一種簡單快速測定濾池出水中aoc含量的方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及一種測定水中A0C含量的方法。
【背景技術】
[0002] 可生物同化有機碳（assimil油leorganiccarbon,A0C)是指溶解性有機碳中能 被微生物同化成自身菌體的部分，代表了最容易被生物降解的有機碳，作為表征飲用水處 理單元出水的可生化性指標。濾池是最常用的飲用水常規處理單元，可生化性是評價其運 行狀況及處理效果的重要指標。因此，測定濾池出水的A0C濃度可W用于評價濾池的處理 效果及運行狀況。
[0003]A0C的測定方法最早由VanderKooij提出，即在水樣中接種測試菌巧光假單胞菌 P17和螺旋菌N0X，在特定條件下培養3~14天，通過平板計數獲得培養的細菌數，利用標 準曲線將測試菌在水樣中生長的最大值換算為A0C值。但是Kooij的測定方法操作復雜、 實驗周期長（20天）。2005年，Hammes提出全新的A0C測定方法，利用流式細胞儀來測定 微生物生長量，并采用Evian水（一種商業飲用水）作為接種液。該方法相較于傳統方法 具有明顯的優勢，不僅檢測時間縮短至3天，而且操作簡單。
[0004] 雖然Hammes的方法大大簡化了A0C的測定過程，但是濾池出水由于濾池內部生物 作用導致其細菌結構與常規飲用水水體具有明顯的不同，采用常規的測定方法難W準確測 定其A0C值，同時長達S天的測定時間難W高效地指導工程實際，因此需要開發一種簡單 快速的適于濾池水質條件的A0C測定方法。
【發明內容】
陽0化]本發明的目的是要解決現有測定濾池出水中A0C含量的方法實驗周期長和難W準確測定濾后水體中A0C含量的問題，而提供一種簡單快速測定濾池出水中A0C含量的方 法。
[0006] 一種簡單快速測定濾池出水中A0C含量的方法，是按W下步驟完成的：
[0007] 一、預處理待測水樣：使用微孔濾膜過濾待測水樣，得到微孔濾膜過濾后的待測水 樣；將微孔濾膜過濾后的待測水樣置于無菌無碳的樣品瓶中，得到裝有微孔濾膜過濾后的 待測水樣的無菌無碳的樣品瓶；
[0008] 二、預處理接種水樣：使用玻璃纖維濾膜過濾待測水樣，得到玻璃纖維濾膜過濾后 的待測水樣；將玻璃纖維濾膜過濾后的待測水樣作為同源接種水；
[0009] S、接種：在無菌環境下將步驟二得到的同源接種水接種至步驟一得到的裝有微 孔濾膜過濾后的待測水樣的無菌無碳的樣品瓶中，再使用滿旋振蕩器滿旋振蕩15s~30s， 得到待培養水樣；
[0010] 步驟=中所述的待培養水樣中同源接種水的體積分數為1%~20% ;
[0011] 四、測定起始細菌數：將步驟S得到的待培養水樣與SYBRGreenI染料共解化 lOmin~20min，得到解化后的待培養水樣；再利用流式細胞儀測定解化后的待培養水樣中 的起始細菌數Ti;
[0012] 步驟四中所述的待培養水樣與SYBRGreenI染料的體積比為100:1 ;
[0013] 五、培養：將解化后的待培養水樣置于溫度為25°C~35°C的生化培養箱中避光培 養24h~72h，得到培養后的待測水樣；
[0014] 六、測定最終細菌數：將步驟五得到的培養后的待測水樣與SYBRGreenI染料共 解化lOmin~20min，得到經過解化的培養后的待測水樣；再利用流式細胞儀測定經過解化 的培養后的待測水樣中的最終細菌數T2;
[0015] 步驟六中所述的培養后的待測水樣與SYBRGreenI染料的體積比為100:1 ;
[0016] 屯、計算AOC含量：
[0017] 利用如下公式計算待測水樣中的AOC含量： 陽0化]AOC(yg乙酸碳/L)=化-Ti) A ;
[0019] 上述式中：
[0020] Ti為解化后的待培養水樣中的起始細菌數，單位為cells/yL;
[0021] T2為培養后的待測水樣中的最終細菌數，單位為cells/iiL; 陽02引 k為細菌與乙酸碳的轉換系數，k=lO^cells/ygAOC; 陽023] 根據上述公式計算出濾池出水中AOC含量，完成一種簡單快速測定濾池出水中 A0C含量的方法。
[0024] 本發明的原理及優點：
