一種多通道勻漿裝填毛細管色譜柱的裝置的制造方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種多通道勻漿裝填毛細管色譜柱的裝置，屬于分析化學、生物分析和蛋白質組學領域。
【背景技術】
[0002]液質聯用技術已經成為復雜生物樣本中多肽、蛋白質、蛋白質組的定性鑒定和定量的常用分析方法。由于生物樣品中生物大分子組成的極端復雜性，如組成種類繁多、動態范圍寬，因此，毛細管高效液相色譜與質譜聯用已經成為常用的分離分析技術。通常采用的氣壓-勻漿裝柱技術可以滿足長度約為20cm、裝填3?5微米顆粒填料的毛細管色譜柱的裝柱要求，以用于一般生物樣本中蛋白質組的定性和定量分析。但對于目前提出的蛋白質組深度覆蓋，特別是實現對低豐度蛋白質的定性鑒定和定量分析，則需要更長的裝填3?5微米顆粒填料的毛細管色譜柱，如50cm長的毛細管色譜柱或裝填亞2微米填料的長度約為20cm的毛細管色譜柱。對于裝填這類毛細管色譜柱，目前常用的氣壓-勻漿裝柱技術(一般采用氮氣鋼瓶提供壓力，壓力不超過25MPa)不能滿足要求，為此研宄人員發展了一種毛細管色譜柱裝填裝置勻漿罐，采用高壓勻漿法實現毛細管色譜柱高效快速地裝填。采用中國專利(張祥民和關霞，毛細管液相色譜柱裝填裝置勻漿罐，2011，CN 201886008 U)這種裝置和方法一次僅能裝填一根毛細管色譜柱，裝柱效率低，不能滿足毛細管高效液相色譜與質譜聯用技術快速發展和使用的需求；另外，不同時間裝填的毛細管色譜柱，其性能穩定性不易保證。
【發明內容】
[0003]本發明的目的是提供一種多通道勻漿裝填毛細管色譜柱的裝置，本發明科實現對多個毛細管色譜柱進行同時裝填，具有高的裝填效率；同時裝填的毛細管色譜柱的穩定性好。
[0004]本發明提供的多通道勻漿裝填毛細管色譜柱的裝置，它包括勻漿罐體、勻漿罐蓋、連接管和二個以上毛細管色譜柱套管；
[0005]所述勻漿罐體的內腔形成勻漿液腔體；
[0006]所述勻漿罐體的頂部開口處設有勻漿罐蓋；
[0007]所述連接管連接在所述勻漿罐蓋上并穿過所述勻漿罐蓋與所述勻漿液腔體相連通；
[0008]所述二個以上毛細管色譜柱套管均設在所述勻漿罐體的側壁上并穿過所述勻漿罐體的側壁上的陰性孔與所述勻漿液腔體相連通。
[0009]上述的裝置，所述勻漿罐體呈正六方體型，采用不銹鋼材料制成，具體可設為其高為39mm，平行平面間距為54mm。
[0010]上述的裝置，所述勻漿罐體的6個側壁上各設有I個所述毛細管色譜柱套管，所述毛細管色譜柱套管中連接與相配套的毛細管色譜柱，能同時通過6個通路進行6個毛細管色譜柱的裝填。
[0011]上述的裝置，所述勻漿液腔體呈圓柱體形，具體可設為高為18mm，直徑為12mm，體積為2mL ；
[0012]所述勻漿液腔體內設有至少I個磁子。
[0013]上述的裝置，所述連接管采用不銹鋼或工程塑料管制成；
[0014]所述連接管的耐受的壓力不小于6000Psi，以耐受所述連接管另一端外接的高壓色譜泵的不小于6000Psi的壓力；
[0015]所述勻漿罐蓋頂部開口處與所述勻漿罐蓋通過固定螺母I相連接。
[0016]上述的裝置，所述勻漿罐蓋采用不銹鋼材料制成；
[0017]所述勻漿罐蓋與所述勻漿罐體之間設有密封墊，以使所述勻漿罐腔體內密封性增強。
[0018]上述的裝置，所述密封墊采用聚四氟乙烯制成，所述密封墊呈圓形。
[0019]上述的裝置，所述毛細管色譜柱套管采用工程塑料制成；
[0020]所述毛細管色譜柱套管與與之相配套的毛細管色譜柱的毛細管之間采用過盈配合，以方便毛細管色譜柱順利的裝入所述毛細管色譜柱套管中，并使毛細管色譜柱不脫落。
