用表面增強拉曼光譜鑒定薄層板上不顯色物質的方法
【技術領域】
[0001]本發明具體涉及一種用表面增強拉曼光譜鑒定薄層板上不顯色物質的方法，屬于分析技術領域。
【背景技術】
[0002]目前，常用的結構鑒定手段如MS、NMR等對待檢物質的純度要求較高，當待檢物質是混合物，或者待檢物質中含有雜質量較多或雜質干擾較大時，這些結構鑒定手段就難以實現對待檢物質的結構鑒定，因此需要采用一定的分離技術先將待檢物質進行分離純化，之后再進行結構鑒定。
[0003]薄層色譜法(TLC)是將待檢物質在薄層板上點樣，采用適當的展開劑展開，根據待檢物質中各成份的吸附力和分配系數不同，將待檢物質進行分離純化，在通過待檢物質在薄層板上自身顯色、紫外照射或外加顯色劑，將主要成分斑點或雜志斑點與標準物質比對，從而實現對待檢物質的定性鑒別。由于操作簡單，分離快速，使用方便，適用范圍廣泛，且成本較低，薄層色譜法廣泛應用于對待檢物質進行分離純化和鑒定，但這種鑒定僅是一種粗略的評估。
[0004]一些分析工作者將TLC分離技術與一些結構鑒定手段聯用，通過待檢物質在薄層板上自身顯色或紫外照射顯色，在薄層板上相對應的Rf值處先找到待檢物質的斑點，再通過一些傳統的結構鑒定手段對待檢物質的斑點進行檢測，以實現對待檢物質的結構確證。但當待檢物質經TLC分離后在薄層板上難以顯色定位時，這些傳統的結構鑒定手段對經薄層板分離之后待檢物質則無法進行鑒定。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在于提供一種用表面增強拉曼光譜鑒定薄層板上不顯色物質的方法，已解決上述問題。
[0006]為了實現上述目的，本發明的技術方案是:
[0007]—種用表面增強拉曼光譜鑒定薄層板上不顯色物質的方法，將待檢物質經薄層板分離后采用拉曼光譜儀對薄層板進行掃描，其特征在于:
[0008]將薄層板上點樣斑到溶劑前沿的垂線標記為檢測線，向點樣斑上滴加表面增強齊U，取拉曼光譜儀，從點樣斑處開始，沿檢測線進行逐點掃描，每隔m毫米掃描一次，掃描η次后暫停掃描，在掃描停止處滴加一次表面增強劑，滴加完畢后繼續每隔m毫米掃描一次，掃描η次后暫停掃描，滴加表面增強劑后繼續進行掃描，重復上述操作直至掃描到溶劑前沿，得到一系列的拉曼光譜圖，將所得到的拉曼光譜圖與標準的物質譜圖進行比對，完成對待檢物質的鑒定，m為0.5?2.5中的任意數值，η為I?10中的任意數值,表面增強劑為金溶膠、銀溶膠或金銀合膠。
[0009]本發明的技術方案的進一步特征在于:m為0.5，η為3。
[0010]本發明的技術方案的進一步特征在于:表面增強劑為銀溶膠。
[0011]本發明的技術方案的進一步特征在于:將薄層板上點樣斑的中心點到溶劑前沿的垂線標記為檢測線。
[0012]與【背景技術】相比，本發明的技術方案的作用與積極效果為:
[0013]1.能夠對薄層板上不顯色物質進行鑒定
[0014]本發明的技術方案采用拉曼光譜儀沿檢測線進行逐點掃描，覆蓋了待檢物質在薄層板上分離后的所有物質，因此能夠得到與待檢物質中所有組份的拉曼光譜圖，從而實現了對待檢物質中各組分的結構鑒定，即使待檢物質在薄層板上難以顯色定位，也能夠對待檢物質的各成份進行結構鑒定。
[0015]2.準確性好，適用范圍廣
[0016]本發明的技術方案采用拉曼光譜儀對檢測線進行逐點掃描，由于拉曼光譜儀特征性強，且不需要對待檢物質進行預處理，因此不僅準確性好，操作也較為簡單方便。與【背景技術】相比，當待檢物質中某個成份的含量較低時，也能夠進行檢測，因此本發明的技術方案應用廣泛，適用范圍廣。
[0017]3.檢測速度較快
[0018]本發明的技術方案對操作壞境要求低，檢測速度較快，當采用的拉曼光譜儀為便攜式拉曼光譜儀時，在非實驗室條件下也可以實現對待檢物質進行鑒定。
【附圖說明】
[0019]圖1為實施例一中待檢物質經薄層層析后的說明圖；
