一種測定蔬菜水果中噁霉靈殘留物的方法
【專利說明】-種測定蔬菜水果中腰霉靈殘留物的方法
[技術領域]
[0001] 本發明屬于分析化學技術領域，具體地說是一種測定蔬菜水果中嗯霉靈殘留物的 方法。
[【背景技術】]
[0002] 食品安全與人類的生存及生活息息相關，而自從人類大量使用化學農藥W來，各 種農副產品的農藥殘留問題也越來越突出，對人體健康帶來了直接或間接的影響。近幾年 來，食品安全事件層出不窮，食品中農藥超標情況屢見不鮮。因此，世界各國對農藥殘留問 題高度重視，對各種農副產品中農藥殘留的限量要求也越來越嚴格。許多國家W農藥殘留 限量作為技術壁壘，限制農產品的進口，運直接影響了我國農副產品的國際貿易。自1981 年起我國就開始參考國外發達國家的農藥殘留限量，逐步推出我國農藥殘留限量標準。 2014年8月1日開始實施的新版《食品中農藥最大殘留限量》（即GB2763-2014)，較之前 的GB2763-2012,明確限量要求的農藥新增了 65個，其中也包括了一些新型農藥。
[0003] 嗯霉靈（3-徑基-5-甲基異惡挫）是一種新型廣譜內吸性殺菌劑，對各種植物真 菌病害，如鑲刀菌、苗腐菌、腐霉菌等所引起的立枯、根腐、枯萎等±傳病害均有顯著的防治 效果，并能促進作物生長與根系發達，防止根系老化。而我國現在普遍使用的中、高毒性殺 菌劑，導致了農產品農藥殘毒增高。根據哈爾濱醫科大學公共衛生學院毒理檢測結果和中 華人民共和國國家標準（GB15670-1995)《農藥登記毒理試驗方法》中的急性毒理分極標 準，嗯霉靈急性毒性為低毒。因此，在世界呼吁綠色農藥的今天，嗯霉靈作為一種新型的殺 菌劑脫穎而出，廣泛應用于蔬菜、水稻、苗木、果樹、谷類、瓜類、草坪、花弁等作物，展現出 優異的應用效果。嗯霉靈由于是一種新開發的產品，物料安全數據還不完全，也被列入GB 2763-2014《食品中農藥最大殘留限量標準》中。
[0004] 目前，國內外只有報道測定谷物中嗯霉靈殘留量的氣相色譜方法，尚沒有用于蔬 菜和水果中嗯霉靈殘留物的檢測方法。而嗯霉靈在常見有機溶劑和水中都有良好的溶解 性，因此蔬菜和水果樣品中的水分將影響嗯霉靈的提取效率，谷物樣品檢測方法中所用的 提取方法顯然不適用。然而，GB2763-2014已明確了嗯霉靈在蔬菜和水果中的限量要求， 因此建立一個蔬菜和水果中嗯霉靈殘留物的檢測方法迫在眉睫。
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【發明內容】
] 陽0化]本發明的目的就是要解決上述的不足而提供一種測定蔬菜水果中嗯霉靈殘留物 的方法，該測定方法不僅快速、簡單，而且能夠實現蔬菜和水果中嗯霉靈殘留量的準確測 定，其檢出限為0.Img/kg，低于GB2763-2014標準中對于蔬菜水果中嗯霉靈的最大殘留限 量要求。
[0006] 為實現上述目的，本發明設計了一種測定蔬菜水果中嗯霉靈殘留物的方法，包括 W下步驟：
[0007] 1)樣品預處理：取可食性樣品，用食品粉碎機將樣品打碎，混合均勻裝入玻璃容 器中備用；
[0008] 2)樣品的提取：稱取樣品，用甲醇溶液滿旋提取；
[0009] 3)采用液相色譜-串聯質譜法測定樣品提取溶液中嗯霉靈的濃度；