[0021]上述的裝置，所述二個以上毛細管色譜柱套管均與所述勻漿罐體的側壁通過固定螺母II相連接，所述二個以上毛細管色譜柱套管與所述固定螺母II之間均設有錐形墊圈(采用不銹鋼或工程塑料制成)，使用時將毛細管色譜柱中的毛細管插入到所述毛細管色譜柱套管內，所述毛細管色譜柱的接頭與所述錐形墊圈卡緊，再將所述固定螺母II固定所述毛細管色譜柱套管；
[0022]所述毛細管色譜柱套管穿過的所述陰性孔設有與之相匹配的堵頭，當使用時，其中所述毛細管色譜柱套管沒有連接毛細管色譜柱，則將所述毛細管色譜柱套管和與之相對應的所述固定螺母II拆下，將所述陰性孔用所述堵頭封閉，保持勻漿液腔體密閉性以保證毛細管色譜裝柱正常進行。
[0023]本發明還提供了上述的裝置的使用方法，包括如下步驟:1)選取裝填的所述二個以上毛細管色譜柱空管，并將其分別固定于所述勻漿罐體側壁上的所述毛細管色譜柱套管上，將未安裝所述毛細管色譜柱空管的所述陰性孔用所述堵頭封閉；2)將裝填的色譜填料，用勻漿試劑將其配置成勻漿液并轉移到所述勻漿液腔體中；3)放入所述磁子，裝上所述勻漿罐蓋后，將所述勻漿罐體放在磁攪拌器上，調節磁子轉速到適當大小對勻漿液進行攪拌；4)通過所述連接管將所述勻漿液腔體與高壓色譜泵連接后，打開所述高壓色譜泵電源開關，調節流動相的流速，流動相攜帶所述色譜填料進入所述毛細管色譜柱，將所述毛細管色譜柱裝填到需要的長度后，關閉所述高壓色譜泵，使裝填系統壓力與大氣壓平衡后，卸下所述毛細管色譜柱，即得到裝填色譜填料的毛細管色譜柱。
[0024]本發明中，所述色譜填料為粒徑小于5微米的球形色譜填料，所述勻漿試劑可為水、甲醇、乙醇和乙腈氯仿中的至少I種，所述勻漿試劑與所述色譜填料性質兼容；
[0025]毛細管色譜柱裝填完成后，需對裝填的毛細管色譜柱進行性能評價，達到性能指標即可用于對實際樣品的分離和使用。
[0026]本發明具有以下優點:
[0027]I)可同時實現對多個毛細管色譜柱的裝填，具有高的裝填效率；
[0028]2)可有效解決不同時間裝填色譜柱帶來的穩定性差的問題；
[0029]3)兼具了每次僅裝填一個毛細管色譜柱裝置的功能，且沒有增加額外的費用；
[0030]4)與每次僅裝填一個毛細管色譜柱裝置的裝填方法相同，易于掌握和推廣使用。
【附圖說明】
[0031]圖1為本發明多通道勻漿裝填毛細管色譜柱的裝置的結構示意圖。
[0032]圖2是圖1的剖面結構示意圖；
[0033]圖3是使用本發明裝填的I個毛細管色譜柱連續上樣6次基峰總離子流色譜圖。
[0034]圖4是使用本發明一次裝填的6個毛細管色譜柱柱效評價的基峰總離子流色譜圖。
[0035]圖5是使用本發明兩次裝填的12個毛細管色譜柱柱效評價的基峰總離子流色譜圖。
[0036]圖6是使用本發明一次裝填的6個毛細管色譜柱與一次裝填I個毛細管色譜柱柱效評價的基峰總離子流色譜圖。
[0037]圖中標記如下:
[0038]I勻漿罐體，2勻漿罐蓋，3連接管，4固定螺母I，5固定螺母II，6毛細管空色譜柱套管，7勻漿液腔體，8磁子。
【具體實施方式】
[0039]下面結合附圖對本發明進行進一步說明，但本發明并不局限于以下實施例。
[0040]如圖1和圖2所示，為本發明提供的多通道勻漿裝填毛細管色譜柱的裝置的結構示意圖，它包括勻漿罐體1、勻漿罐蓋2和連接管3和6個毛細管色譜柱套管。勻漿罐體I的內腔形成勻漿液腔體7，勻漿液腔體7呈圓柱體形，高為18mm，直徑為12mm，體積為2mL，其內設有磁子8 (即工程塑料包埋的鐵棒)，于勻漿罐體I的頂部開口處設有勻漿罐蓋2 (采用不銹鋼材料制成)。勻漿罐蓋2與勻漿罐體I之間設有聚四氟乙烯的圓形密封墊(圖中未標)，以增強勻漿罐腔體7內的密封性；勻漿