一種白芍馬齒莧檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于藥物含量檢測技術領域，涉及一種功能飲料中芍藥苷的檢測方法。
【背景技術】
[0002]白芍為常用中藥，具有平肝止痛、養血調經、斂陰止汗之功能。芍藥苷是白芍的主要有效成分。據文獻報道，芍藥苷含量的常規測定方法有比色法、薄層掃描法、氣相色譜法、液相色譜法和毛細管區帶電泳法等。以上方法均只針對藥品中的芍藥苷進行測定。
[0003]然而，近年來在歐美和日本等發達國家風靡著一種健康飲品一一功能飲料，該功能飲料主要含有鉀、鈉、鈣、鎂等電解質，成分與人體體液相似，飲用后更能迅速被身體吸收，及時補充人體因大量運動出汗所損失的水分和電解質(鹽分)，使體液達到平衡狀態。常見的功能飲料主要有以下幾種:多糖類飲料、維生素飲料、礦物質飲料、運動類飲料、益生菌飲料、免疫類飲料和低能量飲料。
[0004]當飲用功能性飲料成為一種時尚時，這一產業及鄰近產業也隨之欣欣向榮。由于功能飲料中常加入有中藥成分，比如添加有白芍，因而檢測添加有白芍的功能飲料中芍藥苷的含量就顯得尤為重要，而現有的文獻中還沒有任何一篇文獻公開有從功能飲料中測定芍藥苷的方法。
【發明內容】
[0005]本發明的發明目的在于:針對現有技術存在的問題，提供一種用于測量白芍馬齒莧檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法，從而嚴格控制功能飲料中芍藥苷的含量，確保功能飲料的功效。
[0006]為了實現上述目的，本發明采用的技術方案為:
一種白芍馬齒莧檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法，其中所述白芍馬齒莧檸檬功能飲料的配方為:
白芍漿170-210份，膳食纖維檸檬汁450-520份，馬齒莧汁550-620份，白砂糖200-250份，茯苓60-140份，大麥300-500份，白蘿卜籽100-200份，冬瓜40-80份，檸檬酸1-2份，阿斯巴甜20-40份，維生素C10-20份，檸檬酸鈉30-50份，水10000-20000份；將白芍漿、膳食纖維檸檬汁、馬齒莧汁、茯苓、大麥、白蘿卜籽、冬瓜混合，粉碎，加入水煎煮，過濾，除去渣滓，在濾液中加入阿斯巴甜、維生素C、檸檬酸鈉、梓檬酸，得到飲料；其檢測方法為:
檢測儀器與試劑:高效液相色譜儀、島津LC-10AT型栗、島津SPD-10AT型檢測器、N2000色譜工作站、芍藥苷峰由中國藥品生物制品檢定所提供；
色譜條件:色譜柱VP-ODS C18 (150mm X 4.6mm，5um);流動相:乙腈:水:冰醋酸=75:425:0.4 ;流速:1.0mL/min ;檢測波長:230nm ;柱溫:35° C ;進樣量為5uL，色譜柱的理論塔板數按芍藥苷峰計算不低于2000 ;
對照品溶液的制備:精密稱取經五氧化二磷減壓干燥36h的芍藥苷對照品10mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度線，搖勻，精密量取ImL置1mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度線，搖勻，即得；
供試品溶液的制備:精密吸取10.0mL白芍馬齒莧檸檬功能飲料置塞錐形瓶中，加入70%乙醇50mL，密塞，放置過夜，超聲處理30min，搖勻，過濾，濾渣及濾器用70%乙醇20mL分3次-5次洗滌，洗液并入濾液中，蒸發至干，殘渣加70%乙醇微熱溶解，轉移至25mL量瓶中，加70%乙醇至刻度線，搖勻，過濾，取續濾液，即得；
測定法:分別精密吸取上述兩種對照品溶液和供試品溶液各5uL，注入高效液相色譜儀，測定，既得。
