一種藥物中陽離子表面活性劑的分離檢測方法與流程

            文檔序號:12268234閱讀:617來源:國知局
            一種藥物中陽離子表面活性劑的分離檢測方法與流程

            本發(fā)明屬于分析測定領(lǐng)域,涉及一種分離檢測方法,尤其涉及一種藥物中陽離子表面活性劑的分離檢測方法。



            背景技術(shù):

            陽離子表面活性劑在水溶液中電離時生成的表面活性離子帶正電荷,其疏水基與陰離子表面活性劑相似。陽離子表面活性劑的親水基離子中含有氮原子,根據(jù)氮原子在分子中的位置不同分為胺鹽、季銨鹽和雜環(huán)型三類。

            季銨鹽陽離子表面活性劑水溶性好,既耐酸又耐堿且大多數(shù)具有殺菌作用。用季銨鹽陽離子表面活性劑可與許多物質(zhì)親和、吸附形成氫鍵,具有除濁、脫色、吸附和粘合等功能,適用于發(fā)酵制藥等行業(yè)中的純化工藝,應(yīng)用非常廣泛。

            玻璃酸鈉為一種原料藥,其工藝生產(chǎn)中使用十六烷基三甲基氯化銨(CTAC)這種季銨鹽類陽離子表面活性劑作為絡(luò)合劑,鑒于產(chǎn)品的使用安全性考慮,在產(chǎn)品中殘留量應(yīng)嚴(yán)格控制,因此如何實(shí)現(xiàn)對藥物中銨鹽陽離子表面活性劑等表面活性劑的分離和檢測是十分重要的。

            對于大多數(shù)銨鹽類陽離子表面活性劑因其具有不易揮發(fā)、極性強(qiáng)等特點(diǎn),通常采用液相色譜進(jìn)行定量分析,例如采用連接DAD檢測器(二極管陣列檢測器)的高效液相色譜方法進(jìn)行定量分析,但是如烷基銨鹽類陽離子表面活性劑沒有生色團(tuán),因此不能直接用常規(guī)的連接DAD檢測器或熒光檢測器的高效液相色譜儀器進(jìn)行分析。

            研究表明,采用連接電導(dǎo)檢測器的高效液相色譜分析方法可對沒有生色團(tuán)的烷基銨鹽類陽離子表面活性劑進(jìn)行定量檢測。如CN 102226796A公開了一種測定兩性表面活性劑中微量N,N-二甲基丙二胺的分析方法,該方法采用離子色譜法進(jìn)行分析,色譜檢測條件如下:色譜柱:陽離子色譜柱;流動相:由體積百分含量為70%~100%的無機(jī)酸或有機(jī)酸酸水溶液和體積百分含量為0%~30%的有機(jī)溶劑組成,所述無機(jī)酸或有機(jī)酸水溶液的摩爾濃度為1mmol/L~10mmol/L;檢測器:采用電導(dǎo)檢測器;流動相流速:0.5mL/min~1.5mL/min。

            另外通過加入有機(jī)試劑如二溴羧基苯基重氮氨基偶氮苯,在堿性介質(zhì)中與烷基銨鹽類陽離子表面活性劑發(fā)生締合顯色反應(yīng),然后通過分光光度法進(jìn)行分析也是一種檢測烷基銨鹽類陽離子表面活性劑的方法。

            然而,上述方法在存在干擾物質(zhì)時具有定性定量效果差的缺點(diǎn)。

            采用大氣壓電噴霧質(zhì)樸法(ESI/MS)連接高效液相色譜進(jìn)行分析,根據(jù)質(zhì)譜提供的分子量信息對其結(jié)構(gòu)及組成進(jìn)行定性,利用高效液相色譜進(jìn)行定量分析,可準(zhǔn)確定性和定量化兩種或多種混合表面活性劑,但此法所用檢測儀器價格昂貴,成本較高。

            并且,由于藥物中組成比較復(fù)雜,在對表面活性劑進(jìn)行分離測定時由于其他組分的干擾,很難做到對表面活性劑精確的分離和測定。

            因此,如何尋求一種可以有效測定藥物中陽離子表面活性劑,尤其是烷基銨鹽類陽離子表面活性劑,且成本小的方法是非常有必要的。



            技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

            針對現(xiàn)有陽離子表面活性劑分析測定方法中存在的定性定量效果差,且儀器價格昂貴,成本高,以及目前針對藥物中表面活性劑等物質(zhì)分離和測定困難等問題,本發(fā)明提供了一種藥物中陽離子表面活性劑的分離檢測方法。本發(fā)明所述分離檢測方法通過配置合理濃度的樣品溶液,調(diào)節(jié)氣相色譜儀的工作參數(shù),可以有效避免藥物中其他成分的干擾,精密度高,重復(fù)性好且成本低。

