琥珀酸索利那新中r-3-奎寧醇的檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發明是一項利用高效液相色譜法檢測琥珀酸索利那新中R-3-奎寧醇的新技術， 適用于其定量分析。
【背景技術】
[0002] 琥珀酸索利那新（solifenacin)，化學名為(3R)-1-氮雜雙環-[2,2,2]辛烷-3-基 (1S)-1-苯基-3，4_二氫異喹啉-2(1H)_甲酸酯丁二酸鹽，是一種毒蕈堿M3-受體拮抗劑。其 作為治療尿道解痙藥被用來治療膀胱過動的癥狀，結構式如附圖1所示。琥珀酸索利那新于 2004年在荷蘭、德國、英國、法國及丹麥上市，2005年在美國上市，2009年在中國上市，迄今 為止在全球50多個國家和地區上市銷售。
[0003]臨床實踐匯總表明，藥品產生的不良反應除了與藥品主成分藥理活性有關外，還 與藥品中存在的雜質有重要的關系。目前，我國對藥品研發中雜質研究的要求更加嚴格與 明確。R-3-奎寧醇（英文名：R-3-Quinuclidinol)，化學名為1-氮雜雙環-[2,2,2]辛烷-3-醇，是很多抗膽堿藥物如琥珀酸索利那新、瑞伐托酯等的重要中間體，結構式如附圖1所示。 R-3-奎寧醇作為琥珀酸索利那新的主要雜質，產生途徑包括起始物料殘留和產品降解。目 前，歐洲藥典草案《1^€6代11〇6:?4/?!1/^1口.10(：/^(13)884即\\\\:2779》將琥珀酸索 利那新中R-3-奎寧醇作為已知雜質列入質量標準，采用薄層色譜法對其進行控制。其他國 家沒有公開琥珀酸索利那新中R-3-奎寧醇的檢測方法。由于薄層色譜法檢測靈敏度低，不 可定量分析，且顯色時間長，其準確度、操作靈敏度不及高效液相色譜法。故建立一種利用 高效液相色譜準確快速測定琥珀酸索利那新中R-3-奎寧醇的簡便方法具有重要的意義。
【發明內容】
[0004] 發明目的：在于提供一種能夠快速、準確測定琥珀酸索利那新中R-3-奎寧醇含量 的檢測方法。
[0005] 技術方案:一種琥珀酸索利那新中R-3-奎寧醇的檢測方法，用R-3-奎寧醇作為對 照品進行定位，采用高效液相色譜法檢測，其特征在于，色譜條件:色譜柱選用氨丙基鍵合 硅膠為填充劑的正相色譜柱;流動相為正己烷-乙醇-甲醇-二乙胺的混合溶液，甲醇占總體 積的5%-20%，乙醇占總體積的10%-50%，正己烷占總體積的50%-70%，二乙胺占總體積的 0.05%-0.2%;檢測器選用紫外檢測器，檢測波長為210nm。
[0006] 本發明所述檢測方法，優選的技術方案是，流動相為正己烷-乙醇-甲醇-二乙胺的 混合溶液中，甲醇占總體積的10%;乙醇占總體積的30%;正己烷占總體積的60%;二乙胺占總 體積的0.1%。
[0007] 本發明優選的技術方案，流動相中正己烷、乙醇、甲醇、二乙胺的體積比為600: 300:100:1〇
[0008] 本發明琥珀酸索利那新中R-3-奎寧醇含量的檢測方法，選用的液相色譜柱以氨丙 基鍵合硅膠為填充劑;使用紫外檢測器，檢測波長為210nm;流動相為正己烷-乙醇-甲醇-二 乙胺(600:300:100:1)溶液;樣品采用流動相溶解，樣品濃度為20mg/ml，以外標法根據峰面 積進行定量分析。采用氨丙基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(4.6 X 250mm，5μπι)。
[0009] 本發明所述的方法，其特征在于，利用高效液相色譜法，按外標法以峰面積計算琥 珀酸索利那新中R-3-奎寧醇含量。
[0010]本發明所述檢測方法，其特征在于，其檢測波長為210nm，柱溫為室溫，流速為 1 .Oml/min，進樣體積為20μ1。
