一類氨基酸分子組合作為胃癌標志物的用圖
【技術領域】
[0001] 本發明生物檢測技術領域，具體涉及一類氨基酸分子組合作為胃癌標志物的用 途。
【背景技術】
[0002] 胃癌作為全球最常見的第二大惡性腫瘤，也是我國最常見的惡性腫瘤之一，占消 化道惡性腫瘤死亡原因的第一位。我國胃癌的發病率約為20/10萬，每年新發胃癌患者40 萬人，死亡人數30萬人，且青年人患胃癌的比例在增加，15%患者為40歲以下年輕人。大多 數胃癌患者多伴有非特異性上消化道不適癥狀，故對有癥狀的人群進行大規模篩查才能提 高胃癌的檢出率，提高篩查效率。然而有研究提示即使在日本其早期胃癌發現率在40%，僅 少部分為利用纖維胃鏡和放射學檢查的大規模篩選時發現，目前絕大多數醫院主要依賴于 X線，B型超聲、內窺鏡檢查以及活組織病理學檢查等對腫瘤進行診斷。以上檢查有些對患 者創傷較大，對儀器設備要求高，難以用于大規模腫瘤檢查或健康體檢。
[0003] 而適用于大規模腫瘤檢測的胃癌最常用的血清腫瘤標記物主要有CA199、CA724 和癌胚抗原CEA等，可檢測到大約15~50%的任何階段的胃癌，對于早期胃癌的檢測率則 降至大約2~11%。這些標志物存在靈敏度和特異度難以統一等問題，難以成為理想的腫 瘤標記物而用于臨床檢測或大規模人群篩查。這現狀給腫瘤的早期分子檢測、療效及預后 評價、復發及轉移監測和生物治療等方面造成一定的困難因此。因此需要新的適用于大規 模篩選、非侵入性檢測的胃癌檢測標志物。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于提供一種適用于大規模篩選、非侵入性檢測的胃癌檢測標志 物，以克服現有臨床檢測腫瘤標記物如CA125、CA199、CA724、AFP、CEA等標志物存在靈敏度 和特異度難以統一等問題。
[0005] 為達此目的，本發明公開了一類氨基酸分子組合作為胃癌標志物在制備胃癌檢測 試劑盒中的用途，所述氨基酸分子組合為含丙氨酸、甘氨酸、纈氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、脯氨 酸、甲硫氨酸和酪氨酸的組合。
[0006] 在一些實施方式里，所述氨基酸分子組合為丙氨酸、甘氨酸、纈氨酸、絲氨酸、蘇氨 酸、脯氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸和色氨酸的組合。
[0007] 在一些實施方式里，所述氨基酸分子組合為丙氨酸、甘氨酸、纈氨酸、絲氨酸、異亮 氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸和色氨酸的組合。
[0008] 在一些實施方式里，所述胃癌檢測試劑盒所適用的檢測樣品為受檢者的尿液樣 本。
[0009] 在一些實施方式里，所述受試者為肝腎功能正常的人，以減少因肝腎功能異常導 致尿液目標分子含量波動，影響結果。
[0010] 在一些實施方式里，所述尿液樣品取自受試者清晨空腹中段尿液，以有利于檢測。 toon] 在一些實施方式里，所述胃癌為早期胃癌。
[0012] 在一些實施方式里，所述胃癌檢測試劑盒適用于色譜法、質譜法、色譜一質譜聯 用法、毛細管電泳法，其中色譜法為氣相色譜法（GC)、液相色譜法（IX)、高效液相色譜 法（HPLC)，色譜一質譜聯用法為氣相色譜一質譜聯用法（GC/MS)、液相色譜一質譜聯用 法（LC/MS)、高效液相色譜一質譜聯用法（HPLC/MS)、氣相色譜一串聯質譜聯用法（GC/ MS-MS)、液相色譜一串聯質譜聯用法（LC-MS/MS)、高效液相色譜一串聯質譜聯用法（HPLC/ MS-MS)。
[0013] 另一方面，本發明還公開了一類用于檢測診斷胃癌的生物標志物，其特征在于所 述生物標志物為一類氨基酸分子組合，為丙氨酸、甘氨酸、纈氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、 甲硫氨酸和酪氨酸的組合。
[0014] 在一些實施方式里，所述氨基酸分子組合為丙氨酸、甘氨酸、纈氨酸、絲氨酸、蘇氨 酸、脯氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸和色氨酸的組合。
[0015] 在一些實施方式里，所述氨基酸分子組合為丙氨酸、甘氨酸、纈氨酸、絲氨酸、異亮 氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、甲硫氨酸、酪氨酸和色氨酸的組合。
[0016] 另一方面，本發明還公開了一種胃癌檢測方法，其通過檢測方法對受檢者的尿液 樣本進行上述氨基酸分子組合的定量檢測，當受試者所述生物標志物含量高于上述生物標 志物的診斷實驗臨界值時，受試者即可被診斷為胃癌患者。
[0017] 在一些實施方式里，當上述生物標記物質的診斷實驗臨界值分別為：丙氨酸 17. 548666ug/ml、甘氛酸 29. 763330ug/ml、纟顏氛酸 3. 564666ug/ml、絲氛酸 30. 145000ug/ ml、異亮氨酸 I. 750666ug/ml、蘇氨酸 7. 965666ug/ml、脯氨酸 0· 557333ug/ml、甲硫氨酸 I. 251000ug/ml、酪氨酸 7. 152999ug/ml、色氨酸 9. 665667ug/ml。
[0018] 在一些實施方式里，所述受試者為肝腎功能正常的人，以減少因胃腸功能異常導 致尿液目標分子含量波動，影響結果。
[0019] 在一些實施方式里，所述尿液樣品取自清晨空腹中段尿液，以有利于檢測。
[0020] 在一些實施方式里，所述檢測方法可選用色譜法、質譜法、色譜一質譜聯用法、毛 細管電泳法，其中色譜法為氣相色譜法、液相色譜法或高效液相色譜法，色譜一質譜聯用法 為氣相色譜一質譜聯用法（GC/MS)、液相色譜一質譜聯用法（LC/MS)、高效液相色譜一質譜 聯用法（HPLC/MS)、氣相色譜一串聯質譜聯用法（GC/MS-MS)、液相色譜一串聯質譜聯用法 (LC-MS/MS )、高效液相色譜一串聯質譜聯用法（HPLC/MS-MS )，優選氣相色譜一質譜法。
[0021] 在一些實施方式里，所述胃癌為早期胃癌。
[0022] 本發明所述氨基酸組合作為胃癌標志物，具有很好的靈敏度和特異性，操作簡單、 耗時少，同時本發明所采用檢測樣品為尿液，避免采用組織、血液樣品時帶給患者肉體痛 苦。因此，無論是從患者的依從性還是從檢測結果的正確率看，本發明所述氨基酸組合作為 胃癌標志物具有很好的臨床應用價值。
【附圖說明】
[0023] 圖1.各生物標記物混合標準品分離色譜圖。
[0024] 圖2.各生物標記物分子質譜圖。
[0025] 圖3.兩個樣品色譜圖面積對比。
[0026] 圖4.各生物標記物診斷胃癌ROC曲線。
[0027] 圖5.各生物標記物診斷早期胃癌ROC曲線。
[0028] 圖6. 10種氨基酸聯合檢測ROC曲線圖。
[0029] 圖7. 8種氨基酸聯合檢測ROC曲線圖。
[0030] 實施方式
[0031] 以下結合具體實施例，進一步闡明本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明 而不用于限制本發明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方