            為達(dá)此目的,本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:

            本發(fā)明提供了一種藥物中陽離子表面活性劑的分離檢測方法,所述方法包括以下步驟:

            (1)配制藥物樣品溶液;

            (2)將步驟(1)配制的藥物樣品溶液注入氣相色譜儀,采用如下條件對藥物樣品溶液中的陽離子表面活性劑進(jìn)行分離測定;

            所述色譜條件為:

            以氮?dú)鉃檩d氣,控制載氣流量為2mL/min~8mL/min,例如2mL/min、3mL/min、4mL/min、5mL/min、6mL/min、7mL/min或8mL/min等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用。

            氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為250℃~300℃,例如250℃、260℃、270℃、280℃、290℃或300℃等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用。

            氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度90℃~150℃下維持2min~5min,再以10℃/min~15℃/min的速率升溫至240℃~260℃,維持4min~7min。其中,起始溫度可為90℃、100℃、110℃、120℃、130℃、140℃或150℃等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用;起始溫度維持時間可為2min、3min、4min或5min等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用;升溫速率可為10℃/min、11℃/min、12℃/min、13℃/min、14℃/min或15℃/min等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用;升溫后的溫度可為240℃、245℃、250℃、255℃或260℃等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用;升溫后維持時間可為4min、5min、6min或7min等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用。

            FTD檢測器溫度為250℃~320℃,例如250℃、260℃、270℃、280℃、290℃、300℃、310℃或320℃等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用。

            本發(fā)明所述氣相色譜檢測分離方法中的色譜條件對于檢測結(jié)果起到?jīng)Q定性作用,其中載氣流量、氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度以及柱溫均需控制在一定的條件下,才可保證測試的準(zhǔn)確性。

            本發(fā)明中,所述載氣流量需控制在2mL/min~8mL/min內(nèi),若載氣流量過低,會使目標(biāo)峰保留時間較小,分離不完全,降低測試的準(zhǔn)確性;若載氣流量過高,會使目標(biāo)峰保留時間較大,檢測時間過長。

            所述進(jìn)樣口溫度需控制在250℃~300℃內(nèi),若進(jìn)樣口溫度過低,會使檢測信號強(qiáng)度小,測試的準(zhǔn)確性;若進(jìn)樣口溫度過高,會使毛細(xì)管柱端損壞。

            所述氣相色譜儀柱溫的起始溫度需控制在90℃~150℃內(nèi),過高會使目標(biāo)峰保留時間較小,分離不完全,降低測試的準(zhǔn)確性;過低會使目標(biāo)峰保留時間較大,檢測時間過長。同樣的,其檢測溫度也需控制在250℃~320℃內(nèi),過高會使毛細(xì)管柱端損壞;過低會使檢測信號強(qiáng)度小。

            以下作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,但不作為本發(fā)明提供的技術(shù)方案的限制,通過以下技術(shù)方案,可以更好的達(dá)到和實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的技術(shù)目的和有益效果。

            作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,所述藥物為發(fā)酵方法制得的原料藥及其制劑和/或合成方法制得的原料藥及其制劑,優(yōu)選為發(fā)酵法制得的原料藥及其制劑,進(jìn)一步優(yōu)選為玻璃酸鈉。

            優(yōu)選地,所述制劑為注射劑。

            作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,所述陽離子表面活性劑為烷基季銨鹽類陽離子表面活性劑。

            優(yōu)選地,所述烷基季銨鹽類陽離子表面活性劑為十二烷基三甲基氯化銨、十六烷基三甲基氯化銨或十八烷基三甲基氯化銨中任意一種或至少兩種的組合,所述組合典型但非限制性實(shí)例有:十二烷基三甲基氯化銨和十六烷基三甲基氯化銨的組合,十六烷基三甲基氯化銨和十八烷基三甲基氯化銨的組合,十二烷基三甲基氯化銨、十六烷基三甲基氯化銨和十八烷基三甲基氯化銨的組合等,優(yōu)選為十六烷基三甲基氯化銨。

