一種麝香心痛寧制劑的檢測方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種麝香心痛寧制劑的檢測方法，屬于中藥檢測領域。
【背景技術】
[0002] 現有技術中，對麝香心痛寧制劑的鑒別和檢測方法為：
[0003] 鑒別：（1)人工麝香鑒別：乙醚提取，硅膠G薄層板，甲苯展開，二硝基苯肼試液顯 色；
[0004] (2)蘇合香鑒別：乙醚提取，硅膠G254薄層板石油醚-正己烷-甲酸乙酯-甲酸展 開，紫外燈檢視；
[0005] (3)川芎鑒別：乙醚提取，硅膠G薄層板正己烷-乙酸乙酯展開，紫外燈檢視下檢 視；
[0006] (4)冰片鑒別：乙酸乙酯提取，PEG-20W為固定相的氣相色譜鑒別；
[0007] (5)人參鑒別：乙醚提取后殘渣，水飽和正丁醇超聲，正丁醇提取液用質量濃度為 〇. 5%氫氧化鈉溶液洗滌2次，水相棄去，再用正丁醇飽和的水洗至中性，蒸干，硅膠G薄層 板，氯仿-甲醇-水展開，10%硫酸乙醇顯色；
[0008] 含測：延胡索乙素檢測：
[0009] 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇_0. 1 %磷酸（三乙胺調節pH至7. 0)(體 積比為60:40)為流動相，0. 1%磷酸為體積濃度，檢測波長為280nm。
[0010] 供試品制備方法：取重量差異下的本品，研細，取2.0克，精密稱定，至錐形瓶中， 加氨水2. 0毫升，浸潤15分鐘，精密加入乙醚50毫升，加塞，稱重，超聲處理1小時，放冷， 稱重，補足重量，精密取25毫升，用乙酸溶液（1-10)提取3次（20、20、15毫升），合并乙酸 提取液，至分液漏斗中，用氨水調pH至10-11，用乙醚振搖提取4次（20、20、15、15毫升）， 合并乙醚液，低溫揮干，殘渣加甲醇溶解轉移至5毫升容量瓶中，搖勻即得。
[0011] 現有技術中所存在的缺陷如下：
[0012] 1、⑴人工麝香鑒別：麝香酮對照品為油狀液體，配制溶液不方便，稱量過程損失 大；麝香酮易揮發，穩定性差；
[0013] (2)冰片鑒別：方法準確度高，但簡潔性差，對設備要求高，可以采用薄層色譜代 替；
[0014] (3)人參鑒別：過程復雜，正丁醇液氫氧化鈉洗滌、水洗滌過程乳化嚴重，放置過 夜仍不能很好分層，操作時間非常長；
[0015] (4)沒有延胡索的鑒別。
[0016] 2、含測：檢測延胡索乙素
[0017] (1)對除延胡索乙素其他成分檢出差，分離度差。
【發明內容】
[0018] 針對上述問題，本發明提供了一種麝香心痛寧制劑的檢測方法，本發明對麝香心 痛寧制劑的全部藥味進行鑒別，且確定了麝香心痛寧的以延胡索乙素為參照物的特征指 紋。本發明的技術方案如下：
[0019] -種麝香心痛寧制劑的檢測方法
[0020] 1、鑒別：
[0021] (1)鑒別人工麝香：取麝香心痛寧樣品，研細，加乙醚，樣品與乙醚的質量體積比 為1:8-10 (g/mL)，超聲處理15分鐘，濾過，過濾后的濾液揮發干留下的殘渣（濾渣為濾紙上 的不溶物；殘渣為為溶液蒸干溶劑后的殘留物）中加入2, 4-二硝基苯肼試液（2, 4-二硝基 苯肼試液的配制方法：取2, 4-二硝基苯肼lg，加乙醇1000毫升，即得），2, 4-二硝基苯肼試 液與乙醚的體積比為1 :20,放置30分鐘，加乙腈溶解轉移并定容至容量瓶中，振搖，濾過， 濾液作為供試品溶液；另取麝香酮腙對照品，加乙腈配置成每毫升含麝香酮腙〇. 2mg的溶 液，作為對照品溶液，按照高效液相色譜法，十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0. 1 % 磷酸（三乙胺調節pH至6.0,甲醇和0. 1 %磷酸的體積比為95:5,0. 1 %磷酸為體積濃度） 為流動相，檢測波長為365nm;
[0022] 分別取供試品溶液和對照品溶液10ul注入高效液相色譜儀中，供試品色譜中呈 現與對照品保留時間一致的色譜峰。
[0023] (2)鑒別蘇合香、川芎、冰片：取麝香心痛寧樣品，研細，加乙醚，樣品與乙醚的質 量體積比為l:8-10(g/mL)，超聲處理15分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液，濾渣備用；另取 冰片對照品，加甲醇配置成每毫升含冰片2mg的溶液，作為冰片對照品溶液；取川芎對照藥 材1克，加乙醚20毫升，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮干，加乙酸乙酯2毫升溶解，作為川 芎對照藥材溶液；取蘇合香對照藥材0. 1克，加乙醚10毫升溶解，作為蘇合香對照藥材溶 液；按照薄層色譜法實驗，吸取供試品溶液、冰片對照品溶液、川芎對照藥材溶液、蘇合香對 照藥材溶液四種溶液各l〇ul，點于同一硅膠G薄層板，石油醚-乙酸乙酯（體積比為9:1) 展開，利用質量濃度為5%的硫酸香草醛試液顯色，熱風烘至斑點清晰，供試品色譜中，與對 照品、對照藥材色譜相應位置顯相同顏色的斑點（或主斑點）。
