樣品濃縮裝置的制造方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種利用捕獲柱的樣品濃縮裝置，可以用作例如對由分離LC(液相色譜儀)分離分餾的餾分進行濃縮處理的裝置、或在LCMS (液相色譜儀質量分析裝置)中對由LC分離并作為樣品提供給MS的餾分進行濃縮處理的裝置等。
【背景技術】
[0002]作為以單一成分將被合成的化合物提取出的方法，一般常用的有即便是在液相色譜儀中也采用分離液相色譜儀，進行分離分餾后再濃縮的方法。
[0003]雖然真空蒸發器也被用于濃縮，但從如果與除去柱一并使用即能夠去除添加劑等來看，常用的還是利用捕獲柱來進行濃縮(參見專利文獻I。)。
[0004]將樣品捕獲至捕獲柱的時候，一般地，由于如果樣品濃度高、或者樣品溶劑的溶劑強度較強的話，就難以捕獲，因此為了更容易地進行捕獲，將稀釋了的樣品向捕獲柱送液。
[0005]稀釋雖然也可以在調配樣品時進行，但在稀釋后的樣品容量過大的情況下，處理將會變得困難，因而在線上進行稀釋。在線上進行的稀釋，作為實施例可以使用與如圖1及圖4所示的樣品濃縮裝置中的流路結構相同的流路。
[0006]圖1是高壓閥2被切換到將樣品回路4插入包含樣品推出部5及捕獲柱8的主流路上的注入位置；圖4是高壓閥2被切換到將樣品回路4插入包含注射泵3及取樣針30的計量流路上的計量位置。
[0007]在這種樣品濃縮裝置中，高壓閥2從空轉狀態(高壓閥2是與注入位置相同的圖1的狀態)被切換為圖4的樣品計量狀態，在自動取樣器I中，通過注射泵3來吸引樣品并導入至樣品回路4中。其后，高壓閥2被切換成圖1的注入狀態，利用自樣品推出部5送液的流動相從樣品回路4中推出樣品回路4中的樣品。并且，樣品在主流路的三通接頭7中通過與自補給部6送液的稀釋液(通常為與流動相同樣的構成)進行混合而被稀釋，并被導入捕獲至捕獲柱8。
[0008]此時的稀釋率通常為樣品容量的數倍。補給部6最低要求在樣品完全通過三通接頭7為止的期間，補償樣品推出部5的流量的(稀釋率-1)倍的流量。要求在樣品完全通過三通接頭7之后，樣品推出部5進行送液直到樣品完全固定在捕獲柱8上為止。
[0009]因為不會在樣品濃縮裝置中進行分離或分析，所以通常空轉時沒有必要從樣品推出部5對流動相進行送液，補給部6也沒有必要送液。尤其，在將大量的樣品用大量的流動相和大量的稀釋液來進行濃縮的情況下，希望在剛要進行濃縮之前開始送液，且濃縮完畢后迅速停止。但是，實際上，如上述那樣對送液動作進行控制并非易事。那是由于有下述的緣故。
[0010]這種樣品濃縮裝置所用的樣品的一個例子是將被合成了的化合物利用分離系統分離的單一成分樣品。作為一個例子，圖3中示出利用分離系統產生的2成分峰值的分餾例子。在該例中，成分B (保持時間5.8分鐘)的峰值與拖尾的成分A (保持時間5.7分鐘)重疊。作為條件，如果假設流量為10mL/分鐘、I個分餾用小瓶的最大分餾容量為1mL的話，則0.1分鐘小瓶的容量將達到上限。于是可知，在該例中，分餾9由于達到了小瓶#1的最大分餾容量1mL而切換至分餾10，其后，在達到小瓶#2的最大分餾容量1mL之前，檢測成分B的峰值的上升并切換至分餾11，在檢測到成分B的峰值下降時切換至分餾12。
[0011]在圖3的例子中，將作為單一成分的分餾9、10、12作為樣品注入利用捕獲柱的濃縮系統中進行濃縮。
[0012]在一般的液相色譜儀分析系統中，樣品的注入及分析處理是用被稱為批處理表(有時也稱為順序表、或樣品組)的表來程序化的。批處理表的I行與I個分析相對應，各行包含有樣品小瓶的位置、樣品容量、及其他的分析條件。
[0013]其他的分析條件包含有分析初始參數集、對自動取樣器I的動作進行定制的注入預處理程序(通常被稱為預處理程序。在非定制的情況下，標準預處理動作被程序化于內部)、時間程序(有時也稱為事件或事件程序。)等，通常，其他的分析條件存放在被稱為裝置方法的參數集中。(預處理程序獨立于裝置方法，有時也由批處理表來指定)
[0014]批處理表中的I行的處理是按樣品小瓶的位置、樣品容量、及向其他分析條件的裝置的下載(下載)、預處理程序的執行(預處理執行)、時間程序的執行及色譜的記錄開始(分析執行)的順序來進行的。