            作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,步驟(1)所述配制藥物樣品溶液為:將藥物與稀釋劑混合制成藥物樣品濃度為3mg/mL~10mg/mL的藥物樣品溶液,例如3mg/mL、4mg/mL、5mg/mL、6mg/mL、7mg/mL、8mg/mL、9mg/mL或10mg/mL等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用,優(yōu)選為藥物樣品濃度為5mg/mL的藥物樣品溶液。

            本發(fā)明中,藥物樣品濃度也需控制在一定范圍內(nèi),若溶濃度過高,會使目標(biāo)峰響應(yīng)值過大而使其與相鄰雜質(zhì)分離不完全;若濃度過低會使目標(biāo)峰響應(yīng)值過小影響檢測準(zhǔn)確度。

            優(yōu)選地,所述稀釋劑為乙醇和水的混合物。

            優(yōu)選地,所述乙醇和水的混合物為體積比為(5~1):(1~5)的混合物,例如5:(1~5)、4:(1~5)、3:(1~5)、2:(1~5)或1:(1~5)等,又如(5~1):1、(5~1):2、(5~1):3、(5~1):4或(5~1):5等,更進(jìn)一步的可5:1、4:2、3:4、2:3、2:1或1:5等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用,優(yōu)選為體積比為1:1的混合物。

            作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,步驟(2)所述分離測定過程中氣相色譜儀中毛細(xì)管柱中的固定液為聚硅氧烷,優(yōu)選為甲基聚硅氧烷。

            作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,步驟(2)所述分離測定過程中氣相色譜儀中所通氫氣的流量為20mL/min~50mL/min,例如20mL/min、30mL/min、40mL/min或50mL/min等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用;所通空氣的流量為200mL/min~500mL/min,例如200mL/min、300mL/min、400mL/min或500mL/min等,但并不僅限于所列舉的數(shù)值,該數(shù)值范圍內(nèi)其他未列舉的數(shù)值同樣適用。

            作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,步驟(2)所述分離測定過程中色譜條件為:以氮?dú)鉃檩d氣;控制載氣流量為4mL/min~6mL/min;氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為275℃~285℃;氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度115℃~125℃下維持2min~3min,再以10℃/min~12℃/min的速率升溫至245℃~255℃,維持4min~5min。

            優(yōu)選地,步驟(2)所述分離測定過程中色譜條件為:以氮?dú)鉃檩d氣;控制載氣流量為5mL/min;氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為280℃;氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度120℃下維持2min,再以10℃/min的速率升溫至250℃,維持4min。

            本發(fā)明中分離測定過程中色譜條件對于檢測結(jié)果起到?jīng)Q定性作用,其又以上述測定條件下測得的結(jié)果更優(yōu)。

            作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,所述藥物為玻璃酸鈉時,其分離檢測方法包括以下步驟:

            (1’)配制玻璃酸鈉樣品溶液;

            (2’)將步驟(1’)配制的玻璃酸鈉樣品溶液注入氣相色譜儀,采用如下條件對玻璃酸鈉樣品溶液中的十六烷基三甲基氯化銨進(jìn)行分離測定;

            所述色譜條件為:

            毛細(xì)管柱中的固定液為甲基聚硅氧烷;

            以氮?dú)鉃檩d氣,控制載氣流量為5mL/min;

            氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為280℃;

            氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度120℃下維持2min,再以10℃/min的速率升溫至250℃,維持4min;

            FID檢測器的溫度為300℃,其所通氫氣的流量為30mL/min,所通空氣的流量為300mL/min。

            本發(fā)明對于藥物玻璃酸鈉中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定,以上述色譜條件進(jìn)行分離測定的結(jié)果最優(yōu)。

            作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,步驟(1’)所述配制藥物樣品溶液為:將藥物與稀釋劑混合制成藥物樣品濃度為5mg/mL的藥物樣品溶液。

            作為本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案,所述稀釋劑為乙醇和水以體積比為1:1組成的混合物。

            本發(fā)明所述分離檢測方法中所用氣相色譜儀中所用空白溶液為稀釋劑溶液,即為乙醇和水的混合物,所述乙醇和水的混合物為體積比為(5~1):(1~5)的混合物,優(yōu)選為體積比為1:1的混合物。

            氣相色譜儀中所用對照樣品溶液為陽離子表面活性劑溶于稀釋劑制得的溶液,其濃度為0.001mg/mL~0.01mg/mL,優(yōu)選為0.005mg/mL。

            與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有以下有益效果:

