本發明涉及穩定同位素技術領域，更具體地說，涉及頭足類眼鏡晶體中穩定同位素測定前處理方法。
背景技術：
穩定同位素技術是自原子核的質子和中子被發現后逐漸興起的新型應用技術，穩定同位素原子核穩定，其化學性質也相對比較穩定，國內外諸多學者采用穩定同位素技術對海洋植物、海洋魚類以及海洋哺乳動物進行了研究，對其在生態系統中的地位有了更深入的了解，δ13c和δ15n可用于追蹤有機體中的如碳水化合物、蛋白質等有機物的含量，高級消費者相對與低級消費者有更高的15n值（平均高于2.5-3.4‰），因此δ15n值常常被用來指示該物種在生態系統中的營養位置（trophicposition），而δ13c在食物鏈中的含量較低，因此常被用來表示營養關系中的初始來源，在海洋生態系統中，δ13c主要可以表示浮游生物分布所處緯度的高低，同時可以指示所攝入的食物是來自遠洋還是近岸，是營浮游生還是底棲生活，頭足類的穩定同位素研究始于2000年，頭足類作為捕食者，其體內有大量的碳（c）、氮（n）等穩定同位素，頭足類眼睛晶體是穩定同位素積累的優良載體，因此對頭足類眼睛晶體中穩定同位素的檢測尤為重要，樣品檢測需要進行前處理后再進入檢測儀器，前處理的使用方法對測定結果的準確度、精確度影響顯著，目前國內外并沒有專門針對眼睛晶體中穩定同位素測定的前處理方法。
本方法提供一種頭足類眼睛晶體中穩定同位素測定的前處理方法，為穩定同位素測定研究提供了一個新方法。
技術實現要素：
1．要解決的技術問題
針對現有技術中存在的問題，本發明的目的在于提供頭足類眼鏡晶體中穩定同位素測定前處理方法，該方法簡化了操作程序，降低環境干擾，提高了穩定同位素測定的精確度和準確度。
2．技術方案
為解決上述問題，本發明采用如下的技術方案。
頭足類眼鏡晶體中穩定同位素測定前處理方法，其步驟如下：
（1）用手術刀劃破眼球，用鑷子取出晶體，去除晶體的外膜，保留晶體核；
（2）將晶體核浸泡在蒸餾水中10分鐘，使其充分吸水；
（3）在游標卡尺上測量所述步驟（2）中處理過的晶體核的直徑；
（4）在體式顯微鏡下，用解剖針、解剖刀、尖頭鑷子和寬頭鑷子由晶體最外層向晶體核心剝離0.5±0.05mm寬的晶體；
（5）在游標卡尺上測量所述步驟（4）中剝離0.5±0.05mm寬的晶體后剩余晶體的直徑，并記錄；
（6）重復以上所述步驟（4）和步驟（5）的過程，直至晶體核心部分直徑為0.5±0.05mm或晶體核心部分直徑小于0.45mm，依據晶體大小的不同可得到不同斷面的晶體樣品；
（7）使用超聲波清洗器將所述步驟（6）中獲得的晶體樣品清洗10分鐘，去除晶體表面殘留的雜質，再用超純水沖洗；
（8）將清洗后的晶體樣品放入冷凍干燥機中進行冷凍干燥；
（9）取出冷凍干燥后的晶體樣品，分別使用混合型球磨機磨碎成粉末，放置在5ml的離心管中備用；
當進行同位素測定前處理時，剝離出眼球晶體核，進行充分吸水后，解剖為不同斷面的晶體樣品，再清洗清除殘留雜質后進行冷凍干燥，最后磨成粉末，放在離心管備用，步驟簡單，簡化了操作程序，降低環境干擾，提高了穩定同位素測定的精確度和準確度。
優選地，所述游標卡尺的測量范圍為0-200mm，測量精度為0.01mm。
優選地，所述冷凍干燥機的溫度設定在-55℃，-55℃低溫使晶體樣品中微生物失去活性，減少對同位素測定的影響。
優選地，所述步驟（8）中冷凍干燥的時間為24小時-36小時，保證晶體樣品能被充分干燥。
3．有益效果
相比于現有技術，本發明的優點在于：
（1）本方案當進行同位素測定前處理時，剝離出眼球晶體核，進行充分吸水后，解剖為不同斷面的晶體樣品，再清洗清除殘留雜質后進行冷凍干燥，最后磨成粉末，放在離心管備用，步驟簡單，簡化了操作程序，降低環境干擾，提高了穩定同位素測定的精確度和準確度。