[0011]本發明所述檢測方法，其特征在于，流動相溶解配制樣品溶液，樣品濃度為20mg/ ml〇
[0012] 溶液配制： R-3-奎寧醇對照品溶液:精密稱取R-3-奎寧醇適量，加流動相溶解并稀釋制成每lml中 約含0.02mg的溶液，作為對照品溶液。
[0013]供試品溶液:精密稱取琥珀酸索利那新適量，加溶劑流動相溶解并定量稀釋制成 每lml中約含20mg的溶液，作為供試品溶液； 測定:分別精密量取20μ1對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀中進行測定。 [0014]有益效果:本檢測方法的專屬性、定量限與檢測限、線性、精密度、溶液穩定性等方 面均經詳細驗證，且各項驗證結果均符合相關法規和指導原則的要求，實際檢測效果良好。 具體通過以下技術方法實施。
[0015] 有益效果:本發明提供了一種高效液相色譜法檢測琥珀酸索利那新中R-3-奎寧醇 的分析方法。其特點在于:采用高效液相色譜法，以氨丙基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱;使 用紫外檢測器，檢測波長為210nm;流動相為正己烷-乙醇-甲醇-二乙胺(600:300:100:1)溶 液;樣品采用流動相溶解，樣品濃度為20mg/ml，以外標法根據峰面積進行定量分析。該方法 的優點在于:選擇性好、靈敏度及準確度高、重現性好、簡便快速，為琥珀酸索利那新中R-3-奎寧醇的準確檢測提供了保障。
【附圖說明】
[0016] 圖1為本發明實例1中R-3-奎寧醇定位溶液色譜圖。
[0017] 圖2為本發明實例1中琥珀酸索利那新定位溶液色譜圖。
[0018] 圖3為本發明實例1中混合溶液色譜圖。
[0019] 圖4為本發明實例2中R-3-奎寧醇對照品溶液色譜圖。
[0020]
【具體實施方式】
[0021]下面結合【具體實施方式】對本發明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為闡明 本發明，而不是限制本發明的范圍。
[0022]實施例1:流動相體系的選擇 R-3-奎寧醇定位溶液:精密稱取R-3-奎寧醇約10mg，置10ml量瓶中，加流動相溶解并稀 釋至刻度，作為R-3-奎寧醇定位溶液。
[0023] 琥珀酸索利那新定位溶液:精密稱取迪沙藥業集團SLNX-07-63-34-15批琥珀酸索 利那新原料藥約25mg，置50ml量瓶中，流動相溶解并稀釋至刻度，作為琥珀酸索利那新定位 溶液。
[0024] 混合溶液:精密稱取R-3-奎寧醇與琥珀酸索利那新各適量，加流動相溶解并定量 稀釋制成每lml中約含R-3-奎寧醇lmg與琥珀酸索利那新0.5mg的溶液，作為混合溶液。
[0025] 測定條件：選用Intersil NH2(4.6X250mm，5ym)色譜柱，日立D-2000高效液相色 譜儀，流速l.〇ml/min，柱溫30°C，檢測器為紫外檢測器，檢測波長210nm，進樣體積20μ1。
[0026] 分別以正己烷-乙醇（500:500)、正己烷-乙醇-二乙胺(500:500:1)、正己烷_乙醇_ 甲醇(60:30:10)、正己烷-乙醇-甲醇-二乙胺(600: 300:100:1)為流動相，按上述測定條件 分別進樣R-3-奎寧醇定位溶液、琥珀酸索利那新定位溶液和混合溶液20μ1，記錄色譜圖。以 色譜峰間分離度、色譜峰理論塔板數、靈敏度為指標對流動相體系進行篩選。結果如表1所 不。
[0027] 表1不同流動相對混合溶液中R-3-奎中醇的影晌。
[0028]~實驗結果表明，流動相為正己烷-乙醇(50:50)時，R-3-奎寧醇出峰時間晚，峰展寬 大，靈敏度低;正己烷-乙醇流動相中加入甲醇，采用正己烷-乙醇-甲醇體系，可