[0010] 4)根據步驟3)所得的嗯霉靈的濃度，計算樣品中嗯霉靈的含量。
[0011] 步驟1)中，樣品為蔬菜水果的可食性部分，樣品打碎混合均勻后裝入潔凈干燥的 玻璃容器中，并于4°C下密封保存。
[0012] 步驟2)中，稱取樣品前再次用攬拌棒混勻樣品，然后稱取樣品于離屯、管中，加入 甲醇溶液，滿旋提取樣品2分鐘，W8000r/min轉速離屯、5分鐘，上層清液通過定性濾紙或 布氏漏斗抽濾入容量瓶中，殘渣再用甲醇溶液滿旋提取2分鐘，提取溶液經過濾并入前述 容量瓶中，最后用甲醇定容到刻度，混勻備用。
[0013] 步驟2)中，用甲醇定容到刻度并混勻后，再經0. 22ymPT陽有機相濾膜濾于進樣 小瓶中，供液相色譜-串聯質譜儀分析。
[0014] 步驟3)中，此液相色譜-串聯質譜儀的測定條件為：
[0015] 1)液相色譜柱采用HALOC18柱，柱長為10畑1，柱內徑為4. 6mm，粒徑為2. 7ym;
[0016] 2)液相色譜柱溫度設定為25°C ;
[0017] 扣進樣量為5化；
[00化]4)流速為0. 3血/min ;
[0019] 5)流動相梯度見下表，依此條件，嗯霉靈的保留時間為7. 3分鐘：
[0020]
[0023]
[0024]步驟4)中，由提取溶液中嗯霉靈的濃度換算到樣品中嗯霉靈的殘留量，根據基質 校準曲線，采用外標法定量，最低定量濃度為0.Img/kg。 陽0巧]本發明具有如下有益效果：本發明針對GB2763-2014中新增了嗯霉靈在蔬菜和 水果中的最高殘留限量要求，卻沒有推薦相應的檢測方法運一問題，提供了一種經有機溶 劑提取后直接用液相色譜-串聯質譜測定蔬菜水果中嗯霉靈殘留物的方法，該測定方法 不僅快速、簡單，而且能夠實現蔬菜和水果中嗯霉靈殘留量的準確測定；該測定方法的檢 出限為0.Img/kg，低于GB2763-2014標準中對于蔬菜水果中嗯霉靈的最大殘留限量要求 (0. 5mg/kg)，解決了GB2763-2014中只有限量標準沒有相應檢測方法的問題，完全滿足對 蔬菜和水果中嗯霉靈殘留監測的要求。
[【附圖說明】]
[0026]圖1是本發明的實施例2中采用液相色譜-串聯質譜所得白菜樣品中嗯霉靈的 TIC總離子流圖；
[0027]圖2是本發明的實施例2中采用液相色譜-串聯質譜所得白菜樣品中嗯霉靈的 MRM多反應監測圖。
[【具體實施方式】]
[0028] 本發明屬于分析化學領域，具體地說是對蔬菜和水果中嗯霉靈殘留物的測定，其 原理為：將樣品中的嗯霉靈用甲醇溶液提取，再由液相色譜-串聯質譜儀測定樣品中嗯霉 靈的量。
[0029] 液相色譜-串聯質譜儀的測定條件為：
[0030] 1)液相色譜柱采用HALOC18柱，規格為柱長10畑1，柱內徑4. 6mm，粒徑2. 7ym;
[0031] 2)液相色譜柱溫度設定為25°C; 陽03引如進樣量：5化；
[0033] 4)流速：0.3血/min；
[0034] 5)流動相梯度見下表：
[0035]
[0036] 依此條件，嗯霉靈的保留時間在7. 3分鐘；
[0037] 6)質譜參數見下表：
[0038]
[0039] 實施例1 :相橘中嗯霉靈殘留量的測定
[0040] 1.樣品溶液的制備：
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