一種測定針葉表面積的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及植物學領域，具體涉及一種測定針葉表面積的方法。
【背景技術】
[0002] 葉面積的測定方法較多，但是對針葉表面積的測定合適的方法較少，這是由于針 葉不是規則幾何體，難以測定其表面積。尤其云杉屬（Picea)植物的針葉較小，而且針葉表 面多為有棱角、突起和凹陷，呈非規則幾何形，針葉表面積難以測量，目前還沒有統一的測 定辦法。
【發明內容】
[0003] 為了能準確測定針葉的表面積，本發明提供一種測定針葉表面積的方法。
[0004] 本發明測定針葉表面積的方法的原理如下：
[0005] 把針葉看作一個非規則形的柱體，把這個非規則形柱體的表面展開，即形成一個 近似長方形，那么只要求得長方形的兩個邊長，既可以得到針葉的表面積。
[0006] 本發明提供的一種測定針葉表面積的方法，包括如下步驟：
[0007] 1)測定針葉長度L;
[0008] 2)制作針葉中部的橫切面切片，以之測定針葉周長C;
[0009] 3)計算針葉長度L和針葉周長C的乘積，即得到針葉表面積S。
[0010] 其中，所述針葉，指云杉屬植物的針葉。
[0011] 其中，步驟1)所述測定針葉長度L，測量精度為0.01cm。
[0012] 其中，步驟1)所述測定針葉長度L，優選以游標卡尺測定，更優選以電子游標卡尺 測定。
[0013] 其中，所述測定針葉長度L，要用力適度，切不可使針葉彎曲、變形，要求不可量取 針葉如端透明針尖和針葉后端葉柄。
[0014] 其中，步驟2)所述切片為徒手切片，迅速連貫地在針葉中部切下數個薄片，放入 水中使每個薄片彼此分離，蘸取薄而完整的薄片4-5個置于載玻片上，滴水后蓋上蓋玻片， 保證蓋玻片下沒有氣泡，且薄片彼此分離，蘸干多余水分，制得切片。
[0015] 其中，步驟2)所述測定針葉周長C，其為：
[0016] 拍攝切片上的橫切面電子顯微鏡照片，以LASV4. 2軟件處理橫切面電子顯微鏡照 片得到橫切面周長，即為針葉周長C。
[0017] 其中，所述的拍攝切片上橫切面電子顯微鏡照片，具體步驟如下：
[0018] 將電子顯微鏡和裝有LASV4. 2軟件的電腦相連，觀察切片，5倍物鏡下找到目標 后調節物鏡至10倍，調節微距使目標清晰可見，挑選切片上最完整的橫切面，采集圖像得 到橫切面電子顯微鏡照片。如果一張照片中放不下整個針葉橫切面，可以采集兩張重復度 在1/3以上的照片，利用合并照片工具，合成一個完整的橫切面電子顯微鏡照片。
[0019] 其中，所述的以LASV4. 2軟件處理橫切面電子顯微鏡照片，具體步驟如下：
[0020] 在安裝有LASV4. 2軟件的計算機上瀏覽橫切面電子顯微鏡照片，點擊處理工具欄 設置比例尺，在分析工具欄中的測量工具-區域-自由手繪的區域線工具下，沿著橫切面的 邊沿畫出閉合的曲線，曲線周長即顯示在照片上，導出為橫切面周長，即得到針葉周長C。
[0021] 其中，所述電子顯微鏡優選為LEICADM6000B電子顯微鏡。
[0022] 本發明提供的一種測定針葉表面積的方法，還包括針葉的取樣，具體步驟如下：選 取健康植株上的南向一級側枝剪下，〇°C以下低溫保存或浸入水中保存，測定時從側枝中部 將完整的針葉從根部切下，切下的針葉根部不帶葉柄。
[0023] 本發明提供的一種測定針葉表面積的方法，還包括測定多枚針葉表面積，求平均 值作為整個枝條或全株的針葉表面積的常數。所述多枚為10枚（含）以上，優選為1〇〇枚 (含）以上。
[0024] 本發明還提供所述測定針葉表面積的方法在林業數據采集中的應用。所述林業數 據采集指針葉表面積的數據采集。
[0025] 本發明提供的優點是：
[0026] 本發明測定針葉表面積的方法用針葉長度L乘以針葉周長C，就求得了單枚針葉 的表面積S，用這種方法測定針葉表面積，簡單、易于操作。當用以上方法求得多枚（例如 1〇〇枚）針葉的表面積，將這多枚針葉表面積的平均值作為常數，就可以求出全株或者整個 枝條針葉面積。用本發明的方法測定植物針葉表面積，尤其是云杉屬植物具有方便、快速、 比較精確，為生產和科學研宄提供了基礎數據收集的一種方法。
【附圖說明】
[0027] 圖1實施例1中用單面刀片從側枝上完整切下針葉的照片。
[0028] 圖2實施例1中采用電子游標卡尺測定針葉長度的照片。