[0020]圖2為實施例一中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；
[0021]圖3為實施例二中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；
[0022]圖4為實施例三中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；
[0023]圖5為實施例四中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；
[0024]圖6為實施例五中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；
[0025]圖7為實施例六中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；
[0026]圖8為實施例七中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；
[0027]圖9為實施例八中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；
[0028]圖10為實施例九中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；以及
[0029]圖11為實施例十中沿檢測線進行逐點掃描后所得的拉曼光譜圖；
【具體實施方式】
[0030]以下結合附圖，對本發明的技術方案的具體實施形態做進一步說明。
[0031]〈實施例一〉
[0032]本實施例采用的拉曼光譜儀為便攜式拉曼光譜儀(BWS415，B&W Tek Inc., U.S.A);采用的表面增強劑劑為銀溶膠，該銀溶膠通過Lee法制備獲得:將硝酸銀(90毫克)溶解在蒸餾水500毫升，加熱至沸騰，隨后加入I %檸檬酸鈉(1mL)中的溶液中加入并保持在I小時煮沸。最后，將溶液冷卻至室溫下連續攪拌，攪拌完全后，與4°C冰箱保存；采用的薄層板為高效薄層硅膠板。
[0033]本實施例選擇苯丙哌林為待檢物質，精密稱取苯丙哌林0.0018g,于Iml甲醇中定容，配置濃度為lmg/ml的待檢物質的溶液。如圖1所示，采用毛細管取待檢物質的溶液，在薄層板I的P處(以下簡稱薄層板)進行點樣，采用9:1:0.1的二氯甲烷、甲醇、氨水為展開劑進行展開，約20min后分離結束，將薄層板I置于空氣中，待展開劑揮干后，該待檢物質在薄層板上不能顯色，于紫外燈(UV254nm)下觀察，該待檢物質在紫外燈下不能顯色。
[0034]本實施例所提供的對待檢物質進行鑒定的方法為:
[0035]將點樣斑P的中心點到溶劑前沿的垂線標記為檢測線。向點樣斑P上滴加4微升的表面增強劑，取拉曼光譜儀，將薄層板放置在拉曼光譜儀的檢測區域，從點樣斑的中心點開始，沿檢測線進行逐點掃描，每隔0.5毫米掃描一次，掃描6次后暫停掃描，在掃描停止處滴加一次表面增強劑，滴加完畢后繼續每隔0.5毫米掃描一次,掃描6次后暫停掃描,滴加表面增強劑后繼續進行掃描，重復上述操作直至掃描到溶劑前沿，得到如圖2所示的16張拉曼光譜圖。
[0036]將所得到的拉曼光譜圖與標準的物質譜圖進行比對，由圖2可知，從點樣斑P開始，掃描得到的第一張至第七張譜圖未測到任何物質，第十五張至第十六張譜圖顯示也未測到任何物質，第八張到第十四張譜圖顯示有物質出現，對第八張到第十四張譜圖進行進一步分析，第八張到第十四張譜圖均為在KKMcm'lOSOcm'KMScnT1處出現吸收峰，對照拉曼光譜譜圖數據庫，顯示lOCMcm'lOSOcm'KMScnT1處的出峰為苯丙哌林的特征峰，因此判斷在第八張到第十四張譜圖處出現的為苯丙哌林，完成對該待檢物質的鑒定。該鑒定結果與實際相符。
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