[0015]作為圖3中的例子的程序方法，有以下的(a)?(d)4種。
[0016](a)將分餾9、10、12移至I個小瓶并作為I個樣品，以I行.I注入進行程序化。
[0017]這里，“注入”是指在預處理程序中將I個樣品導入樣品回路4之后，將高壓閥2切換至注入位置，并將樣品回路4與主流路連接。多數情況下，在切換高壓閥2的同時，還輸出用于進行時間程序或色譜的記錄開始的事件信號(電信號、通信指令、軟件命令)，但有時也在切換高壓閥2的前后輸出事件信號。
[0018]在這種情況下，在裝置方法中，由預處理程序進行I個樣品的“注入”處理，由時間程序對樣品推出部5及補給部6進行控制，并直到樣品固定至捕獲柱8為止。這里，在將樣品導入至樣品回路4后，在切換高壓閥2之前，由時間程序輸出用于利用樣品推出部5及補給部6開始流動相及稀釋液的送液的事件信號，并等待送液穩定下來后進行高壓閥2的切換。
[0019](b)將分餾9、10、12以3行.2加載、I注入進行程序化。
[0020]這里，“加載”是指在預處理程序中將樣品導入樣品回路4之后，不切換高壓閥2。在此例的情況下，因為I行I加載，所以“加載”后，由預處理程序輸出事件信號，并開始運行時間程序，但由于樣品推出部5及補給部6不需要動作，因而時間程序立即結束。另外，由于時間程序立即結束，因而即便是不切換高壓閥2就無法輸出事件信號的自動取樣器1，利用“注入”處理也可以進行與“加載”相當的處理，但這里的詳細說明予以省略。
[0021]實際上，準備并組合到第N-1行為止的樣品推出用裝置方法和第N行的注入用裝置方法。在此例的情況下，在分餾9、10的樣品推出用裝置方法中，由預處理程序進行I個樣品的“加載”，在分餾12的注入用裝置方法中，由預處理程序進行I個樣品的“注入”，直到將樣品固定至捕獲柱8為止。注入用裝置方法的處理內容與(a)的裝置方法的處理內容相同。此時，分餾9、10的樣品與分餾12的樣品一起被送至捕獲柱8。
[0022](c)將容量固定的分餾9和容量不定的分餾10以I行.2加載進行程序化，將容量不定的分餾12以I行.I注入進行程序化。
[0023]實際上，準備并組合I行.Ν加載(N = I?，N-1分餾固定容量，I分餾不定容量)的樣品推出用裝置方法及I行.I注入的注入用裝置方法。在此例的情況下，在分餾9、10的樣品推出用裝置方法中，由預處理程序進行固定容量I個樣品、不定容量I個樣品(容量在批處理表中指定)的“加載”，在分餾12的注入用裝置方法中，由預處理程序進行不定容量I個樣品(容量在批處理表中指定)的“注入”，直到將樣品固定至捕獲柱8為止。注入用裝置方法的處理內容與(a)的裝置方法的處理內容相同。
[0024](d)將分餾9、10、12以I行.2加載、I注入進行程序化，通過包含在該裝置方法中的自動取樣器的預處理程序，對分餾9、10、12的容量作個別地定制并進行“加載”及“注入”。
[0025]在此方法中，裝置方法由預處理程序對分餾9、10各自的樣品進行“加載”，對分餾12的樣品進行“注入”，直到固定至捕獲柱8為止。導入樣品回路4后的處理內容與(a)的裝置方法的處理內容相同。
[0026](a)?(d)中的任一種情形都需要補給部6將實際的樣品注入量的數倍量的稀釋液進行送液。
[0027]這里，被導入樣品回路4、并被注入主流路中的“實際的樣品注入量”，在不需要進行特殊的預處理情況下，是總樣品容量，在進行添加劑的混合等預處理的情況下，是將添加劑的容量加上總樣品容量的容量，事先確定較難。為此，通常替代“實際的樣品注入量”，根據樣品回路4的容量和向主流路的注入次數或、最大分餾容量和最大分餾小瓶數來定義“最大樣品注入量”。
[0028]液相色譜儀分析的主要目的是分離分析，樣品的保持時間不依賴于樣品容量，依賴于樣品容量的僅僅是決定樣品的洗脫范圍的拖尾因子。為此，液相色譜儀分析中的分析時間在使用特定樣品的情況下，不依賴于樣品容量，可以視為一定。
[0029]另外，分離分析中的拖尾因子是被定義成胃(|.(15/2€的指標，意味著拖尾因子越大則拖尾就越大。這里，WaΜ是峰值高度的5%的高度上的峰值寬度、f是W α(ι52中從峰值的上升側到峰值頂點的位置為止的距離。
[0030]液相色譜儀分析裝置的裝置控制