            本發(fā)明所述分離測試方法通過合理濃度的樣品溶液,優(yōu)化氣相色譜儀的工作參數(shù),可有效避免藥物中其他組成成分對于陽離子表面活性劑分離測試的干擾,進(jìn)而可以將陽離子表面活性劑有效的從藥物中分離出來,并準(zhǔn)確算出藥物中陽離子表面活性劑的含量,其回收率可達(dá)100%,精密度高,重復(fù)性好。且所用氣相色譜儀與其他測試儀器相比,價格低廉,成本更低。

            附圖說明

            圖1是本發(fā)明實(shí)施例1中線性測試色譜圖;

            圖2是本發(fā)明實(shí)施例1中線性測試的線性曲線。

            具體實(shí)施方式

            為更好地說明本發(fā)明,便于理解本發(fā)明的技術(shù)方案,下面對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明。但下述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明的簡易例子,并不代表或限制本發(fā)明的權(quán)利保護(hù)范圍,本發(fā)明保護(hù)范圍以權(quán)利要求書為準(zhǔn)。

            本發(fā)明具體實(shí)施例部分提供了一種藥物中陽離子表面活性劑的分離檢測方法,所述方法包括以下步驟:

            (1)配制藥物樣品溶液;

            (2)將步驟(1)配制的藥物樣品溶液注入氣相色譜儀,采用如下條件對藥物樣品溶液中的陽離子表面活性劑進(jìn)行分離測定;

            所述色譜條件為:

            以氮?dú)鉃檩d氣,控制載氣流量為2mL/min~8mL/min;

            氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為250℃~300℃;

            氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度90℃~150℃下維持2min~5min,再以10℃/min~15℃/min的速率升溫至240℃~260℃,維持4min~7min。

            FTD檢測器溫度為250℃~320℃。

            以下為本發(fā)明典型但非限制性實(shí)施例:

            實(shí)施例1:

            本實(shí)施例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的玻璃酸鈉及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法:

            本分離測定方法中所用空白溶液為稀釋劑,即乙醇與水以體積比50:50配制得到;

            所用對照品溶液的配制為:

            稱取十六烷基三甲基氯化銨25mg置于50mL容量瓶,加稀釋劑溶解并稀釋至刻度,搖勻,然后移取0.1mL置于另一個10ml容量瓶,用稀釋劑稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液。

            所用藥物樣品溶液為:

            取樣品約50mg,精密稱定,置于10mL容量瓶,加稀釋劑5mL,振蕩5分鐘,加稀釋劑稀釋至刻度,搖勻,靜置15min,取溶液離心15min,取上清溶液,作為藥物樣品溶液。

            將步驟配制的藥物樣品溶液注入氣相色譜儀,采用如下條件對藥物樣品溶液中的陽離子表面活性劑進(jìn)行分離測定;

            毛細(xì)管柱中的固定液為甲基聚硅氧烷;

            氮?dú)鉃檩d氣,控制載氣流量為5mL/min;

            氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為280℃;

            氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度120℃下維持2min,再以10℃/min的速率升溫至250℃,維持4min。

            FID檢測器的溫度為300℃,其所通氫氣的流量為30mL/min,所通空氣的流量為300mL/min。

            所用毛細(xì)管柱為Agilent 30m*0.32mm,0.5um;所述氣相色譜儀為Agilent7890A。

            分別精密量取1μL上述配制的空白溶液、對照品溶液和藥物樣品溶液,注入氣相色譜儀(儀器型號:Agilent7890A),并記錄色譜圖。

            以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量,結(jié)果詳見表1。

            表1:藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨含量檢測分析表

            注:NA表示不適用。

            從表1中可以看出,本方法能使對照品溶液和樣品溶液中的陽離子表面活性劑十六烷基三甲基氯化銨達(dá)到很好分離,并準(zhǔn)確計(jì)算出測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量,其回收率可達(dá)100%,精密度高,重復(fù)性良好。

            線性曲線測試:

            線性測試溶液的配制:稱取十六烷基三甲基氯化銨25mg置于50mL容量瓶,加稀釋劑溶解并稀釋至刻度,搖勻,然后分別從三個容量瓶中移取0.6mL、0.4mL、0.2mL、0.1mL、0.05mL和0.025mL分別置于10mL容量瓶,用稀釋劑稀釋至刻度,搖勻,作為6個不同濃度的對照品線性溶液。