[00巧]一、本發明提供了一種簡單快速測定濾池出水中A0C含量的方法，待測水樣的除 菌通過采用0. 22ym的微孔濾膜過濾而實現，微孔濾膜過濾后的待測水樣做稀釋水用，與 傳統的己氏滅菌法相比，不僅縮短了操作時間，而且保證了待測水體的水質不受影響，同時 除菌效果更好；
[00%] 二、本發明的一種簡單快速測定濾池出水A0C含量的方法，W同源菌作為接種菌， 并通過比例稀釋的方法來確定接種量；同源菌代表了該水體中最具優勢的菌群，W同源菌 作為接種菌更符合工程實際，避免了某特定測試菌種難W在該水體水中生長或生長滯緩 的問題，能夠更準確地反映待測水體的A0C含量；稀釋接種法較傳統的特定菌定量接種更 為簡單，可省去特定菌菌濃度測定步驟，也避免了加入的異源接種水對待測水樣水質的影 響；
[0027]S、本發明的一種簡單快速測定濾池出水A0C含量的方法，接種水樣是使用 1. 76ym的玻璃纖維濾膜過濾待測水樣而得到，不僅可W保留接種水中的±著菌，而且去除 了水樣中的不可溶解的物質，保證測定能準確進行；
[0028] 四、本發明的一種簡單快速測定濾池出水A0C含量的方法，通過優化實驗條件， 將培養時間縮短至24h，大大節省了測定時間；由于濾池出水中的微生物大部分為濾池中 脫落生物膜上的微生物，處于穩定期和衰亡期為多；因此W該水體作為接種菌培養測定其 A0C含量時，達到穩定期所需的時間較水源水或管網水短；若W常規的3d作為培養周期，將 會大大低估濾后水體的A0C含量；通過實驗確定24h為最佳的培養周期，不僅比常規的A0C 測定方法節省2/3的時間，而且大大提高了測定準確性；
[0029] 五、本發明的有益效果是建立了一種更適用于濾后水的生物可同化有機碳測定方 法，解決了現有測定方法難W準確測定濾后水體A0C含量的難題，同時建立了比例稀釋的 同源菌接種方法，大大地簡化了操作步驟，并較現有的AOC測定方法縮短了 2/3的時間，更 適用于工程實際應用。
[0030] 本發明可獲得一種簡單快速測定濾池出水中A0C含量的方法。
【附圖說明】 陽03U 圖1為濾池出水中AOC含量的測定曲線，圖1中1為實施例一中AOC含量隨培養 時間的變化曲線，2為實施例二中A0C含量隨培養時間的變化曲線，3為實施例S中A0C含 量隨培養時間的變化曲線，4為實施例四中A0C含量隨培養時間的變化曲線。
【具體實施方式】
【具體實施方式】 [0032] 一：本實施方式是一種簡單快速測定濾池出水中A0C含量的方法是 按W下步驟完成的：
[0033] 一、預處理待測水樣：使用微孔濾膜過濾待測水樣，得到微孔濾膜過濾后的待測水 樣；將微孔濾膜過濾后的待測水樣置于無菌無碳的樣品瓶中，得到裝有微孔濾膜過濾后的 待測水樣的無菌無碳的樣品瓶；
[0034] 二、預處理接種水樣：使用玻璃纖維濾膜過濾待測水樣，得到玻璃纖維濾膜過濾后 的待測水樣；將玻璃纖維濾膜過濾后的待測水樣作為同源接種水；
[0035]=、接種：在無菌環境下將步驟二得到的同源接種水接種至步驟一得到的裝有微 孔濾膜過濾后的待測水樣的無菌無碳的樣品瓶中，再使用滿旋振蕩器滿旋振蕩15s~30s， 得到待培養水樣；
[0036] 步驟S中所述的待培養水樣中同源接種水的體積分數為1%~20% ;
[0037] 四、測定起始細菌數：將步驟S得到的待培養水樣與SYBRGreenI染料共解化 lOmin~20min，得到解化后的待培養水樣；再利用流式細胞儀測定解化后的待培養水樣中 的起始細菌數Ti; 陽03引步驟四中所述的待培養水樣與SYBRGreenI染料的體積比為100:1 ;
[0039] 五、培養：將解化后的待培養水樣置于溫度為25°C~35°C的生化培養箱中避光培 養24h~72h，得到培養后的待測水樣；
[0040] 六、測定最終細菌數：將步驟五得到的培養后的待測水樣與SYBRGreenI染料共 解化lOmin~20min，得到經過解化的培養后的待測水樣；再利用流式細胞儀測定經過解化 的培養后的待測水樣中的最終細菌數T2;
[0041] 步驟六中所述的培養后的待測水樣與SYBRGreenI染料的體積比為100:1 ; W42] 屯、計算A0C含量：
[0043] 利用如下公式計算待測水樣中的A0C含量： W44]A0C(y g乙酸碳 /L)=化-Ti) A ;