含量。2. 根據權利要求1所述的利用復合修飾劑負載熱解石墨電極電致化學發光行為測定藥 物中苦參堿含量的方法，其特征在于:步驟A的具體操作為:取部分多壁碳納米管置于濃硫 酸與濃硝酸體積比為3:1的溶液中，于60°C回流反應12h，使用0.22μηι微孔濾膜過濾，濾餅用 去離子水洗滌至中性，烘干后以二甲基甲酰胺為溶劑配制成lmol/L多壁碳納米管溶液。3. 根據權利要求1所述的利用復合修飾劑負載熱解石墨電極電致化學發光行為測定藥 物中苦參堿含量的方法，其特征在于:所述聚乙二醇為PEG200的聚乙二醇。4. 根據權利要求1所述的利用復合修飾劑負載熱解石墨電極電致化學發光行為測定藥 物中苦參堿含量的方法，其特征在于:步驟A配制的多壁碳納米管溶液和步驟D-2所述的多 壁碳納米管溶液的濃度為〇. 〇〇8mol/L~0.012mol/L。
【專利摘要】本發明涉及一種利用復合修飾劑負載熱解石墨電極電致化學發光行為測定藥物中苦參堿含量的方法，其是利用硅溶膠、二氧化鈦溶膠的成膜性、納米氧化鋅-銀的大比表面積及碳納米管良好的電學性能，制備了復合修飾劑，基于此復合材料將聯吡啶釕固定在熱解石墨電極表面，建立了制備高性能電化學發光傳感器的新方法，并基于苦參堿對Ru(bpy)32+增敏作用實現了對苦參堿栓的測定。在最佳實驗條件下，苦參堿在1.0×10-8～1.0×10-5？mol/L范圍內與相對發光強度呈線性關系，檢出限為8.16×10-10mol/L，連續平行測定1.0×10-5？mol/L的苦參堿溶液10次，發光強度的相對標準偏差為4.25%。本方法用于苦參堿栓的測定具有較高的選擇性和靈敏度，且實現了聯吡啶釕的重復使用。
【IPC分類】G01N21/66, G01N27/30
【公開號】CN105628682
【申請號】CN201610002998
【發明人】李彥青, 羅應, 李利軍, 程昊, 黃文藝, 馮軍, 孔紅星
【申請人】廣西科技大學
【公開日】2016年6月1日
【申請日】2016年1月4日