Il-12在診斷和治療非小細胞肺癌遠處轉移中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及腫瘤診斷及治療領域。具體地，本發明涉及IL-12在診斷和治療非小 細胞肺癌遠處轉移中的應用。
【背景技術】
[0002] 肺癌是世界上許多國家最常見的惡性腫瘤之一，在我國，肺癌居惡性腫瘤死因首 位。肺癌可分為非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC)和小細胞肺癌（small cell lung cancer, SCLC)兩大類，其中非小細胞肺癌（NSCLC)占所有肺癌病例的80%~ 85%，包括鱗癌、腺癌、未分化癌、非小細胞型肺癌和大細胞癌。鱗癌在肺癌中最為常見，約 占肺癌的40%，而男性則占80%左右。其中只有15-25%的非小細胞肺癌有手術治療的機 會，而即使接受根治性手術治療，仍然有50%的NSCLC患者會復發。
[0003] 然而，目前的治療手段中缺乏對原發性非小細胞肺癌預后的有效區分標志物，導 致不同預后的患者仍接受相同的治療，即使手術，仍會有復發可能。因此，本領域迫切需要 開發一種能夠區分非小細胞肺癌侵襲性高低的檢測方法或標記物，從而對患者的預后進行 提前判斷，并提供個性化治療方案。
【發明內容】
[0004] 本發明公開了 IL-12與非小細胞肺癌轉移的相關性。
[0005] 本發明第一方面，提供了白介素 -12(IL_12)或其檢測試劑的用途，用于制備預測 或診斷非小細胞肺癌遠處轉移的試劑盒。
[0006] 在另一優選例中，所述的IL-12來源于哺乳動物，較佳地，來源于人、小鼠、大鼠。
[0007] 在另一優選例中，所述的非小細胞肺癌包括肺鱗癌、肺腺癌、低分化肺癌、大細胞 肺癌；較佳地，為肺鱗癌。
[0008] 在另一優選例中，所述的試劑盒還含有白介素-8(IL-8)、和/或白介素-1 (IL-1) 的檢測試劑。
[0009] 在另一優選例中，所述的檢測是測定組織樣品、血液樣品、血清樣品或體液樣品， 較佳地，所述的組織樣品包括癌組織和/或癌旁組織。
[0010] 在另一優選例中，所述的檢測包括B i ο-P1 eX懸液芯片系統、酶聯免疫反應法 (ELISA法）檢測或時間分辨免疫熒光法（TRFIA法）檢測。
[0011] 在另一優選例中，所述的遠處轉移包括除肺部以外的其他器官的轉移。
[0012] 在另一優選例中，所述的遠處轉移包括腦轉移、骨轉移、肝轉移、胸膜轉移。
[0013] 在另一優選例中，所述IL-12的檢測試劑為IL-12的抗體。
[0014] 在另一優選例中，所述試劑盒中還含有IL-12用于陽性對照。
[0015] 本發明第二方面，提供了一種用于預測或診斷非小細胞肺癌遠處轉移的試劑盒， 所述的試劑盒含有一容器，所述的容器中含有IL-12的檢測試劑；以及標簽或說明書。
[0016] 在另一優選例中，所述的預測或判斷非小細胞肺癌轉移指判斷腫瘤轉移是否發 生，和/或判斷發生腫瘤轉移的可能性（易感性）大小。
[0017] 在另一優選例中，所述預測或診斷的對象為非小細胞癌組織和/或癌旁組織。
[0018] 在另一優選例中，所述的標簽或說明書中注明以下內容：
[0019] 當檢測樣本中的IL-12表達量C1與對照樣本中IL-12表達量C0相比， C1彡1. 3C0,較佳地C1彡1. 5C0,更佳地，C1彡2. 0C0,則表明該檢測樣本為有遠處轉移的 非小細胞肺癌概率大，或表面該非小細胞肺癌樣本可能發生遠處轉移。
[0020] 本發明第三方面，提供了一種IL-12抑制劑的用途，用于制備抑制非小細胞肺癌 遠處轉移和/或抑制非小細胞肺癌細胞侵襲或遷移的藥物組合物。
[0021] 在另一優選例中，所述的IL-12抑制劑包括IL-12特異性抗體、IL-12的活性抑制 劑和受體拮抗劑。
[0022] 在另一優選例中，所述的藥物組合物含有IL-12抑制劑，和藥學上可接受的載體。
[0023] 在另一優選例中，所述的藥物組合物還含有任選的化療劑。
[0024] 在另一優選例中，所述的藥物組合物中IL-12的施用量為0· 01-10mg/kg，較佳地， 為 0· l_5mg/kg〇
