大川芎片全時段多波長融合指紋圖譜的質量控制方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于一種中成藥的質量檢測技術領域，具體是一種大川芎片全時段多波長 融合指紋圖譜質量控制方法。
【背景技術】
[0002] 大川芎片由天麻、川芎兩味藥材組成，適用于活血化瘀，平肝熄風、主治頭風及瘀 血型頭痛、癥見頭痛，腦漲，眩暈，頸項緊張不舒，上下肢及凌晨身麻木，舌部瘀斑等、大川芎 片專門用于治療各種頭痛和眩暈。該方最早出自《宣明論方》卷二，方用"川芎一斤，天麻四 兩。上為末，煉蜜為丸。"用于"治首風，眩暈旋急，外和陽氣，風寒相博，胃膈痰飲，偏正頭痛， 身拘倦。"川芎、天麻二藥在祖國醫學中有悠久的應用歷史，當代中醫認為，川芎辛溫走竄， 走而不守，既入血分，又能行氣，為血中之氣藥；天麻甘平，專入肝經，具有平肝熄風之功效。 在大川芎片中，二者合用，共奏活血化瘀、平肝熄風、鎮定止痛之效。現代藥理研究證實，大 川芎片主要有鎮靜鎮痛、顯著改善腸系膜微循環、抗血小板釋放5-HT、阻斷血管內皮細胞鈣 通道及抗實驗性腦缺血等作用。
[0003] 隨著科學技術的創新與進步，現代先進分析檢測技術以及信息處理技術的日漸成 熟，使中藥分析檢測水平有了顯著提高，中藥質量控制方法得到不斷完善。大川芎片制劑組 方藥材成分復雜，單一波長測定不能全面、綜合的評價其質量。其中的天麻又為名貴中藥 材，天麻素是大川芎片質量控制的指標性成分，為避免市場上將天麻素單體代替天麻藥材 混入到大川芎片中，因此，建立綜合、全面、有效的質量評價標準具有重大的意義。中藥指紋 圖譜是中藥質量控制的有效技術手段，多波長融合技術更是提供更多的指紋圖譜信息，故 通過多波長融合技術手段建立指紋圖譜成為中藥質量控制和評價的一種發展模式，更能真 實客觀的反映中藥材及中成藥的內在質量，是一種潛移默化的從相對定量到絕對定量的提 升，為中藥材及中成藥的質量控制和物質基礎提供新的參考依據，為規范中藥制劑及其合 理使用奠定基礎。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種大川芎片全時段多波長融合指紋圖譜質量控制方法，該 方法將現代分析檢測技術和信息處理手段結合起來，為傳統中成藥大川芎片的質量控制提 供一種全面、穩定、可靠的評估方法，利于制藥企業控制中藥制劑的質量，保證藥物的藥效 穩定。
[0005] 為實現本發明的目的，本發明一方面提供一種大川芎片全時段多波長融合指紋圖 譜的質量控制方法，包括如下順序進行的步驟：
[0006] (1)制備供試品溶液：
[0007] 取大川芎片適量，用甲醇進行加熱回流提取，提取液過濾后即得供試品溶液；
[0008] ⑵制備對照品溶液：
[0009] 取天麻素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每lmL含天麻素對照品0. 4-0. 5mg的 溶液，即得；
[0010] (3)色譜條件與系統適用性試驗：
[0011] 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱；
[0012] 流動相：以甲酸溶液與乙腈的混合溶液為流動相，進行梯度洗脫，其中甲酸溶液為 流動相A，乙腈為流動相B ;流速1. OmL · min 1 ;柱溫30°C ;檢測波長210-320nm下同時進行 檢測；進樣量10 μ L ;理論塔板數計算，應不低于3000 ;
[0013] (4)全時段多波長融合：
[0014] 將210-320nm波長下的譜圖數據利用計算機軟件進行全時段融合，得到一張能夠 同時反映多個波長融合后的色譜圖和一組圖譜數據；
[0015] (5)樣品含量測定：
[0016] 應用融合后的指紋圖譜數據，計算樣品中指標成分的含量；
