一種快速制備單細胞懸液的過濾器的制作方法

本發明涉及一種快速制備單細胞懸液的過濾器，屬于免疫研究技術領域。

背景技術：

流式細胞技術（flow cytometry，FCM）是利用流式細胞儀進行的一種單細胞定量分析和分選技術。流式細胞術是單克隆抗體及免疫細胞化學技術、激光和電子計算機科學等高度發展及綜合利用的高技術產物。流式細胞術工作原理是在細胞分子水平上通過單克隆抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個細胞，并能同時從一個細胞中測得多個參數，具有速度快、精度高、準確性好的優點，是當代最先進的細胞定量分析技術之一。

流式細胞分選術指樣品管中經熒光染料染色或標記的單細胞懸液，經高壓壓進入流動室內。流動室充滿鞘液，單細胞懸液在鞘液的包裹及推動下，細胞被排成單個細胞列，以一定速度從流動室噴嘴噴出。在流動室的噴嘴上配有一個超高頻的壓電晶體，充電后可發生振動，使噴出的液流按照一定頻率斷裂為一個個均勻的液滴，待測的單個細胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以不同的電荷，當液滴流通過帶有幾千伏電壓的偏轉板時，在高壓電場作用下發生偏轉，落入各自的收集容器里，沒有被充電的液滴則落入中間的廢液缸，從而實現細胞的分離。

流式細胞術及流式細胞分選都是針對單個細胞進行的分析及分選過程，且流式細胞儀為高精密度高通量儀器，對樣品制備的要求較為嚴格，故無論是利用流式細胞術進行分析，還是利用流式細胞術進行細胞的分選，都是基于單個細胞進行的，所以單細胞懸液的制備對實驗的進行都起到至關重要的影響。

流式細胞術上機前，需要將上機樣品進行過濾，以制備單細胞混懸液，尤其是進行流式細胞術分選細胞時，成團的細胞會堵塞噴嘴使儀器無法正常運行，甚至會對儀器造成一定的損害。而現有樣品過濾方法主要為手工將濾膜套于兩個tip頭之間，在通過移液槍配1mL tip頭將細胞懸液噴出，最后收集于流式上樣管，這么做不僅浪費tip頭，而且制備過程中耗時較長，濾過面積太小容易造成堵塞，細胞濾過率不高，對實驗效率也會有很大的影響。手工制備過程中濾膜容易污染，導致分選后的細胞也受到波及，無法進行后續實驗。本過濾器操作簡便，經濟便捷，可進行高壓消毒，過濾后的單細胞懸液可直接收集于1.5mL eppendorf管或流式管中，尤其適用于小體積（200μL~1mL）的單細胞懸液、尤其是原代細胞的單細胞懸液的制備，大大簡化了流式上機前樣品制備的步驟，縮短了流式細胞術實驗的時間，減少單細胞懸液制備過程中細胞的污染。

技術實現要素：

本發明的目的是為了解決現有流式上機前制備單細胞濾器的空缺、手工制備濾器的不便捷、細胞耗損大、細胞易污染、費時且浪費tip頭的問題，從而提供一種適用于小體積細胞懸液的快速、便捷地制備單細胞懸液的濾器。

本發明的技術方案：一種快速制備單細胞懸液的過濾器，包括tip頭插入孔、流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽、和濾膜；所述tip頭插入孔設置于流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽上方，流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽底部設有濾膜。

所述濾膜為尼龍濾膜。

所述濾膜過濾孔目數為300、400、500、700、800或1000目。

所述tip頭插入孔所插入的tip頭為1mL。

所述tip頭插入孔的直徑a為7mm，高度b為10mm；流式上樣管卡槽或1.5 mL eppendorf管卡槽的高度c為25mm；濾膜直徑d為10mm。

所述快速制備單細胞懸液的過濾器總高度e為35mm。

本發明的有益效果：本發明提供的過濾器操作簡便，經濟便捷，可存放于市面上大部分1mL tip盒并進行高壓消毒，過濾后的單細胞懸液可直接收集于1.5mL eppendorf管或流式管中，適用于小體積細胞懸液的制備，大大簡化了實驗步驟，縮短了實驗時間，極大減少了單細胞懸液制備過程中細胞污染。

附圖說明

圖1是本發明結構示意圖。

圖2是本發明使用示意圖。

附圖標記說明：1、tip頭插入孔；2、流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽；3、濾膜；A、1mL tip頭；B、1.5mL eppendorf管。

具體實施方式

如圖1所示：一種快速制備單細胞懸液的過濾器，包括tip頭插入孔1、流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽2、濾膜3；所述tip頭插入孔1設置于流式上樣管卡槽或1.5 mL eppendorf管卡槽2上方，流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽2底部設有濾膜3。

所述濾膜3為尼龍濾膜。所述濾膜3過濾孔目數為300、400、500、700、800或1000目。

所述tip頭插入孔1所插入的tip頭為1mL。

所述tip頭插入孔1的直徑a為7mm，高度b為10mm；流式上樣管卡槽或1.5mL eppendorf管卡槽2的高度c為25mm；濾膜3直徑d為10mm。

所述快速制備單細胞懸液的過濾器總高度e為75mm。

本發明使用時，具體如圖2所示，先用1mL移液槍配1mL tip頭A將待測細胞懸液吸起，將本過濾器置于流式上樣管或1.5mL eppendorf管上，把吸有細胞懸液的tip頭插入本過濾器的tip頭插入孔，通過按壓移液槍使細胞懸液從tip頭中噴出，經過本過濾器濾膜最后收集于流式上樣管或1.5mL eppendorf管，即可直接上機或進行后續培養。