            分別精密量取1μL上述配制的6個不同濃度的對照品線性溶液,注入氣相色譜儀,并采用上述氣相色譜條件,并記錄色譜圖(如圖1所示)。

            計(jì)算測得的峰面積,結(jié)果如表2所示。并根據(jù)測得的峰面積和實(shí)際濃度進(jìn)行線性分析,并繪制線性曲線(如圖2所示)。

            表2:線性測試數(shù)據(jù)結(jié)果表

            從表2以及圖1和圖2的結(jié)果可以看出,本發(fā)明提供的氣相色譜方法對樣品中陽離子表面活性劑十六烷基三甲基氯化銨的分離測定,在十六烷基三甲基氯化銨濃度為1.02~30.72ug/mL范圍內(nèi)與峰面積具有良好的線性關(guān)系。

            實(shí)施例2:

            本實(shí)施例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的玻璃酸鈉及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法:

            本分離測定方法中所用空白溶液為稀釋劑,即乙醇與水以體積比50:50配制得到;

            所用對照品溶液的配制為:

            稱取十六烷基三甲基氯化銨25mg置于50mL容量瓶,加稀釋劑溶解并稀釋至刻度,搖勻,然后移取0.1mL置于另一個10ml容量瓶,用稀釋劑稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液。

            所用藥物樣品溶液為:

            取樣品約50mg,精密稱定,置于10mL容量瓶,加稀釋劑5mL,振蕩5分鐘,加稀釋劑稀釋至刻度,搖勻,靜置15min,取溶液離心15min,取上清溶液,作為藥物樣品溶液。

            將步驟配制的藥物樣品溶液注入氣相色譜儀,采用如下條件對藥物樣品溶液中的陽離子表面活性劑進(jìn)行分離測定;

            毛細(xì)管柱中的固定液為聚硅氧烷;

            氮?dú)鉃檩d氣,控制載氣流量為4mL/min;

            氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為275℃;

            氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度115℃下維持3min,再以12℃/min的速率升溫至245℃,維持5min;

            FID檢測器的溫度為290℃,其所通氫氣的流量為25mL/min,所通空氣的流量為250mL/min。

            所用毛細(xì)管柱為Agilent 30m*0.32mm,0.5um;所述氣相色譜儀為Agilent7890A。

            分別精密量取1μL上述配制的空白溶液、對照品溶液和藥物樣品溶液,注入氣相色譜儀,并記錄色譜圖。

            以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量為0.00301%,其回收率可達(dá)100.3%,精密度高,重復(fù)性良好。

            實(shí)施例3:

            本實(shí)施例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十二烷基三甲基氯化銨的分離測定方法:

            所用對照品溶液的配制為:

            稱取十二烷基三甲基氯化銨25mg置于50mL容量瓶,加稀釋劑溶解并稀釋至刻度,搖勻,然后移取0.1mL置于另一個10ml容量瓶,用稀釋劑稀釋至刻度,搖勻,作為對照品溶液。

            所用藥物樣品溶液為:

            取樣品約50mg,精密稱定,置于10mL容量瓶,加稀釋劑5mL,振蕩5分鐘,加稀釋劑稀釋至刻度,搖勻,靜置15min,取溶液離心15min,取上清溶液,作為藥物樣品溶液。

            將步驟配制的藥物樣品溶液注入氣相色譜儀,采用如下條件對藥物樣品溶液中的陽離子表面活性劑進(jìn)行分離測定;

            毛細(xì)管柱中的固定液為聚硅氧烷;

            氮?dú)鉃檩d氣,控制載氣流量為6mL/min;

            氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為285℃;

            氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度125℃下維持4min,再以15℃/min的速率升溫至255℃,維持5min;

            FID檢測器的溫度為310℃,其所通氫氣的流量為35mL/min,所通空氣的流量為350mL/min。

            所用毛細(xì)管柱為Agilent 30m*0.32mm,0.5um;所述氣相色譜儀為Agilent 7890A。

            分別精密量取1μL上述配制的空白溶液、對照品溶液和藥物樣品溶液,注入氣相色譜儀,并記錄色譜圖。

            以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十二烷基三甲基氯化銨的含量為0.00303%,其回收率可達(dá)100.3%,精密度高,重復(fù)性良好。

            實(shí)施例4:

            本實(shí)施例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十八烷基三甲基氯化銨的分離測定方法,所述方法除了氣相色譜儀的條件為:毛細(xì)管柱中的固定液為甲基聚硅氧烷;