[0017] (6)對上述確定的含量測定方法進行有效性評價，其中包括專屬性、準確度、精密 度、重復性、穩定性、線性、范圍以及耐用性。
[0018] 其中，步驟（1)中所述供試品溶液按照如下步驟制備而成：
[0019] 取大川芎片適量，去除包衣后研細，接著精密稱取樣品粉末1. 9-2. lg，置于100mL 圓底燒瓶中，加甲醇80mL回流提取1次，提取時間為2h，然后過濾，濾液濃縮后，加甲醇定容 至10mL容量瓶中，搖勻，再采用0. 45 μ m微孔濾膜進行過濾，濾液即為供試品溶液。
[0020] 特別是，優選精密稱取大川芎片去除包衣后研細的粉末樣品2. 0g進行供試品溶 液的制備。
[0021] 尤其是，采用0. 22 μ m微孔濾膜進行過濾，濾液即為供試品溶液。
[0022] 特別是，步驟（1)中所述的甲醇選擇無水甲醇。
[0023] 其中，步驟（2)中所述天麻素對照品溶液的濃度優選為lmL溶液中含天麻素對照 品 0. 5mg。
[0024] 其中，步驟（3)中所述色譜柱選擇規格為4. 6mmX 250mm，5 μ m的AglientTC_C18 色譜柱；所述流動相的甲酸溶液選擇體積百分比濃度為〇. 04%的甲酸水溶液；所述檢測波 長選擇 210、225、254、270、320nm。
[0025] 特別是，步驟（3)中所述流動相梯度洗脫的技術參數為：
[0026]
[0027] 其中，步驟⑷中所述計算機軟件為AglientllOO色譜工作站中使用Matlab軟 件，對210-320nm波長下的譜圖數據進行所述的全時段多波長融合，獲得能夠同時反映多 波長融合后的色譜圖和一組圖譜數據。
[0028] 特別是，采用AglientllOO色譜工作站中使用Matlab軟件，對210、225、254、270、 320nm五個波長下的譜圖數據進行所述的全時段多波長融合，獲得能夠同時反映五個波長 融合后的色譜圖和一組圖譜數據。
[0029] 特別是，上述方法用于檢測提取方法相同或相近的含有大川芎片組成的任何一種 劑型，又可適用于任何一種由名貴中藥材組成的中藥復方的質量控制。
[0030] 本發明的大川芎片全時段多波長融合指紋圖譜質量控制方法的有益效果如下：
[0031] (1)本發明首次公開大川芎片多波長融合指紋圖譜質量控制方法，通過本方法可 以全面有效、安全可靠的控制大川芎片的質量，完善大川芎片質量控制方法。
[0032] (2)本發明采用現代先進分析檢測技術，可通過HPLC-MS對大川芎片中主要成分 進行分析檢測，獲得大量關于大川芎片中化學成分的色譜和光譜信息，更能真實客觀反映 大川芎片的內在質量。
[0033] (3)本發明是將現代分析檢測技術和信息處理手段結合起來對大川芎片進行多波 長融合，克服單一波長下信息量不足的缺點，降低檢測限，在不損失原有特征信息的基礎上 得到一張同時反映多個波長信息的色譜圖及圖譜數據，避免了市場上將天麻素單體代替名 貴藥材天麻混入到大川芎片中，影響大川芎片的治療效果。
[0034] (4)本發明的質量控制方法，其優點是操作簡便，穩定可靠，精密度高、重復性好、 易于掌握，能形成全面的質量控制體系控制樣品質量，解決實際生產問題。
[0035] (5)本發明所建立的大川芎片多波長融合指紋圖譜色譜圖可用于大川芎片的指紋 定性分析和定量分析，完善了大川芎片的質量控制標準，從而確保其安全性、有效性，形成 了一個均一、穩定、可控的質量控制體系，為規范中藥制劑及其合理使用奠定基礎。
【附圖說明】
[0036] 圖1是天麻素含量測定標準曲線圖。
[0037] 圖2是大川芎片210nm波長下HPLC指紋圖譜。
[0038] 圖3是大川芎片225nm波長下HPLC指紋圖譜。
[0039] 圖4是大川芎片254nm波長下HPLC指紋圖譜。
[0040] 圖5是大川芎片270nm波長下HPLC指紋圖譜。
[0041] 圖6是大川芎片320nm波長下HPLC指紋圖譜。
[0042] 圖7是大川芎片多