[0029] 圖3實施例1中徒手切取針葉橫截面薄片的照片。
[0030] 圖4實施例1中LEICADM6000B電子顯微鏡下拍攝的針葉橫截面圖像。
【具體實施方式】
[0031] 以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。
[0032] 實施例1本發明的方法測定云杉屬植物一歐洲云杉的針葉表面積
[0033] 1、針葉取樣
[0034] (1)選取10棵正常生長的歐洲云杉健康植株，正常生長指的是樹高、胸徑等生長 指標在群體平均值左右，針葉完整，是指針葉顏色正常、生長發育正常，沒有損傷。
[0035] (2)從選取的云杉植株的南向頂層輪生枝，選擇針葉正常的一級側枝用修枝剪剪 下，為防止針葉失水變形，立即保存在〇°C以下的冰箱內，送入實驗室。選擇南向側枝的原因 是南向枝條一般較北向枝條生長好。針葉正常是指針葉顏色正常、生長發育正常，沒有損傷 等。
[0036] (3)在每棵植株采集的側枝上選擇10枚針葉作為測定樣本，具體為：將所采側枝 從冰箱內或水中取出，用濾紙沾干枝條和針葉上的水分，采用單面刀片從側枝中部將針葉 從根部完整切下數枚，具體參見圖1，要求切下的針葉根部不帶葉柄。
[0037] 2、針葉長度L的測定
[0038] 切下的針葉選擇完整、無損傷的，平鋪在桌面或者固定白紙上，采用電子游標卡尺 測定云杉針葉長度，具體見圖2。測量精度0.01cm，3次重復。量取針葉長度的時候要用力 適度，切不可使針葉彎曲、變形，影響測量準確度。測定歐洲云杉針葉長度的時候，用肉眼觀 察，不可量取針葉根部葉柄和針葉前端透明針尖。
[0039] 3、針葉切片的制作
[0040]將測定了針葉長度L的相應針葉制作切片，用單面刀片從針葉中部橫切，參見圖 3,動作迅速連貫地連續切下數個薄片，要求切下的薄片薄而均勻。將切下的薄片以毛筆帶 入裝有純水的培養皿中，用毛筆輕輕攪動，使每個薄片彼此分離，用肉眼選取薄而完整的薄 片，用毛筆蘸取，輕輕放在載玻片上，每個載玻片上放置4-5個薄片，用膠皮滴管滴一滴純 水在載玻片上，用尖嘴鑷子夾取蓋玻片，蓋玻片一端先放在載玻片上，后慢慢向下放直至完 全蓋上，保證蓋玻片下無空氣泡，而且薄片要彼此分離開，用吸水紙輕輕在蓋玻片周圍蘸干 多余水分，完成歐洲云杉針葉橫切面切片的制作。
[0041] 4、針葉周長的測定
[0042] 將LEICADM6000B電子顯微鏡和電腦相連，在電腦里安裝LASV4. 2軟件。將切片 放置于觀察臺面，將物鏡調節至5倍，觀察切片，找到目標后，調節物鏡至10倍，調節微距， 使目標清晰可見。挑選此切片上最好的1-2個針葉橫切面在采集工具欄下采集圖像，得到 橫切面電子顯微鏡照片。如果一張照片中放不下整個針葉橫切面，可以采集兩張重復度在 1/3以上的照片，利用合并照片工具，合成一個完整的橫切面電子顯微鏡照片。
[0043] 以LASV4. 2軟件按保存路徑瀏覽橫切面電子顯微鏡照片，在處理工具欄中可以設 置比例尺是否在圖片中顯示；在分析工具欄下的測量工具-區域-自由手繪的區域線工具 下，沿針葉橫切面的邊沿畫出閉合的曲線，曲線周長即顯示在照片上，點擊創建報表按鈕， 即導出一個此照片（見圖4)的excel報表和針葉橫切面周長，即得到針葉周長C。
[0044] 5、針葉表面積S的計算
[0045] 計算針葉長度L和針葉周長C的乘積，即得到針葉表面積S。
[0046] 表1為采用上述方法測得的歐洲云杉10個單株100枚針葉的表面積測定值。
[0047] 表1歐洲云杉10個單株100枚針葉表面積測定值
[0048]
[0049]
[0050]
[0051]
[0052] 實施例2本發明的方法測定云杉屬植物一青海云杉的針葉表面積
[0053] 1、針葉取樣
[0054] (1)選取10棵正常生長的青海云杉健康植株，正常生長指的是樹高、胸徑等生長 指標在群體平均值左右，針葉完整，是指針葉顏色正常、生長發育正常，沒有損傷。
[0055] (2)從選取的云杉植株的南向頂層輪生枝，選擇針葉正常的一級側枝用修枝剪剪 下，為防止針葉失水變形，立即浸泡在水中，送入實驗室。選擇南向側枝的原因是南向枝條 一般較北向枝條生長好。針葉正常是指針葉顏色正常、生長發育正常，沒有損傷等。
[0056] (3)在每棵植株采集的側枝上選擇10枚針葉作為測定樣本，具體為：將所采側枝