一種塑料材料中致敏芳香劑含量的測定方法與流程

本發(fā)明屬于生物檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種塑料材料尤其是塑料玩具中致敏芳香劑含量的測定方法。

背景技術(shù)：

芳香劑是最常見的致敏性物質(zhì)。當(dāng)皮膚接觸這些物質(zhì)時，會產(chǎn)生過敏并使皮膚變紅、水腫，甚至產(chǎn)生炎癥。過敏反應(yīng)無法治愈，只能治療這些癥狀。在歐洲約有2％的兒童對芳香劑過敏。只有避免皮膚接觸致敏性物質(zhì)，才能預(yù)防接觸性過敏。但是芳香劑在玩具等很多產(chǎn)品上使用，很多兒童都無法避免跟這些物質(zhì)接觸，所以應(yīng)嚴(yán)格控制芳香劑的使用。

歐洲議會正式通過2009/48/EC玩具安全指令，首次提出禁止玩具中使用55種過敏性芳香劑(含量不超過100mg/kg)，以及11種過敏性芳香劑含量超0.01％時需要進(jìn)行標(biāo)識。還明確提出玩具材料中的化學(xué)成分必須與歐盟關(guān)于危險品物質(zhì)分類、包裝和標(biāo)簽法規(guī)相一致。2012年4月，歐盟協(xié)調(diào)標(biāo)準(zhǔn)EN71-13《Safety of toys-Part 13:Olfactory board games,gustative board games,cosmetic kits and gustative kits》進(jìn)一步細(xì)化了香味劑的要求，將原來的66種受限物質(zhì)重新分類，劃分為40種禁用香味劑和26種限用香味劑，但是受限物質(zhì)總數(shù)和具體物質(zhì)沒有改變。

隨著玩具產(chǎn)業(yè)的突飛猛進(jìn)的發(fā)展，為兒童的生活帶來了許多的快樂，但同時也給兒童自身帶來了新的潛在危害。歐盟出臺的玩具安全新指令對中國玩具產(chǎn)品的出口提出了苛刻的要求，對于中國玩具產(chǎn)業(yè)出口產(chǎn)生影響。然而歐盟沒有發(fā)布玩具中芳香劑測定的方法標(biāo)準(zhǔn)，我國的國家標(biāo)準(zhǔn)和檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)也無相關(guān)的檢測標(biāo)準(zhǔn)。為應(yīng)對過敏性芳香劑的指令，本研究擬基于頂空和氣質(zhì)聯(lián)用等先進(jìn)技術(shù)，建立完整、準(zhǔn)確、快速的禁用致敏芳香劑和限用芳香劑的檢測方法，既能有效的對進(jìn)出口玩具中有害物質(zhì)進(jìn)行監(jiān)控，又能為我國玩具中芳香劑的使用提供可靠的風(fēng)險評估數(shù)據(jù)。

現(xiàn)今，有超過5000種不同芳香劑用在化妝品、家居用品、紡織品、鞋類及玩具中使用。歐盟沒有發(fā)布玩具中芳香劑測定的標(biāo)準(zhǔn)方法，我國的國家標(biāo)準(zhǔn)和檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)也無相關(guān)的檢測標(biāo)準(zhǔn)。此外，為了更好對消費(fèi)品中致敏芳香劑進(jìn)行可靠的風(fēng)險評估，監(jiān)控兒童對致敏芳香劑的暴露吸入水平，有必要了解致敏芳香劑向環(huán)境中的釋放情況。目前國內(nèi)該方面工作尚未開展，而國外有報道采用頂空-固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法(Solid-Phase Microextraction and Gas Chromatography–Mass Spectrometry)，如Gerd Knupp等人用該方法鑒定香水中12種芳香成份，F(xiàn).Bothe等人測定香味蠟燭、洗衣液、衣物軟化劑等家用品中的香油成份，Yong Chen 等人用SPME法測定洗發(fā)香波中的芳香化合物，Marcel ZHU研究了香皂中17種芳香成份的揮發(fā)過程，J.Pablo Lamas等研究表明，在嬰兒洗澡水中用頂空固相微萃取技術(shù)能夠檢測出致敏芳香劑。

