測定茶葉中溴氰菊酯農藥殘留量的方法
【專利說明】測定茶葉中溴氰菊酯農藥殘留量的方法
[0001]
技術領域
[0002]本發明屬于農藥檢測技術領域，具體涉及一種測定茶葉中溴氰菊酯農藥殘留量的方法。
【背景技術】
[0003]茶葉是我國出口創匯的一種傳統經濟作物，近年來隨著綠色食品概念的廣泛傳播，其內在品質衛生安全問題日益引起人們關注，也成了國際貿易中的技術壁皇。特別是歐盟于2004年8月27日頒布了一批食品中農藥最大殘留量(MRL)標準，其中包含了 168項茶葉農殘標準。茶葉檢測項目比以往增加不少，農藥最大殘留量值大幅降低，限量標準日趨嚴格。
[0004]擬除蟲菊酯類殺蟲劑是一類廣譜性殺蟲劑，擬除蟲菊酯作為農藥使用歷史較長。1948年，美國農業部實驗室進行人工合成研究，1950年第一個擬除蟲菊酯殺蟲劑“丙稀菊酯”在美國碳素化學公司試產，現已開發出七氟菊酯、聯苯菊酯、氯菊酯、氟氯氰菊酯、氟氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等多種產品。擬除蟲菊酯類殺蟲劑用量大，效果好，并且有一定的毒性和殘留期，這些特點就決定了此類農藥在茶葉種植過程中，在一定的條件下，使環境中的擬除蟲菊酯類殺蟲劑以不同的方式進入茶葉中累積起來，造成對茶葉的污染，影響了茶葉產品的質量。
[0005]目前，有關環境和食品中擬除蟲菊酯類殺蟲劑殘留量的測定方法報道比較多，而茶葉中擬除蟲菊酯類殺蟲劑殘留的測定報道較少。由于茶葉成分復雜，茶堿、茶色素、多酚類、脂類物質干擾測定，因而國家檢測標準不能完全滿足茶葉農藥殘留的實際需求。國內研究者對食品農藥殘留的測定的模式很多，主要是針對食品中農藥殘留種類、水含量以及脂肪含量設置的。有的模式主要針對于脂肪含量低、含水量低設置了檢測方法，這種方法茶葉農藥殘留檢測同樣也可以作為參考。因為茶葉中的脂肪含量低，含水量也不高，符合這種模式條件。本發明根據現有技術中對蔬菜及食品中農藥殘留檢測的研究現狀，提出了針對茶葉中擬除蟲菊酯類農藥殘留量的檢測方法。
【發明內容】
[0006]針對上述問題，本發明旨在提供一種簡單、快速、準確的測定茶葉中溴氰菊酯殘留量的方法。
[0007]—種測定茶葉中溴氰菊酯農藥殘留量的方法，包括如下步驟:
(1)樣品準備:將茶葉烘干至水分4-6%，研磨，過l-3mm篩網；
(2)溴氰菊酯粗提取:將茶葉粉末l_3g置于離心管中，加入10mL去離子水充分浸潤，靜置5-15min，加入8-12mL石油醚和1 mL混合內標工作液，震蕩混勾，加入4 g無水硫酸鎂，lg氯化鈉，1 g檸檬酸鈉，0.5 g檸檬酸氫二鈉和5mL甲苯，立即振蕩均勻，然后以3000_5000rpm 離心 5_15min ；
(3)溴氰菊酯粗提取物純化:取步驟(2)中上清液5mL于離心管中，加入300-800mg無水硫酸鎂和100-200mg N-丙基乙二胺鍵合固相吸附劑，充分震蕩均勻，以5000-8000rpm離心 l_5min ；
(4)溴氰菊酯萃取:使用丙酮和甲苯依次預淋洗Florisil弗洛里硅土固相萃取小柱，然后加入lmL步驟(3)中上清液，即刻開始收集流出組分，取3-5mL的甲苯一異辛烷混合溶液淋洗小柱，洗脫液合并收集，所有收集液濃縮至lmL，經有機相濾膜過濾，得到提取檢測液；
(5)色譜檢測:將上述提取檢測液置于氣相色譜儀中進行檢測。
[0008]步驟(1)中，茶葉烘干條件為45-55°C，l_3h。
[0009]步驟(1)中，研磨溫度為20-50 °C。
[0010]步驟(1)中，研磨后的樣品密閉遮光保存，溫度< -8°C。
[0011]步驟(2)中，茶葉粉末的質量需精確至0.01 go
[0012]步驟(2)中，內標為滅蟻靈。
