本發明涉及生物細胞領域，涉及一種聚唾液酸的測定方法。
背景技術：
唾液酸是廣泛存在于生物系統中的一類天然糖類化合物，唾液酸類化合物在生命體許多重要的生物、生理過程中發揮著不可或缺的作用。聚唾液酸是唾液酸單體以α-2,8或α-2,9糖苷鍵連接起來的線性聚合物，是少數幾種細菌的胞外多糖組分。通過微生物發酵法可以大量生產聚唾液酸，聚唾液酸再經過水解后，分離純化可以得到唾液酸，再結合化學法和酶法可以轉化成為藥用價值很高的唾液酸類衍生物，因此，對其進行測定十分重要。
技術實現要素：
有鑒于此，本發明提供一種解決或部分解決上述問題的聚唾液酸的測定方法。
為達到上述技術方案的效果，本發明的技術方案為：一種聚唾液酸的測定方法，其特征在于，包含以下步驟：
首先進行R-試劑的配制，將間苯二酚0.2g溶解在10ml水中，并加入180ml濃鹽酸和0.38ml濃度為0.3mol/L的硫酸銅，去離子水定容到200ml。
接著光密度的繪制：分別吸取0、0.8ml、1.0ml、1.8ml的100mg/L的唾液酸溶液于試管中，加水至8.0ml，加入2.0mlR-試劑，沸水浴18分鐘，流水冷卻后加入8.0ml有機溶液，所述有機溶液由丁酸丁酯與正丁醇以45:5的比例混合，劇烈振蕩，將有機相轉入3cm的比色皿中，以水作對照試驗，在280nm處測光密度，得到唾液酸溶液的有機混合溶液；
最后進行樣品分析：所述唾液酸溶液的有機混合溶液經1000r/min以及8分鐘的離心，得到所述唾液酸溶液的上清液，吸取0.08-2.1ml所述唾液酸溶液的上清液于試管中，加水至8.0ml，加入2.0mlR-試劑，沸水浴18分鐘，流水冷卻后加入8.0ml有機溶液，所述有機溶液由丁酸丁酯與正丁醇以45:5的比例混合，劇烈振蕩，將有機相轉入3cm的比色皿中，以水作對照試驗，在280nm處測光密度，測得的光密度由標準曲線查算出所述唾液酸溶液的唾液酸量。
本發明的有益成果是：本發明利用實驗室前人的工藝將聚唾液溶液進行多種處理，最終得到的唾液酸溶液的光密度。
具體實施方式
為了使本發明所要解決的技術問題、技術方案及有益效果更加清楚明白，以下結合實施例，對本發明進行詳細的說明。應當說明的是，此處所描述的具體實施例僅用以解釋本發明，并不用于限定本發明，能實現同樣功能的產品屬于等同替換和改進，均包含在本發明的保護范圍之內。具體方法如下：
唾液酸(sialic acid,PSA)又稱燕窩酸，是中國傳統珍稀食品燕窩中具生物活性的主要成份，母乳中的唾液酸為嬰兒早期生長提供免疫力，提高腸道對于維生素及礦物質的吸收能力。唾液酸為神經氨酸，廣泛存在于動物組織及微生物中，是細胞膜蛋白的重要組成部分，參與細胞表面多種生理功能，在調節人體生理、生化功能方面起到非常重要的作用。唾液酸近年來才在國際上被系統地研究，科學家已經發現其具有許多重要的生物學功能性。由于唾液酸在通過消化系統時不會被消化道酶降解，可通過消化道進入腸道阻止腸道致病菌及病毒與細胞的吸附，對抵抗多種病菌起重要作用。1957年，Blix等用較為溫和的水解方法，從頜下腺粘蛋白中分離出與Bial’s試劑反應呈紫色的物質，將其命名為唾液酸(Sialic acid)，這個名稱也用于后來發現的幾種物質。此后人們用溫和的水解方法從牛初乳、牛頜下腺粘蛋白和燕窩中相繼分離得到完整的可結晶的唾液酸。目前，唾液酸的國際市場的價格約50－100美元/克。聚唾液酸(polysialic acid,PSA)是唾液酸單體以α-2,8或α-2,9糖苷鍵連接起來的線性聚合物，分子量在20～60KDa，是一種鏈蛋白酶抗性的大分子。
1957年Barry和Goebel首先在Escherichia coli K-235和K-1中發現該聚合物，以后陸續在Neisseria miningitidis B,Salmonella toucra 048,Citrobacter freundii05中發現該物質。近年來，隨著對聚唾液酸理化性質、生理功能、合成與代謝等研究的深入，聚唾液酸在食品、醫學等領域的應用越來越廣泛
以上所述僅為本發明之較佳實施例，并非用以限定本發明的權利要求保護范圍。同時以上說明，對于相關技術領域的技術人員應可以理解及實施，因此其他基于本發明所揭示內容所完成的等同改變，均應包含在本權利要求書的涵蓋范圍內。
本發明的有益成果是：本發明利用實驗室前人的工藝將聚唾液溶液進行多種處理，最終得到的唾液酸溶液的光密度。