一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸中薄荷腦含量的方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于藥物質量測定方法技術領域，具體為一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油 滴丸中薄荷腦含量的方法。
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【背景技術】
[0003] 薄荷素油滴丸中主要成分為薄荷素油，薄荷素油主要成份為薄荷腦（menthol)，因 此含量測定選擇以薄荷腦為測定指標。通過對薄荷素油滴丸中薄荷腦含量的測定，能夠有 效的控制其質量，保證臨床用藥的有效性和安全性。薄荷腦，是一種白色條狀或柱狀結晶， 為單萜類成分，沸點較低，易揮發，難溶于水，易溶于乙醇、酯等，制成水溶型制劑存在一 定的困難。
[0004] 檢測薄荷素油滴丸中薄荷腦含量，常用檢測方法是使用內標法對其含量進行測 定，操作過程較復雜，并且還需要使用內標物，成本高。
[0005] 現在有人運用氣相色譜儀來進行原料成份的檢測與分析，氣相色譜儀是一種多組 份混合物的分離、分析工具，它是以氣體為流動相，采用沖洗法的柱色譜技術。當多組份的 分析物質進入到色譜柱時，由于各組分在色譜柱中的氣相和固定液液相間的分配系數不 同，因此各組份在色譜柱的運行速度也就不同，經過一定的柱長后，順序離開色譜柱進入檢 測器，經檢測后轉換為電信號送至數據處理工作站，從而完成了對被測物質的定性定量分 析。
[0006] 但采用氣相色譜法建立含量測定方法，標準操作步驟不僅僅是儀器的開機、關機 等簡單的確操作步驟。不同原料種類具有不同的關鍵測定參數，不同的關鍵測定參數會得 到不同的檢測結果。
[0007] 目前還沒有關于用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸中薄荷腦含量的相關報道。因 此，是否可以用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸中薄荷腦含量？如何在測定過程中選擇適合 薄荷腦含量的測定參數？并且如何使選取目標峰的分離度、對稱性、理論塔板數均能都達 到藥典要求的條件？等等。這些問題目前則是未知，需要去探索。
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【發明內容】
[0009] 為了解決以上技術問題，本發明提供一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸中薄荷 腦含量的方法，此方法操作簡單，重復性高，穩定性好，檢測成本低。
[0010] 解決以上技術問題的一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸中薄荷腦含量的方法， 其特征在于：包括以下步驟： (1)制備薄荷腦對照品溶液：制備薄荷腦對照品溶液：取薄荷腦對照品，稱定，加乙醇 制成；具體為取薄荷腦對照品，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含0. 2-0. 52mg薄荷腦的溶 液，即得。
[0011] (2)制備供試品溶液：取供試品，稱定置量瓶中，加水和乙醇，過濾即得； 具體為取供試品，精密稱定，置量瓶中，加水，超聲處理使溶散，加入無水乙醇，超聲處 理4-5分鐘，放冷，加無水乙醇至所需刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得； (3) 吸取不同體積的A、B、C、D和E薄荷腦對照品溶液，注入氣相色譜儀，測定峰面積， 以進樣量為橫坐標，以峰面積值為縱坐標，進行線性回歸計算，繪制標準曲線，得到標準曲 線回歸方程，Y=nX+4e-13, X為進樣量，Y為峰面積，η為斜率，4E-13為4*10_13的科學計數； (4) 吸取供試品溶液，注入氣相色譜儀，測定，記錄色譜圖，用外標法計算薄荷腦的含 量；或根據步驟（3)中的標準曲線回歸方程計算出薄荷腦的含量； 其中，本發明的優化方案中，所述氣相色譜儀中以聚乙二醇20000為固定相的毛細管 柱；分流進樣，分流比10-20 :1 ;柱溫為程序升溫，初始溫度50-115°C，保持4-5分鐘，以每 分鐘1. 5-4°C的速率升溫至200°C，保持2-3分鐘；進樣口溫度230°C ;檢測器溫度230°C ; 載氣流量l-2ml/min。
[0012] 還有優化方案中，所述超聲處理中超聲功率200W，頻率40kHz。
[0013] 所述毛細管柱柱長為30m，內徑為0. 53mm，膜厚度為1 μ m。
[0014] 所述分流比為10 :1，分流比為10:1的色譜峰峰形最為對稱，分離度最好，塔板數 最尚。
[0015] 所述載氣流量2ml/min的色譜峰峰形最為對稱，分離度最好。
[0016] 所述柱溫為程序升溫：初始溫度80-115?，保持4-5分鐘，以每分鐘3-4°C的速率 升溫至200 °C，保持3分鐘；進樣口溫度230 °C。
[0017] 進一步優化方案中，所述柱溫為程序升溫：初始溫度115°c，保持5分鐘，以每分鐘 4°C的速率升溫至200°C，保持3分鐘；進樣口溫度230°C。