目前國內(nèi)外很少有玩具中致敏芳香劑的相關(guān)研究，Ines Masuck等2010年報道的采用頂空-固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用方法對塑料玩具中24中致敏芳香劑釋放量進(jìn)行測定的研究，結(jié)果表明，釋放量的多少與釋放的環(huán)境溫度及玩具中所含致敏芳香劑的含量有直接關(guān)系，操作溫度越高、芳香劑含量越高，釋放量也越大。Ines Masuck等人的報道并未涉及到歐盟玩具指令2009/48/EC所包含的所有物質(zhì)，且所分析的玩具樣品，僅有PVC塑料材質(zhì)一種，并未能包含到市場銷售的香味玩具的所有材質(zhì)。國內(nèi)研究較早的機(jī)構(gòu)主要是中國檢驗檢疫科學(xué)研究院和上海出入境檢驗檢疫局，其主要研究包括：采用熱解吸-氣相色譜質(zhì)譜連用技術(shù)檢測布絨玩具中38種致敏性芳香劑，采用氣相色譜-離子阱質(zhì)譜連用測定玩具中21種芳香劑，采用高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測玩具中5種香豆素等，其檢測化合物數(shù)量與種類與歐盟的要求還有差距，其次，檢測基質(zhì)不全，方法提取較為復(fù)雜，再者，使用的儀器不是很普及，因此很有必要根據(jù)不同材質(zhì)建立一種簡單、快速、高通量、所使用檢測儀器在各實驗室普及的檢測方法。

發(fā)明人對2009/48/EC指令所涉及的致敏芳香劑測定方法進(jìn)行了全面研究，對不同材質(zhì)的香味玩具中致敏芳香劑提取凈化條件的研究，以及對玩具中致敏芳香劑釋放量的研究，在我國玩具檢測行業(yè)均亟待開展，建立完整、準(zhǔn)確、快速的致敏芳香劑的檢測方法，既能有效的對進(jìn)出口玩具中有害物質(zhì)進(jìn)行監(jiān)控，又能為我國玩具中芳香劑的使用提供可靠的風(fēng)險評估數(shù)據(jù)。此外，發(fā)明人還首次展開了香味筆中芳香劑檢測的研究。香味筆深受廣大中小學(xué)生甚至成人的喜歡，而目前國內(nèi)外并沒有任何相關(guān)研究，香味筆中的芳香劑問題未引起社會廣泛重視。研究發(fā)現(xiàn)，香味筆中存在致敏香味劑，對人體健康存在風(fēng)險。

本發(fā)明研究了53種化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)差異大的致敏性芳香劑，而且數(shù)量上非常多，涵蓋了目前國際上能夠獲得的致敏香味劑標(biāo)準(zhǔn)品，建立了一種多化合物的篩選和確證方法，主要應(yīng)用于針對塑料、紡織品材料基質(zhì)的玩具以及香味筆中的芳香劑檢測。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明首先涉及一種氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)的方法檢測塑料樣品中致敏芳香劑含量的方法。

所述的塑料樣品包括但不限于日常使用以丙烯腈-丁二烯-苯乙烯共聚物(ABS)、聚氯乙烯(PVC)和聚碳酸酯(PC)為原料的塑料制品，優(yōu)選為塑料玩具。

所述的致敏芳香劑如下表所示，共48種

所述的檢測塑料樣品中致敏芳香劑含量的檢測方法包括如下步驟，

(1)樣品前處理：塑料樣品經(jīng)四氫呋喃溶解，甲醇沉淀，上層清液過微孔有機(jī)濾膜；

(2)GC-MS測定樣品中48種致敏芳香劑的含量。

所述的樣品前處理步驟為：

(1)將塑料樣品用剪刀剪碎，再冷凍粉碎至粒徑不超過1mm的粉末；

(2)稱取0.2g樣品(精確至0.001g)于50mL具塞玻璃離心管中，加入5.0mL四氫呋喃后密封，渦旋混合均勻，振蕩5min，使樣品充分溶解；

(3)加入15mL甲醇，渦旋混合，在-5℃以8000r/min冷凍離心10min，取上層清液 經(jīng)0.22μm微孔有機(jī)濾膜過濾。

所述的GC-MS測定的步驟和參數(shù)為：

色譜柱：DB-17MS(30m×0.25mm×0.25μm)；

進(jìn)樣口溫度：250℃；

柱溫采用程序升溫：

(1)初溫45℃，保留2min，

(2)以8℃/min升至100℃，

(3)以10℃/min升至150℃，保持3min，

(4)以8℃/min升至200℃，保持5min，

(5)以10℃/min升至250℃，保持5min；

載氣：氦氣，純度≥99.999％，流速為1.0mL/min；

進(jìn)樣模式：分流進(jìn)樣，分流比為10：1；

進(jìn)樣量：1μL。

離子源(EI)溫度：230℃；

四極桿溫度：150℃；

色譜-質(zhì)譜接口溫度：280℃；

采集方式：選擇離子監(jiān)測(SIM)，溶劑延遲：2.8min。

附圖說明

圖1、致敏芳香劑的氣相色譜-質(zhì)譜總離子流圖(序號同表1)。

圖2、ABS基質(zhì)的添加回收氣相色譜-質(zhì)譜總離子流圖(2A：ABS材料樣品空白，2B：標(biāo)準(zhǔn)添加(10mg/kg))