[0007]綜上所述，由于采用了上述技術方案，本發明的有益效果是:
本發明經過大量實驗對流動相的組成、流速、色譜柱進行篩選；根據芍藥苷的化學性質，對流動相的組成進行了大量篩選，最終確定米用體積比為75:425:0.4的乙臆-水-冰醋酸作為緩沖液，保證芍藥苷和其他組分能很好的分離效果；流動相流速設置為l.0mL/min，芍藥苷的峰形最好、分離度最好，色譜柱在35° C條件下分離效果最好；本發明所采用的檢測方法可以靈敏、準確的檢測芍藥苷的含量，且采用該檢測方法的分離效果好，檢測靈敏度高，穩定性好，可以客觀、全面、準確的評價功能飲料中芍藥苷的含量及質量，對控制功能飲料生產過程中的質量、保證功能飲料的功效有重要作用。
【具體實施方式】
[0008]下面對本發明作詳細的說明。
[0009]為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，對本發明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明。
[0010]實施例1
一種白芍馬齒莧檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法，其中所述白芍馬齒莧檸檬功能飲料的配方為，按重量份計:
白芍漿180份，膳食纖維檸檬汁460份，馬齒莧汁580份，白砂糖220份，茯苓80份，大麥340份，白蘿卜籽120份，冬瓜45份，檸檬酸I份，阿斯巴甜22份，維生素C12份，檸檬酸鈉32份，水120000份；
其中，制備白芍漿時，將去皮稱重后的白芍切片迅速放入亞硫酸氫鈉0.05%、檸檬酸0.15%、抗壞血酸0.15%的混合液中護色20min，將白芍切片取出，并按照白芍切片:水=1:4的比例放入打漿機中制得白芍漿備用。
[0011]制備膳食纖維檸檬汁時，共可分五步走:步驟一，將新鮮無腐爛的檸檬洗凈、去皮、去核、切薄片，將薄片檸檬放入榨汁機榨汁，將榨取的檸檬汁在82° C的溫度下水浴6min，檸檬汁放入4° C的冰箱中密封保存備用；步驟二，檸檬皮切成小條并與步驟一中榨汁后的檸檬廢渣依次經42° C的干燥箱中干燥4h、粉碎機粉碎、100目篩分、4° C的冰箱中密封保存備用；步驟三，將步驟二中的粉碎粉末按料液比1:25加入蒸餾水得混合溶液，調節混合溶液PH值為2.0，混合溶液在81° C的環境中酸解lOOmin，冷卻過濾，濾渣烘干備用，濾液以3100 r/min離心處理16min，取上清液，并用4倍上清液體積的無水乙醇沉淀，靜置24h后過濾，濾渣于52° C的環境中干燥3h，粉碎并過100目篩得到檸檬水溶性膳食纖維；步驟四，將酸解烘干后的濾渣粉碎過100目篩，篩下粉末按料水比1:15加入蛋白酶5g/kg得蛋白混合液，蛋白混合液依次經用磷酸緩沖液調節PH值至6.0、46° C恒溫水浴水解lh、升溫至65° C、按料水比1:10加入淀粉酶20g/kg酶解3h，酶解后的溶液依次經以5000r/min的轉速離心lOmin、蒸餾水清洗沉淀3次、過濾沉淀、濾渣于42° C的干燥箱中干燥4h、粉碎、過100目篩即得檸檬非水溶性膳食纖維；步驟五，將步驟一中的檸檬汁、步驟三中的檸檬水溶性膳食纖維、步驟四中的檸檬非水溶性膳食纖維、穩定劑和白砂糖以一定比例混合調配成膳食纖維檸檬汁，膳食纖維檸檬汁再依次經41MPa的壓力條件下均質兩次、裝罐、于87° C殺菌處理16min。所述穩定劑為CMC-Na和黃原膠，膳食纖維檸檬汁的各組分的混合比例按質量百分比設置為:檸檬汁:白砂糖:檸檬水溶性膳食纖維:檸檬非水溶性膳食纖維:CMC-Na:黃原膠=28:11:0.35:0.17:0.13:0.07。