[0024] (3)鑒別人參：取麝香心痛寧樣品，研細，加乙醚，樣品與乙醚的質量體積比為 1:8-10 (g/mL)，超聲處理15分鐘，濾過，濾澄中加與乙醚等體積的水超聲處理5分鐘，取上 清液，通過D101型大孔吸附樹脂柱（內徑lcm，柱長15cm)，以水洗脫，棄去水液，再用體 積濃度為80 %乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，加甲醇溶解作為供試品溶液；另取人參對照藥 材0. 5克，加水飽和正丁醇溶液20毫升超聲30分鐘，濾過，濾液蒸干，殘渣加水溶解，通 過D101型大孔吸附樹脂柱（內徑lcm，柱長15cm)，以水洗脫，棄去水液，再用體積濃度為 80 %乙醇洗脫，收集洗脫液，蒸干，加甲醇溶解作為對照溶液；取供試品溶液和對照溶液各 l〇ul，點于同一硅膠G薄層板，以體積比為65:35:10的氯仿-甲醇-水的下層溶液為展開 劑（注：溶液分層，取下層），展開，用體積濃度為10 %的硫酸乙醇溶液顯色，加熱至斑點清 晰，供試品色譜中，與對照藥材色譜相應位置顯相同顏色的主斑點。
[0025] (4)延胡索鑒別：取麝香心痛寧樣品，研細，加乙醚，樣品與乙醚的質量體積比為 1:8-10 (g/mL)，超聲處理15分鐘，過濾，濾液作為供試品溶液；另取延胡索對照品，加甲醇 配置成每ml含延胡索乙素0. 5mg的溶液，作為對照品溶液；
[0026]取供試品溶液和對照品溶液各10ul，點于同一硅膠G薄層板，氯仿-甲醇（體積比 為9:1)展開，改良碘化鉍鉀試液顯色，供試品色譜中，與對照品色譜相應位置顯相同顏色 的斑點。
[0027] 2、含測：檢測延胡索乙素及特征指紋、質譜分析
[0028] 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇_0. 1 %磷酸（三乙胺調節pH至6.0)為流 動相，檢測波長為280nm。
[0029] 梯度改變流動相比例的時間點，以及該時間點設定的甲醇與0. 1%磷酸的體積比 如下：
[0030] Omin時，甲醇與0. 1%磷酸溶液的體積比為68:32 ;5min時，甲醇與0. 1%磷酸溶 液的體積比為68:32 ;10min時，甲醇與0. 1%磷酸溶液的體積比為30:70 ;15min時，甲醇 與0. 1%磷酸溶液的體積比為40:60 ;20min時，甲醇與0. 1%磷酸溶液的體積比為50:50 ; 60min時，甲醇與0. 1 %磷酸溶液的體積比為68:32。
[0031] 樣品供試液的制備方法：取重量差異下的麝香心痛寧供試品，研細，取2.0克，精 密稱定，至錐形瓶中，加氨水2. 0毫升，浸潤15分鐘，精密加入乙醚50毫升，加塞，稱重，超 聲處理1小時，放冷，稱重，補足重量，精密取25毫升，用體積濃度為10%的乙酸溶液，提取 3次（20、20、15毫升），合并乙酸提取液，至分液漏斗中，用氨水調pH至10-11，用乙醚振搖 提取4次（20、20、15、15毫升），合并乙醚液，低溫揮干，殘渣加甲醇溶解轉移至5毫升容量 瓶中，搖勻即得。
[0032] 本發明與現有技術相比具有以下優點：
[0033] 本發明人工麝香鑒別中對照品為粉末狀態，比現有技術的液態對照品穩定性好， 易操作，損失小，準確度高；另外本發明還解決了麝香酮腙一般色譜條件（甲醇-水、乙 腈-水）色譜峰易拖尾或前伸的問題，本發明的色譜峰形狀更符合檢測要求，更對稱；本發 明中川芎、蘇合香、冰片鑒別項用同一薄層板，一次性鑒別3種藥材，專屬性強，與現有技術 相比簡便省時，大幅度提高檢測分析能力；本發明中人參的鑒別與現有技術的萃取法比較， 既能達到原檢測標準，同時使供試品制備時間大幅度縮小，提高檢測效率；本發明延胡索的 鑒別與現有技術的碘蒸汽顯色比較，本發明顯色斑點更多，更環保（碘蒸氣有毒性）；本發 明延胡索特征指紋圖譜共有10種共有峰，比較現有技術分離度更好；本發明的質譜鑒定為 麝香心痛寧制劑專有技術，現有技術中無此鑒定方法，增強麝香心痛寧制劑的質量控制手 段。
【附圖說明】
[0034] 圖1為本發明麝香酮腙對照品圖譜；
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