圖3、塑料球樣品氣相色譜-質(zhì)譜圖(3A：塑料球陽性樣品色譜圖，3B：苯甲酸芐基酯標(biāo)準(zhǔn)，3C：樣品中苯甲酸芐基酯)。

具體實施方式

實施例1、塑料玩具中致敏芳香劑的檢測

檢測原理

含量測定：塑料樣品經(jīng)四氫呋喃溶解，甲醇沉淀，上層清液過0.22μm微孔有機(jī)濾膜，GC-MS測定。揮發(fā)量測定：將塑料樣品研磨成小顆粒，置于頂空瓶中，迅速密封，GC-MS測定。

儀器、試劑與材料

(1)主要儀器

Agilent 7890-5975C氣相色譜-質(zhì)譜儀(配EI離子源，美國Aglient Techlogies公司，配Combi-xt PAL多功能進(jìn)樣器，瑞士CTC公司，配自動頂空進(jìn)樣器，美國Aglient Techlogies公司)；

5810R型離心機(jī)(德國Eppendorf公司)；

SK5200H型臺式超聲波清洗器(上?？茖?dǎo)超聲儀器公司)；

HS-260型震蕩器(德國IKA公司)；

MS 3基本型旋渦混合器(德國IKA公司)；

SPEX 6850型液氮冷凍粉碎機(jī)(美國TKI科技公司)；

XS205天平(Mettler-Toledo公司)；

移液槍(10-100μL，20-200μL，100-1000μL，500-5000μL，Eppendorf公司)。

(2)主要試劑與材料

丙酮、二氯甲烷、四氫呋喃、甲醇(色譜純，德國Merck公司)；

無水乙醇(色譜純，天津科密歐化學(xué)試劑有限公司)；

致敏芳香劑標(biāo)準(zhǔn)品(具體情況見表1)，由德國Dr.Ehrenstorfer GmbH公司和美國Sigma-Aldrich公司提供，除土木香根油(Alanroot oil，97676-35-2)、氫化樅醇(Hydroabietyl alcohol，13393-93-6)、丙烯酸乙酯(Ethyl acrylate，140-88-5)、4-(4-甲氧基苯基)-3-丁烯-2-酮(4-(p-Methoxyphenyl)-3-butene-2-one，943-88-4)、芐醇(Benzyl alcohol，100-51-6)為1000mg/L標(biāo)準(zhǔn)溶液外，其余標(biāo)準(zhǔn)品均為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，純度均大于95.0％。

(3)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

1)分別準(zhǔn)確稱取適量各標(biāo)準(zhǔn)品，用丙酮配成濃度均為1000mg/L的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，于冰箱中-18℃下保存?zhèn)溆茫?/p>

2)準(zhǔn)確移取適量標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，用合適的溶劑如四氫呋喃/甲醇(體積比，1/3，下同)或者丙酮或者甲醇配成濃度為10mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，準(zhǔn)確移取該混合標(biāo)準(zhǔn)中間液，以合適的溶劑逐級稀釋，得到致敏芳香劑系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

3)用丙酮配制濃度為100mg/L的12種致敏芳香劑混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，該溶液用于制備陽性樣品。12種致敏芳香劑為丙烯酸乙酯(Ethyl acrylate)、反式-2-己烯醛(trans-2-Hexenal)、芳樟醇(Linalool)、2-辛炔酸甲酯(Methyl heptine carbonate)、4-叔丁基苯酚(4tert-Butylphenol)、丁香酚(Eugenol)、二氫香豆素(Dihydrocoumarin)、香豆素(Coumarin)、二苯胺(Diphenylamine)、α-戊基肉桂醛(Amyl cinnamal)、1-(4-甲氧苯基)-1-戊烯-3-酮(1-(p-Methoxyphenyl-1-penten-3-one)、肉桂酸芐酯(Benzyl cinnamate)。