（2）冷凍干燥機的溫度設定在-55℃，-55℃低溫使晶體樣品中微生物失去活性，減少對同位素測定的影響。
（3）步驟（8）中冷凍干燥的時間為24小時-36小時，保證晶體樣品能被充分干燥。
附圖說明
圖1為本發明不同斷面晶體樣品的結構示意圖。
具體實施方式
下面將結合本發明實施例中的附圖；對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述；顯然；所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例；而不是全部的實施例。基于本發明中的實施例；本領域普通技術人員在沒有做出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例；都屬于本發明保護的范圍。
實施例1：
請參閱圖1，頭足類眼鏡晶體中穩定同位素測定前處理方法，莖柔魚隸屬柔魚科，是頭足類中一種重要的經濟物種，將莖柔魚清洗干凈，固定頭部，用手術刀劃破眼球，用鑷子取出晶體，放入5ml離心管中保存，實驗時取出晶體，去除晶體的外膜，保留晶體核；將晶體核浸泡在蒸餾水中10分鐘，使其充分吸水；在游標卡尺上測量處理過的晶體核的直徑；在體式顯微鏡下，用解剖針、解剖刀、尖頭鑷子、寬頭鑷子由晶體最外層向晶體核心剝離0.5mm左右寬的晶體；在游標卡尺上測量剝離晶體后剩余晶體的直徑；一層一層剝，直至晶體核心部分直徑約為0.5mm，依據晶體大小的不同可得若干個晶體不同斷面的晶體樣品；使用超聲波清洗器剝離晶體清洗10分鐘，去除晶體表面殘留的雜質，再用超純水沖洗；然后分別放入冷凍干燥機，在-55℃的環境下對樣品進行冷凍干燥，至少24小時；取出冷凍干燥后的晶體，使用混合型球磨機磨碎成粉末，放置5ml離心管中備用。
實施例2：
請參閱圖1，頭足類眼鏡晶體中穩定同位素測定前處理方法，在我國近海，頭足類區系組成復雜，種類繁多，目前主要的經濟種類是中國槍烏賊，將中國槍烏賊清洗干凈，固定頭部，用手術刀劃破眼球，用鑷子取出晶體，放入5ml離心管中保存，實驗時取出晶體，去除晶體的外膜，保留晶體核；將晶體核浸泡在蒸餾水中10分鐘，使其充分吸水；在游標卡尺上測量處理過的晶體核的直徑；在體式顯微鏡下，用解剖針、解剖刀、尖頭鑷子、寬頭鑷子由晶體最外層向晶體核心剝離0.5mm左右寬的晶體；在游標卡尺上測量剝離晶體后剩余晶體的直徑；一層一層剝，直至晶體核心部分直徑約為0.5mm，依據晶體大小的不同可得若干個晶體不同斷面的晶體樣品；使用超聲波清洗器剝離晶體清洗10分鐘，去除晶體表面殘留的雜質，再用超純水沖洗；然后放入冷凍干燥機，在-55℃的環境下對樣品進行冷凍干燥，至少24小時；取出冷凍干燥后的晶體，分別使用混合型球磨機磨碎成粉末，放置5ml離心管中備用。
當進行同位素測定前處理時，剝離出眼球晶體核，進行充分吸水后，解剖為不同斷面的晶體樣品，再清洗清除殘留雜質后進行冷凍干燥，最后分別磨成粉末，放在離心管備用，步驟簡單，簡化了操作程序，將不同斷面的晶體樣品冷凍干燥后分別磨成粉末，放在離心管備用，降低了環境干擾，提高了穩定同位素測定的精確度和準確度。
以上所述；僅為本發明較佳的具體實施方式；但本發明的保護范圍并不局限于此；任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明揭露的技術范圍內；根據本發明的技術方案及其改進構思加以等同替換或改變；都應涵蓋在本發明的保護范圍內。