            氮?dú)鉃檩d氣,控制載氣流量為2mL/min;

            氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為250℃;

            氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度90℃下維持5min,再以10℃/min的速率升溫至240℃,維持7min。

            FID檢測器的溫度為250℃,其所通氫氣的流量為20mL/min,所通空氣的流量為200mL/min。

            所用毛細(xì)管柱為Agilent 30m*0.32mm,0.5um;所述氣相色譜儀為Agilent 7890A。

            其他過程均與實(shí)施例1中相同,以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十八烷基三甲基氯化銨的含量為0.00302%,其回收率可達(dá)100.7%,精密度高,重復(fù)性良好。

            實(shí)施例5:

            本實(shí)施例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法,所述方法除了氣相色譜儀的條件為:毛細(xì)管柱中的固定液為甲基聚硅氧烷;

            氮?dú)鉃檩d氣,控制載氣流量為8mL/min;

            氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為300℃;

            氣相色譜儀柱溫為:在起始溫度150℃下維持2min,再以10℃/min的速率升溫至260℃,維持4min;

            FID檢測器的溫度為320℃,其所通氫氣的流量為50mL/min,所通空氣的流量為500mL/min。

            其他過程均與實(shí)施例1中相同,以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量為0.00301%,其回收率可達(dá)100.3%,精密度高,重復(fù)性良好。

            對比例1:

            本對比例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法,所述方法除了氣相色譜儀的條件中載氣流量為15mL/min(>8mL/min)外,其他過程均與實(shí)施例1中相同,以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量為0.00415%,其準(zhǔn)確率僅為138.3%,精密度較差。

            對比例2:

            本對比例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法,所述方法除了氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為180℃(<250℃)外,其他過程均與實(shí)施例1中相同,以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量為0.00233%,其回收率僅為77.7%,精密度較差。

            對比例3:

            本對比例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法,所述方法除了氣相色譜儀進(jìn)樣口溫度為350℃(>300℃)外,其他過程均與實(shí)施例1中相同,以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量為0.00432%,其回收率僅為144.0%,精密度較差。

            對比例4:

            本對比例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法,所述方法除了氣相色譜儀柱溫起始溫度為60℃(<90℃)外,其他過程均與實(shí)施例1中相同,以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量為0.00227%,其回收率僅為75.7%,精密度較差。

            對比例5:

            本對比例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法,所述方法除了氣相色譜儀柱溫起始溫度為200℃(>150℃)外,其他過程均與實(shí)施例1中相同,以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量為0.00251%,其回收率僅為83.7%,精密度較差。

            對比例6:

            本對比例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法,所述方法除了氣相色譜儀柱溫終溫溫度為150℃(<240℃)外,其他過程均與實(shí)施例1中相同,以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量為0.00231%,其回收率僅為77.0%,精密度較差。

            對比例7:

            本對比例提供了一種發(fā)酵工藝生產(chǎn)的藥物及其制劑中十六烷基三甲基氯化銨的分離測定方法,所述方法除了氣相色譜儀柱溫終溫溫度為300℃(>260℃)外,其他過程均與實(shí)施例1中相同,以外標(biāo)法測定藥物樣品溶液中十六烷基三甲基氯化銨的含量為0.00219%,其回收率僅為73.0%,精密度較差。

            綜合實(shí)施例1-5和對比例1-6的結(jié)果可以看出,本發(fā)明所述分離測試方法通過合理濃度的樣品溶液,優(yōu)化氣相色譜儀的工作參數(shù),可有效避免藥物中其他組成成分對于陽離子表面活性劑分離測試的干擾,進(jìn)而可以將陽離子表面活性劑有效的從藥物中分離出來,并準(zhǔn)確算出藥物中陽離子表面活性劑的含量,其回收率可達(dá)100%,精密度高,重復(fù)性好。且所用氣相色譜儀與其他測試儀器相比,價格低廉,成本更低。

            申請人聲明,本發(fā)明通過上述實(shí)施例來說明本發(fā)明的詳細(xì)方法,但本發(fā)明并不局限于上述詳細(xì)方法,即不意味著本發(fā)明必須依賴上述詳細(xì)方法才能實(shí)施。所屬技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員應(yīng)該明了,對本發(fā)明的任何改進(jìn),對本發(fā)明產(chǎn)品各原料的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等,均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍和公開范圍之內(nèi)。

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