陽性對照樣品制備

由于市售塑料玩具樣品中致敏芳香劑存在種類有限，含量各不相同，用這些陽性樣品優(yōu)化的實驗方法會出現(xiàn)不適用于幾十種致敏芳香劑含量分析的情況，因此，本研究根據(jù)致敏芳香劑限量的要求，制備了3種代表性塑料玩具材質(zhì)(ABS、PVC和PC)的陽性樣品，制備過程為：

(1)稱取一定量的ABS、PVC和PC塑料高分子材料，分別加入丙酮、四氫呋喃和二氯甲烷超聲使塑料樣品完全溶解；

(2)向該溶液中分別加入上述丙烯酸乙酯(Ethyl acrylate)等12種標(biāo)準(zhǔn)儲備液(涵蓋整個保留時間范圍內(nèi)的代表性物質(zhì))，攪拌或渦旋，使溶液混合均勻；將混合均勻的溶液倒入聚四氟乙烯盤中，置于通風(fēng)櫥，使有機(jī)溶劑揮發(fā)，析出塑料固體；

(3)將制得的塑料固體樣品取出，用不銹鋼剪刀剪碎，冷凍研磨粉碎后，即制得含丙烯酸乙酯(Ethyl acrylate)等12種致敏芳香劑的陽性樣品，該陽性樣品中12種致敏芳香劑添加量均為200mg/kg。

待測樣品前處理

(一)含量測定：

(1)將玩具樣品用剪刀剪碎，再冷凍粉碎至粒徑不超過1mm的粉末；

(2)稱取0.2g樣品(精確至0.001g)于50mL具塞玻璃離心管中，加入5.0mL四氫呋喃后密封，渦旋混合均勻，振蕩5min，使樣品充分溶解；

(3)加入15mL甲醇，渦旋混合，在-5℃以8000r/min冷凍離心10min，取上層清液經(jīng)0.22μm微孔有機(jī)濾膜過濾，GC-MS測定。

(二)揮發(fā)量測定：

(1)稱取0.1g樣品塑料樣品于頂空瓶中，在頂空溫度為23℃和40℃、平衡時間為60min條件下測定。

注釋：一般兒童會在室溫下玩玩具，極端情況比如洗澡時(最高40℃)玩玩具，因此本實驗選取了考察室溫操作條件(23℃)和極壞操作條件(40℃)下玩具中致敏性芳香劑的揮發(fā)情況。

GC-MS條件

色譜柱：DB-17MS(30m×0.25mm×0.25μm)；

進(jìn)樣口溫度：250℃；

柱溫采用程序升溫：

(1)初溫45℃，保留2min，

(2)以8℃/min升至100℃，

(3)以10℃/min升至150℃，保持3min，

(4)以8℃/min升至200℃，保持5min，

(5)以10℃/min升至250℃，保持5min；

載氣：氦氣，純度≥99.999％，流速為1.0mL/min；

進(jìn)樣模式：分流進(jìn)樣，分流比為10：1；

進(jìn)樣量：1μL。

離子源(EI)溫度：230℃；

四極桿溫度：150℃；

色譜-質(zhì)譜接口溫度：280℃；

采集方式：選擇離子監(jiān)測(SIM)，溶劑延遲：2.8min；

其他根據(jù)不同的致敏芳香劑優(yōu)化的定性或定量的質(zhì)譜條件見表1。

表1 致敏芳香劑測定方法的質(zhì)譜條件及CAS

色譜條件的優(yōu)化

致敏芳香劑種類繁多，使用氣相色譜進(jìn)行分析時，若儀器分析條件不合適，容易出現(xiàn)不同化合物色譜峰重合的情況，因此，須對氣相色譜分離條件進(jìn)行優(yōu)化。采用HP-5MS或DB-5 MS色譜柱進(jìn)行分析時，化合物出峰早，很多化合物分離不完全，且對于定性離子完全一致的同分異構(gòu)體7-甲基香豆素(7-Methylcoumarin)和6-甲基香豆素(6-Methylcoumarin)，其色譜峰完全重疊，無法分開，與文獻(xiàn)結(jié)果一致；而采用DB-Wax等極性柱時，由于其耐熱溫度為250℃-260℃，而水楊酸芐酯和肉桂酸芐酯(沸點為300℃)等化合物在這個色譜柱上出峰很晚，需要色譜柱長時間處于高溫狀態(tài)，這對色譜柱破壞很大，并會出現(xiàn)很多的柱流失；而選用DB-17MS色譜柱時，使用分流進(jìn)樣模式，各化合物峰形好，分離效果也良好，7-甲基香豆素和6-甲基香豆素能得到分離，因此，本方法選擇DB-17MS。程序升溫條件為：初溫45℃，保留2min，以8℃/min升至100℃，以10℃/min升至150℃，保持3min，再以8℃/min升至200℃，保持5min，最后以10℃/min升至250℃，保持5min。