[0012]制備馬齒莧汁時:首先采用冷榨法榨取馬齒莧汁，在馬齒莧汁中加入0.05%的果膠酶并用塑料薄膜扎緊，在46° C的溫度下水浴酶解4h，酶解后將馬齒莧汁置于92° C中水浴滅酶16s，冷卻，澄清備用。且馬齒莧汁在澄清時，在馬齒莧汁中加入0.07%的殼聚糖，并在46° C的溫度下水浴1.5h，過濾，取澄清的馬齒莧汁備用。
[0013]待白芍漿、膳食纖維檸檬汁和馬齒莧汁制備完畢后，將茯苓、大麥、白蘿卜籽、冬瓜依次進行混合、粉碎處理，并將粉碎后的混合粉料與白芍漿、膳食纖維檸檬汁、馬齒莧汁混合，并向混合液中加入適量水，依次進行煎煮、過濾、除去渣滓得到濾液，然后再濾液中加入阿斯巴甜、維生素C、檸檬酸鈉、檸檬酸，混合均勻即得到飲料。其檢測方法為:
檢測儀器與試劑:高效液相色譜儀、島津LC-1OAT型栗、島津SPD-1OAT型檢測器、N2000色譜工作站、芍藥苷峰由中國藥品生物制品檢定所提供；
色譜條件:色譜柱VP-ODS C18 (150mm X 4.6mm，5um);流動相:乙腈:水:冰醋酸=75:425:0.4 ;流速:1.0mL/min ;檢測波長:230nm ;柱溫:35° C ;進樣量為5uL，色譜柱的理論塔板數按芍藥苷峰計算不低于2000 ;
對照品溶液的制備:精密稱取經五氧化二磷減壓干燥36h的芍藥苷對照品10mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度線，搖勻，精密量取ImL置1mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度線，搖勻，即得；
供試品溶液的制備:精密吸取10.0mL白芍馬齒莧檸檬功能飲料置塞錐形瓶中，加入70%乙醇50mL，密塞，放置過夜，超聲處理30min，搖勻，過濾，濾渣及濾器用70%乙醇20mL分3次-5次洗滌，洗液并入濾液中，蒸發至干，殘渣加70%乙醇微熱溶解，轉移至25mL量瓶中，加70%乙醇至刻度線，搖勻，過濾，取續濾液，即得；
測定法:分別精密吸取上述兩種對照品溶液和供試品溶液各5uL，注入高效液相色譜儀，測定，既得。
[0014]實施例2
一種白芍馬齒莧檸檬功能飲料中芍藥苷含量的檢測方法，其中所述白芍馬齒莧檸檬功能飲料的配方為，按重量份計:
白芍漿190份，膳食纖維檸檬汁490份，馬齒莧汁600份，白砂糖230份，茯苓100份，大麥420份，白蘿卜籽150份，冬瓜60份，梓檬酸I份，阿斯巴甜31份，維生素C15份，梓檬酸鈉41份，水15000份。
[0015]其中，制備白芍漿時，將去皮稱重后的白芍切片迅速放入亞硫酸氫鈉0.05%、檸檬酸0.15%、抗壞血酸0.15%的混合液中護色20min，將白芍切片取出，并按照白芍切片:水=1:4的比例放入打漿機中制得白芍漿備用。
[0016]制備膳食纖維檸檬汁時，共可分五步走:步驟一，將新鮮無腐爛的檸檬洗凈、去皮、去核、切薄片，將薄片檸檬放入榨汁機榨汁，將榨取的檸檬汁在85° C的溫度下水浴8min，檸檬汁放入4° C的冰箱中密封保存備用；步驟二，檸檬皮切成小條并與步驟一中榨汁后的檸檬廢渣依次經45° C的干燥箱中干燥4h、粉碎機粉碎、100目篩分、4° C的冰箱中密封保存備用；步驟三，將步驟二中的粉碎粉末按料液比1:25加入蒸餾水得混合溶液，調節混合溶液PH值為2.3，混合溶液在83° C的環境中酸解lOOmin，冷卻過濾，濾渣烘干備用，濾液以3300 r/min離心處理18min，取上清液，并用4倍上清液體積的無水乙醇沉淀，靜置24h后過濾，濾渣于55° C的環境中干燥3h，粉碎并過100目篩得到檸檬水溶性膳食纖維；步驟四，將酸解烘干后的濾渣粉碎過100目篩，篩下粉