[0025] 本發明第四方面，提供給了一種非診斷性的預測或判斷非小細胞肺癌細胞株是否 為高侵襲性細胞株的方法，包括步驟：測定所述的非小細胞肺癌細胞株中IL-12的表達量， 當IL-12的表達量顯著高于正常肺細胞內IL-12的表達量，則說明所述非小細胞肺癌細胞 株為高侵襲性細胞株。
[0026] 本發明第五方面，提供了一種體外非治療性的抑制非小細胞肺癌細胞侵襲或遷移 的方法，包括步驟：
[0027] 在IL-12抑制劑存在的條件下，培養非小細胞肺癌細胞，從而抑制非小細胞肺癌 侵襲或遷移。
[0028] 本發明第六方面，提供了一種篩選IL-12抑制劑的方法，包括步驟：
[0029] (a)在非小細胞癌腫瘤細胞培養體系中添加候選化合物，作為測試組，在相同的細 胞培養體系中不添加候選化合物，作為對照組；
[0030] (b)觀察測試組中細胞的侵襲和遷移，其中，當測試組中細胞的侵襲和遷移程度 Ml顯著低于對照組中細胞的侵襲和遷移程度M0,則表明所述的候選化合物為11-12抑制 劑。
[0031] 本發明第七方面，提供了一種制備非小細胞肺癌遠處轉移動物模型的方法，包括 步驟：向非小細胞肺癌荷瘤動物施用IL-12,從而產生非小細胞肺癌遠處轉移動物模型。
[0032] 本發明第八方面，提供了一種治療轉移性非小細胞肺癌的方法，向需要的對象施 用IL-12抑制劑，從而治療轉移性非小細胞肺癌。
[0033] 應理解，在本發明范圍內中，本發明的上述各技術特征和在下文（如實施例）中具 體描述的各技術特征之間都可以互相組合，從而構成新的或優選的技術方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【具體實施方式】
[0034] 本發明人經過廣泛而深入的研究，通過大樣本的篩選，首次意外地發現，炎癥細胞 因子IL-12參與了非小細胞肺癌（鱗癌）遠處轉移的發生和發展，即IL-12在非小細胞肺 癌中具有促進轉移、侵襲的作用，因此當在非小細胞肺癌組織（或血清）中檢測出具有表達 量過高的IL-12時，可以認為該腫瘤組織是具有（或患者患有）高侵襲性的非小細胞肺癌。 此外，本發明人還發現，通過IL-12的抑制劑降低IL-12的表達量，能夠減弱非小細胞肺癌 的侵襲性、降低癌細胞的轉移能力。在此基礎上，完成了本發明。
[0035] 術語
[0036] 如本文所用，術語"侵襲"、"轉移"、"遷移"均指的是非小細胞肺癌細胞的遠處轉移 能力，例如在transwell侵襲實驗中，發現或證實的腫瘤細胞的侵襲能力；或在體內，原發 性的非小細胞肺癌在除肺部以外的其他組織、器官的生長與增殖。術語"高侵襲性細胞株" 指的是易發生遠處轉移或遷移的細胞株。
[0037] 非小細胞肺癌
[0038] 肺癌從病理分型上可以分為非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer, NSCLC)和小細胞肺癌（small cell lung cancer, SCLC)兩大類，其中非小細胞肺癌 (NSCLC)占所有肺癌病例的80 %~85 %，包括鱗癌、腺癌、未分化癌（低分化癌）、非小細胞 型肺癌和大細胞癌。其中，未分化癌（低分化癌）指的病理上確定該類型細胞癌為原始的 肺癌細胞；而非小細胞型肺癌指的是病理上無法歸為鱗癌、腺癌、大細胞癌或未分化癌任意 一種，且也不屬于小細胞肺癌的非小細胞肺癌。
[0039] 白介素-12
[0040] 白介素-12 (IL-12)是具有廣泛生物學活性的細胞因子，主要由B細胞和巨噬細胞 產生；IL-12主要作用于T細胞和NK細胞，刺激活化型T細胞增殖，誘導NK細胞的細胞毒 活性并促進其分泌IFN- γ、TNF- a、GM-CSF等細胞因子；增強對腫瘤細胞的殺傷效應。
[0041] 通常認為，IL-12有助于對腫瘤細胞的殺傷作用，據報道，在胃癌、結直腸癌、宮頸 癌中，IL-12的表達量均有不同程度的降低。然而，本發明人通過病理樣本篩選以及實驗驗 證發現，IL-12在非小細胞肺癌（尤其是鱗癌）中呈高表達表現，且與癌癥的侵襲程度密切 相關