一種測定有機羧酸絕對含量的方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種測定有機羧酸絕對含量的方法，特別涉及一種通過液相色譜測定 硝酸氧化醇酮反應產物中有機羧酸絕對含量的方法。
【背景技術】
[0002] 有機羧酸是重要的化工原料，在化工、染料、食品及醫藥等領域有著廣泛的用途。 有機羧酸的分析在生產、生活許多領域的實際應用中非常重要。目前國內對有機羧酸絕對 含量分析通常采用分光光度法、氣相色譜法、離子色譜法、采用堿性標準溶液進行酸堿滴定 等方法。其中氣相色譜法（GC)測定有機酸時，常因酸的沸點較高、不易氣化而需要先對其 衍生再進行測定，方法比較繁瑣；離子色譜法（HPIC)是近來應用較多的測定植物體內有機 酸的方法，可以同時測定溶液中的有機酸根離子和無機陰離子，但大量無機陰離子的存在 通常增加了低含量有機酸的檢測難度；滴定法雖然操作簡單，但存在較大誤差，且不能對同 一樣品中的多種羧酸分別進行準確測定。目前國內還沒有一種專門針對含有多種有機羧酸 的樣品通過液相色譜一次進樣即可快速準確地同時得到其各自含量的檢測方法。因此建立 一種快速、準確、方便和經濟的檢測方法，有利于提高有機羧酸產品質量和降低生產成本。
[0003] 中國專利CN201210292901. 3公開了一種分光光度法測定水溶液中有機酸含量 的方法。中國專利CN201110028098. 8公開了 一種硫酸銅快速定量分析發酵液提取物中 長鏈二元酸含量的方法，該方法通過樣品處理后利用比色法檢測上清液吸光值，根據長鏈 二元酸含量與吸光值成線性關系計算出發酵液提取物中長鏈二元酸含量，只能對長鏈二 元酸總含量進行分析，不能確定各種組分的各自含量。中國專利CN201110070282.9公 開了 一種氣相色譜法對空氣中己二酸含量的測定方法。中國專利CN201210283199. 4公 開了一種氣相色譜內標法測定丙酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯和丙酸含量的方法。中國專利 CN201210037343. 6公開了一種醋酸銅氨液中乙酸含量的測定方法及測定裝置，該方法以酚 酞為指示劑，用氫氧化鈉標準溶液滴定以此計算乙酸含量。這些方法針對有機羧酸總量或 單一有機羧酸進行分析，樣品處理繁瑣。
[0004] 中國專利CN200810018215. 0公開了一種液相色譜測定順酐生產過程中離心廢水 的有機酸及酯的方法。該方法是以水、甲醇、乙酸乙酯按一定的比例混合作為流動相，針對 順酐生產過程中離心廢水的有機酸及酯的測定方法。中國專利CN201010581633. 8公開了 一種檢測尿液中戊二酸含量的方法，進行液相-質譜分析確定尿液中戊二酸含量。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的是提供一種測定有機羧酸絕對含量的方法，克服有機羧酸在其他儀 器中響應值不高導致檢出偏差較大的缺陷，通過適合的樣品配置方法和最佳液相色譜條件 而提供一種用外標法同時定量分析多種有機羧酸絕對含量的方法。
[0006] 本發明所述的測定有機羧酸絕對含量的方法，包括以下步驟：
[0007] ( 1)標準樣品溶液的配制
[0008] 分別準確稱取一定質量的冰乙酸、丙酸、丁二酸、戊二酸、己二酸和硝酸，用去離子 水溶解于100mL容量瓶中，搖勻作為標準溶液1，再用同樣方法分別準確稱取另一不同質量 的各物質配成不同濃度的標準溶液2和標準溶液3,標準溶液中上述各種物質濃度范圍為 0·05 ~20mg/ml。
[0009] (2)標準工作曲線繪制
[0010] 該方法以安捷倫液相色譜柱Agilent ZORBAX SB-Aq (4. 6*250mm，5 μ m，適用于有 機酸的分析）為分析柱，水、甲醇作為色譜柱沖洗的流動相，pH為2. 5的磷酸水溶液作為樣 品測試時的流動相，流速I. 2mL/min，柱溫40°C，紫外檢測器檢測波長210nm，進樣量5 μ L， 運行時間25min，外標法定量對上述所配制的標準溶液進行液相色譜分析，測得各峰的峰面 積，用峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標分別繪制冰乙酸、丙酸、丁二酸、戊二酸、己二酸等的 標準曲線，得到相應各物質濃度與峰面積的線性方程式以及線性相關系數。
[0011] (3)實際樣品測定分析
[0012] 將待測樣品混合均勻，準確稱取1~2g置于100mL容量瓶中，用去離子水溶解并 定容，搖勻后過濾，取1~2ml該溶液置于安捷倫液相色譜分析專用的樣品瓶中，搖勻，制成 樣品溶液，放置于液相色譜分析自動進樣盤中備用；以安捷倫液相色譜柱Agilent ZORBAX SB-Aq (4. 6*250mm，5 μ m，適用于有機酸的分析）為分析柱，水、甲醇作為色譜柱沖洗的流動 相，pH為2. 5的磷酸水溶液作為樣品測試時的流動相，流速I. 2mL/min，柱溫40°C，紫外檢 測器檢測波長210nm，進樣量5 μ L，運行時間25min，對制備的樣品溶液進行液相色譜分析， 測得各組分的峰面積，根據峰面積直接由上述相應各組分對應的標準曲線上查得或由線性 方程式計算各組分濃度，再通過下面的公式計算各組分含量：
[0013] 計算公式：Wi% = (10Ci/m) %
[0014] 式中：Ci一待測組分的濃度，mg/ml ;
[0015] Wi%-待測組分的含量；
[0016] m-稱取的樣品質量，g。
[0017] 根據待測樣品所含有機羧酸的組成選擇不同的有機羧酸進行標準樣品溶液的配 置，標準樣品溶液為含有冰乙酸、丙酸、丁二酸、戊二酸、己二酸有機羧酸中的一種或多種。
[0018] 標準樣品溶液配置時加入硝酸，可使固體類有機羧酸溶解于去離子水中后穩定存 在。
[0019] 待測樣品為硝酸氧化醇酮反應產物或其它含有有機羧酸的樣品，含有冰乙酸、丙 酸、丁二酸、戊二酸、己二酸等有機羧酸中的一種或多種。
[0020] 待測樣品若為易溶于水的固體或液體或固體液體混合物，可直接配置成待測樣品 水溶液，待測樣品若為非易溶于水的樣品要進行處理，使待測樣品中的羧酸組分溶解于去 離子水中配置成待測樣品水溶液。
[0021] 在同一液相色譜分析條件下，僅需進樣一次，即能同時得到冰乙酸、丙酸、丁二酸、 戊二酸、己二酸有機羧酸中的一種或多種的絕對含量。
[0022] 采用液相色譜柱Agilent ZORBAX SB-Aq (4· 6*250_，5μπι，適用于有機酸的分 析）為分析柱，水、甲醇作為色譜柱沖洗的流動相，pH為2. 5的磷酸水溶液作為樣品測試時 的流動相，流速I. 2mL/min，柱溫40°C，紫外檢測器檢測波長210nm，