質(zhì)譜條件的優(yōu)化

在上述色譜條件下，出現(xiàn)4對化合物保留時間接近，分別為：4-甲氧基苯酚(14.02min)和羥基香茅醛(14.08min)、2，4-二羥基-3-甲基苯甲醛(19.80min)和假紫羅酮(19.99min)、7-甲基香豆素(22.34min)和新鈴蘭醛(22.38min)、a-己基肉桂醛(23.25min)和4-(4-甲氧基苯基)-3-丁烯-2-酮(23.32min)，但通過選擇每對化合物中不重合的碎片離子進(jìn)行選擇離子定性定量分析，保證了SIM方式掃描時，每對化合物得到有效分離。按上述優(yōu)化條件，選擇電子轟擊離子源(EI)，采集模式為SCAN/SIM同時采集，對48種致敏芳香劑進(jìn)行分析，得到各化合物的保留時間和特征離子如表1所示，氣相色譜-質(zhì)譜總離子流圖如圖1。

溶解-沉淀法的優(yōu)化

溶劑的選擇

為了選擇最佳的溶劑，本研究分別測定了ABS、PVC和PC 3種陽性樣品被丙酮、二氯甲烷、四氫呋喃和乙醇溶解(或溶脹)后溶液中12種較有代表性的致敏芳香劑的實際含量，結(jié)果見表2，陽性樣品中12種致敏芳香劑的理論含量為200mg/kg。

表2 12種致敏芳香劑在不同溶劑下的溶解含量

Table 2-2 Recoveries in different extraction solvenst of 12 fragrance allergens

從表2可看出，出峰較早的2種化合物不論使用何種溶劑提取，在ABS、PVC、PC 3種材質(zhì)的陽性樣品中含量均很少，反式-2-己烯醛含量均低于添加量的20％，丙烯酸乙酯均未被檢出，這應(yīng)該是因為這2種化合物揮發(fā)性較強(qiáng)，在制作陽性樣品時揮發(fā)損失較多。

對ABS材質(zhì)樣品，檢測時發(fā)現(xiàn)，加入乙醇后，有很多固體物質(zhì)不能被溶解，加入其余3種溶劑后，樣品被溶解，丙酮溶解的樣品溶液為白色乳狀溶液，四氫呋喃和二氯甲烷溶解的樣品溶液為白色透明狀溶液；從表2中實際含量實驗發(fā)現(xiàn)，ABS陽性樣品經(jīng)丙酮、四氫呋喃和二氯甲烷溶解后，樣品中含有的大多數(shù)致敏芳香劑均釋放到溶液中，未被乙醇完全溶解的樣品中，僅50％左右含量的致敏芳香劑遷移到溶液中。此外，對于3種基質(zhì)，不同致敏芳香劑測定結(jié)果相差不大。

對PVC材質(zhì)樣品，檢測時發(fā)現(xiàn)，加入四氫呋喃后，溶液呈乳白色均一體系，加入其余3種溶劑后，除二氯甲烷能溶解部分PVC樣品外，丙酮和乙醇對PVC樣品只起到溶脹的作用；從表2的實際含量實驗數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，PVC樣品經(jīng)四氫呋喃溶解后，樣品中含有的大多數(shù)致敏芳香劑均完全釋放到溶液中，不能完全溶解PVC樣品的丙酮、二氯甲烷和乙醇溶解液中，有些致敏芳香劑大部分遷移到溶液中，如4-叔丁基苯酚、二苯胺、α-戊基肉桂醛等，但有些致敏芳香劑還主要存在于樣品中，如2-辛炔酸甲酯、二氫香豆素等致敏芳香劑。從表2還看出，同一種溶劑溶解同一PVC陽性樣品后，溶液中不同致敏芳香劑含量相差也很大，這可能是因為PVC基質(zhì)對致敏芳香劑的吸附能力存在差異。

