一種分離分析伏立康唑磷酸酯或其藥用鹽異構體的hplc方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種高效液相分析方法，具體的說是一種伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽 異構體分離分析測定。
【背景技術】
[0002] 伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽是伏立康哇的前體藥物，伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽 進入體內可W通過堿性磯酸酶的作用，代謝為伏立康哇，從而發揮藥效作用。伏立康哇是一 種廣譜的Η哇類抗真菌藥其適應癥如下；治療侵襲性曲霉病，治療對氣康哇耐藥的念珠菌 引起的嚴重侵襲性感染(包括克柔念珠菌)，治療由足放線病菌屬和鑲刀菌屬引起的嚴重感 染本品應主要用于治療免疫缺陷患者中進行性的可能威脅生命的感染。
[0003] 因伏立康哇結構中存在手性中必，所W伏立康哇就存在對應異構體，W伏立康哇 為原料進一步合成為伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽，也必然存在對應異構體。我們在開發伏 立康哇磯酸醋或其藥用鹽的過程中發現該化合物沒有現成分離異構體的方法，而且在公開 發表的文獻中也沒有發現該化合物異構體的分離方法。送種現狀使得該化合物沒有統一的 標準，極大的阻礙了該化合物的引用和推廣。因此，建立一套有效、穩定的分離方法是十分 必要的。
[0004] 其中伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽的結構式如下：
X代表化、Κ、氨基酸
【發明內容】
[0005] 本發明的目的就是針對現有技術的缺陷，提供一種伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽異 構體的分離分析方法，它能夠準確分離測定伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽的異構體。
[0006] 根據需要，我們在開發伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽的過程中，重點研究了伏立康 哇磯酸醋或其藥用鹽的高效液相色譜分離方法。
[0007] 本方法所說的用高效液相色譜法分析分離伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽異構體的 方法，是W蛋白質鍵合硅膠為填充劑，緩沖液（抑值1~9. 5)與有機溶劑W-定配比組合 為流動相，流速為0. 1~1. 5ml/min，柱溫為0~5(TC，進樣體積為0. 1~100μ1，使用梯度 或等度進行洗脫分離。該方法可W快速有效的分離分析伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽的異構 體。
[0008] 本發明的填充劑選自下列蛋白質鍵合硅膠；α-酸性糖蛋白鍵合硅膠、人血清白 蛋白鍵合硅膠、牛血清白蛋白鍵合硅膠、卵類粘蛋白鍵合硅膠。
[0009] 本發明的有機溶劑選自下列溶劑；己臘、甲醇、己醇、四氨巧喃、正丙醇、異丙醇； 所述的有機溶劑一種或幾種與緩沖液W-定比例配比；其中最優選甲醇與緩沖液W-定比 例配比。其中有機溶劑：緩沖液的比例為10%~50% (V/V) ;90%~50% (V/V)。緩沖液的 抑值為1~9. 5,所述的緩沖液的抑值優選為2. 5~5;最優選為3. 0~3. 5。緩沖液采用 的緩沖鹽為醋酸鋼-醋酸、磯酸二氨鋼-磯酸、磯酸二氨鐘-磯酸、磯酸氨二鋼-磯酸、磯酸 氨二鐘-磯酸、磯酸氨二倭-磯酸、磯酸二氨倭-磯酸；優選為磯酸二氨鐘-磯酸、磯酸二氨 鋼-磯酸；最優選磯酸二氨鐘-磯酸。
[0010] 本發明所述的分離分析方法，可按照W下方法實現： (1)取伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽和消旋伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽適量，用40%甲 醇水溶解稀釋，配制成每1ml含伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽0. 01~2.Omg和每1ml含消旋 伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽0.001~0.Img的混合樣品溶液。