[0013]步驟(2)、(3)中，震蕩時間為l_3min。
[0014]步驟(4)中，丙酮和甲苯的用量為5-10mL。
[0015]步驟(4)中，甲苯一異辛烷的體積比為1-2:1。
[0016]步驟(4)中，濃縮在旋轉蒸發儀中進行，控制溫度< 40°C。
[0017]步驟(5)中，色譜儀的溫度設置為:進樣口溫度250°C，初始溫度70°C，保留時間為2 min ;在升溫程序中，以25°C/min速率由70°C升至150°C，然后以3°C /min速率由150°C升至200°C，再以8°C/min速率由200°C升至280°C，最后在280°C保持lOmin。
[0018]步驟(5)中，色譜儀的載氣速率設為1.2mL/min，尾吹氣速率設為30 mL/min。
[0019]步驟(5)中，進樣量為2mL，采用不分流進樣模式，進樣后分流閥關閉lmin。
[0020]本發明方法首先提取茶葉中的溴氰菊酯，提取方法簡單，效果好，更加使結果積分處理簡便，準確。本方法的平均回收率為93.21%-103.75%，相對標準偏差為3.28%_6.20%，符合要求，準確可靠。
【具體實施方式】
[0021]下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細說明。
[0022]實施例1
測定茶葉中溴氰菊酯農藥殘留量的方法，包括如下步驟:
(1)樣品準備:將茶葉放入烘箱，50°C下保持2h，烘干后水分5% ;研磨樣品，過2mm篩網，注意研磨溫度不應超過50 °C。
[0023](2)溴氰菊酯粗提取:將茶葉粉末2g置于50mL離心管中，精確至0.01 g，加入10mL去離子水，振蕩直至樣品被水充分浸潤，靜置lOmin，加入10mL石油醚和1 mL混合內標工作液(滅蟻靈)，劇烈振蕩1 min，加入4 g無水硫酸鎂，lg氯化鈉，1 g梓檬酸鈉，0.5 g朽1檬酸氫二鈉和5mL甲苯，立即手持振蕩2min，然后以4000rpm離心lOmin ；
(3)溴氰菊酯粗提取物純化:取步驟(2)中上清液5 mL于離心管中，加入500mg無水硫酸鎂和150mg N-丙基乙二胺鍵合固相吸附劑，手持振蕩2 min,以6000rpm離心2min ; (4)溴氰菊酯萃取:使用6mL丙酮和6mL甲苯依次預淋洗Florisil弗洛里娃土固相萃取小柱，然后加入lmL步驟(3)中上清液，即刻開始收集流出組分，取3.5mL的甲苯一異辛烷(體積比1:1)混合溶液淋洗小柱，洗脫液合并收集，所有收集液在旋轉蒸發儀上小心濃縮至lmL，經有機相濾膜過濾，得到提取檢測液；
(5)色譜檢測:將上述提取檢測液置于氣相色譜儀中進行檢測，色譜儀進樣口溫度設置為25°C，初始溫度設為70V，保留時間為2 min ;在升溫程序中，以25°C /min速率由70°C升至150°C，然后以3°C /min速率由150升至200°C，再以8°C/min速率由200°C升至280°C，最后在280°C保持lOmin。載氣(氮氣)速率設為1.2mL/min，尾吹氣(氮氣)速率設為30 mL/min。進樣量為2mL，采用不分流進樣模式，進樣后分流閥關閉lmin。
[0024]經標準曲線繪制統計，該方法的回收率為93.21%，相對標準偏差為3.28%，符合檢測要求，結果準確可靠。
[0025]實施例2
測定茶葉中溴氰菊酯農藥殘留量的方法，包括如下步驟:
(1)樣品準備:將茶葉放入烘箱，45 °C下保持3h，烘干后水分6% ;研磨樣品，過1mm篩網，注意研磨溫度不應超過50 °C。
[0026](2)溴氰菊酯粗提取:將茶葉粉末3g置于50mL離心管中，精確至0.01 g，加入10mL去離子水，振蕩直至樣品被水充分浸潤，靜置5min，加入12mL石油醚和1