[0018] 所述檢測方法中按薄荷腦峰計算，理論板塔數不低于50000。
[0019] 本發明的檢測過程中每次吸取供試品溶液量為1 μ 1。
[0020] 為了簡化操作流程，本發明中采用外標法對薄荷素油滴丸進行含量測定，通過對 薄荷素油滴丸中薄荷腦含量的測定，有效的控制其質量，保證臨床用藥的有效性和安全性。
[0021] 薄荷腦為單萜類成分，沸點較低，采用氣相色譜法建立含量測定方法。其中柱 溫、載氣流速、分流比為關鍵參數。柱溫，載氣流速不同出峰時間、目標峰的對稱性、分離度、 理論塔板數不同；分流比不同，進入儀器的樣品量不同，分流比大，進入儀器的樣品量大，分 流比小，進入儀器的樣品量小。
[0022] 氣相色譜儀要求進行儀器的樣品各成分均具有揮發性，在選擇溶劑時優先選擇具 有揮發性，毒性小的溶劑，經過多種溶劑的對比，最終選擇無水乙醇作為提取溶劑。
[0023] 本發明中的檢測方法的理論板數為157833、分離度位1. 52、重復性為1%和拖尾因 子為1. 03,均達到《中國藥典》2010年版一部附錄VI D高效液相色譜法中的規定。
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【附圖說明】
[0025] 圖1為本發明中實施例5的膽舒滴丸標準曲線圖 圖2-1，2-2, 2-3為本發明中專屬性考察色譜圖 圖中R是相關系數，X為進樣量，Y為峰面積，η為斜率，4Ε-13為4*10-13的科學計數
【具體實施方式】
[0026] 以下通過實例對本發明作進一步的說明，其中： 所用實驗儀器為Agilent 78090B氣相色譜儀；色譜柱：HP-INN0WAX毛細管柱 (30m*0. 53mm*l μπι);萬分之一天平(賽多利斯BS110S)、KQ - 250B型超聲清洗器（昆山超 聲電子有限公司）。
[0027] 所用試劑及試藥：水為超純水，無水乙醇為分析純。
[0028] 薄荷腦為中國藥品生物制品檢定所110728-200506 ; 膽舒滴丸：四川新綠色藥業科技發展股份有限公司，批號為1312001,312002， 1312003,140501，140502,140503,150401，150402,150403。
[0029] 實施例1 一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸中薄荷腦含量的方法，包括以下步驟： (1)制備對照品溶液：取薄荷腦對照品，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含0. 2mg的 溶液，即得。
[0030] (2)制備供試品溶液：取本品5丸，精密稱定，置50ml量瓶中，加水4ml，超聲處理 使溶散，加入無水乙醇30ml，超聲處理(功率200W，頻率40kHz) 5分鐘，放冷，加無水乙醇至 刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得； 膽舒滴丸的基質為聚乙二醇6000,在水或乙醇中易溶，薄荷素油與乙醇、氯仿或乙醚 能任意混合，同時在測定過程當中大量進水樣對毛細管柱損傷比較大，因此確定本發明中 膽舒滴丸圖譜供試品溶液的制備方法。
[0031] (3)分別精密吸取薄荷腦對照品溶液（0· 52mg/ml)0. 2 μ 1、0· 5 μ 1、0· 8 μ 1、1 μ 1、 I. 5 μ 1，注入氣相色譜儀，測定峰面積，以進樣量為橫坐標，以峰面積值為縱坐標進行線性 回歸計算，繪制標準曲線，得到標準曲線回歸方程，Y=nx+4e-13, X ( yg)為進樣量，Y為峰 面積，η為斜率，4E-13為4*10_13的科學計數； 氣相色譜儀中以聚乙二醇20000為固定相的毛細管柱（柱長為30m，內徑為0. 53mm，膜 厚度為1 μ m);柱溫為程序升溫：初始溫度50°C，保持5分鐘，以每分鐘I. 5°C的速率升溫至 200°C，保持3分鐘；進樣口溫度230°C ;檢測器溫度230°C ;分流進樣，分流比10 :1 ;載氣流 量I. 5ml/min ;理論板數按薄荷腦峰計算應不低于50 000。
[0032] (4)精密吸取供試品溶液各1 μ 1，注入氣相色譜儀，測定，記錄色譜圖，用外標法計 算薄荷腦的含量；或根據步驟（3)中的標準曲線回歸方程計算出薄荷腦的含量。
[0033] 實施例2 一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸中薄荷腦含量的方法，其它內容如實施例1，其 中： 制備對照品溶液：取薄荷腦對照品，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含0. 52mg的溶 液，即得。
[0034] 氣相色譜儀中以聚乙二醇20000為固定相的毛細管柱（柱長為30m，內徑為 0. 53mm，膜厚度為1 μ m);柱溫為程序升溫：初始溫度60°C，保持4分鐘，以每分鐘3°C的速 率升溫至200°C，保持3分鐘；進樣口溫度230°C ;檢測器溫度230°C ;分流進樣，分流比20 : 1 ;載氣流量2ml/min ;理論板數按薄荷腦峰計算應不低于50000。
[0035] 實施例3 一種用氣相色譜儀檢測薄荷素油滴丸中薄荷