[0011] (2)設置流動相流速為0. 1~1. 5ml/min，檢測波長256皿，柱溫0~5(TC。
[0012] (3)取（1)的樣品溶液0. 1~100μ1注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，完成伏立 康哇磯酸醋或其藥用鹽異構體的分離分析。
[001引【附圖說明】： 圖1流動相為甲醇；磯酸鹽緩沖液（0.02Μ磯酸二氨鐘，磯酸調抑3. 0)=40:60,流速 0.9ml/min，其中圖譜中伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽與對應異構體能完全分離。
[0014] 圖2流動相為甲醇；磯酸鹽緩沖液（0. 02M磯酸二氨鐘，磯酸調抑3. 0) =40:60,流 速0.8ml/min，其中圖譜中伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽與對應異構體能完全分離。
[0015] 圖3流動相為甲醇；磯酸鹽緩沖液（0.02M磯酸二氨鐘，磯酸調抑3. 0)=41:59,流 速0. 9ml/min，其中圖譜中伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽與對應異構體能完全分離。
[0016]
【具體實施方式】： W下結合實施例對本發明作進一步說明，但送些實施例不得用于解釋本發明保護范圍 的限制。
[0017] 實施例1 實驗儀器及條件 高效液相色譜儀(戴安U3000);色譜柱；ULTR0NES-0VM150X4.6mm5μm;流動相： 甲醇；磯酸鹽緩沖液（0. 02M磯酸二氨鐘，磯酸調抑3. 0) =40:60 ;流速0. 9ml/min;檢測波 長；256nm;柱溫2(TC進樣體積3μ1。
[0018] 取上述混合樣品溶液進樣，結果如圖1，異構體能與伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽完 全分離。
[001引 實施例2 實驗儀器及條件 高效液相色譜儀(戴安U3000);色譜柱；ULTRONES-OVM150X4.6mm5μm;流動相： 甲醇；磯酸鹽緩沖液（0. 02M磯酸二氨鐘，磯酸調抑3. 3) =40:60 ;流速1.Oml/min;檢測波 長；256nm;柱溫3(TC進樣體積5μ1。
[0020] 取上述混合樣品溶液進樣，結果異構體能與伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽完全分 離。
[00川 實施例3 實驗儀器及條件 高效液相色譜儀(戴安U3000);色譜柱；ULTRONES-OVM150X4.6mm5μm;流動相： 甲醇；磯酸鹽緩沖液（0. 02M磯酸二氨鐘，磯酸調抑3. 0) =40:60 ;流速0.8ml/min;檢測波 長；256nm;柱溫2(TC進樣體積3μ1。
[0022] 取上述混合樣品溶液進樣，結果如圖2,異構體能與伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽完 全分離。
[002引 實施例4 實驗儀器及條件 高效液相色譜儀(戴安U3000);色譜柱；ULTRONES-OVM150X4.6mm5μm;流動相： 甲醇：磯酸鹽緩沖液（0.021磯酸二氨鐘，磯酸調抑3.0)=41:59;流速0.91111/111^;檢測波 長；256nm;柱溫2(TC進樣體積3μ1。
[0024]取上述混合樣品溶液進樣，結果如圖3,異構體能與伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽完 全分離。
[00巧]實施例5 實驗儀器及條件 高效液相色譜儀(戴安U3000);色譜柱；ULTRONES-OVM150X4.6mm5μm;流動相： 己臘；磯酸鹽緩沖液（0. 02M磯酸二氨鐘，磯酸調抑3. 2) =15:85 ;流速1.Oml/min;檢測波 長；256nm;柱溫25°C進樣體積10μ1。
[0026] 取上述混合樣品溶液進樣，結果異構體能與伏立康哇磯酸醋或其藥用鹽完全分 離。
[0027] 實施例6 實驗儀器及條件 高效液相色譜儀(戴安U3000);色譜柱；CHIRAL-AGP150X4.6mm5μm;流動相：己 臘；磯酸鹽緩沖液（0. 02M磯酸二氨鋼，磯酸調抑4. 0) =20:80;流速1.Oml/min;檢測