對PC材質(zhì)樣品，檢測時發(fā)現(xiàn)，加入丙酮和乙醇，樣品不能被溶解，加入四氫呋喃和二氯甲烷，樣品溶解，四氫呋喃提取液為乳白色溶液，二氯甲烷提取液為透明溶液；從表2中實際含量實驗數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，PC陽性樣品經(jīng)四氫呋喃和二氯甲烷溶解后，樣品中含有的大多數(shù)致敏芳香劑均釋放到溶液中，未被丙酮和乙醇溶解的樣品中，只有少量致敏芳香劑遷移到溶液中，不同致敏芳香劑測定結(jié)果相差不大。

近年來，呂慶等學(xué)者也采用了溶解-沉淀法來檢測塑料玩具中致敏芳香劑含量，但國內(nèi)外 未見對于溶解-沉淀法關(guān)鍵控制點的研究。綜合上述實驗，為使建立的檢測方法簡便、實用，本研究選擇四氫呋喃作為塑料材質(zhì)玩具中的致敏性芳香劑含量測定的溶劑。使用四氫呋喃對ABS、PVC和PC 3種自制陽性樣品中含有的致敏芳香劑進(jìn)行檢測，檢測結(jié)果見表2。由于陽性樣品中致敏芳香劑的理論含量均為200mg/kg，由表2陽性樣品的測定結(jié)果可知，除丙烯酸乙酯、反式-2-己烯醛和芳樟醇在制備陽性樣品時揮發(fā)損失之外，其他9種致敏芳香劑的平均回收率為60.5％～112.3％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.2％～4.6％。

但是，在3種材質(zhì)的陰性樣品中添加12種致敏芳香劑進(jìn)行回收率實驗發(fā)現(xiàn)，分別用丙酮、二氯甲烷和四氫呋喃進(jìn)行溶解提取時，溶解回收率均很高，這主要因為在陰性樣品中通過添加多種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行方法準(zhǔn)確度實驗時，外添加的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)未進(jìn)入塑料基質(zhì)中，因此，通過簡單的添加回收實驗不能反應(yīng)陽性樣品的真實情況，同時也說明通過加入溶劑對塑料玩具中致敏芳香劑進(jìn)行分析時，主要因為溶劑對材質(zhì)的具有良好的溶解能力，分析物能溶解釋放于溶劑中。為保證實驗的準(zhǔn)確性，進(jìn)行方法優(yōu)化時，采用陽性樣品進(jìn)行條件摸索為宜。

溶解方式的確定

致敏芳香劑大多具有揮發(fā)性，若前處理時間過長或溫度過高會造成目標(biāo)物的損失，影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。使用PVC陽性樣品，比較了振蕩溶解和超聲溶解的回收率。實驗發(fā)現(xiàn)，使用超聲溶解和振蕩溶解都能獲得很高的提取回收率，但使用超聲溶解時，由于樣品被冷凍研磨成粉末，將其置于離心管時，由于其密度小，易漂浮，使粉狀樣品易粘附在離心管管壁上，而提取溶劑加入量較少，不能將其帶入離心管溶液中，影響回收率。因此，本研究選擇采用操作簡便的振蕩法對塑料玩具樣品進(jìn)行溶解提取。

沉淀劑的選擇

很多學(xué)者已研究發(fā)現(xiàn)，加入甲醇可很好的將塑料析出，以很好地獲得干凈的上機(jī)溶液。本研究也選擇甲醇作為沉淀溶劑來沉淀塑料基質(zhì)。實驗發(fā)現(xiàn)，用5mL四氫呋喃提取ABS、PVC和PC材質(zhì)樣品時，加入5mL甲醇離心后，上層溶液透明度一般，取其上層溶液，再加入5mL甲醇渦旋后離心，仍能析出部分塑料制品。應(yīng)用此方法發(fā)現(xiàn)，加入15mL甲醇能使0.2g ABS、PVC和PC材質(zhì)樣品實現(xiàn)完全沉淀。

方法的線性關(guān)系和檢出限

采用基質(zhì)空白提取液配制基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，與同濃度純?nèi)軇?biāo)準(zhǔn)溶液同時進(jìn)樣，結(jié)果表明，樣品基質(zhì)效應(yīng)很弱，因此，本研究采用溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線定量。將0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0、4.0和8.0mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣分析，以質(zhì)量濃度與峰面積作標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，金合歡醇和新鈴蘭醛在1～8mg/L，反式-2-庚烯醛、香茅醇、2-辛炔酸甲酯、香葉醇、檸檬 醛、對甲氧基芐醇、肉桂醇、假紫羅酮、戊基肉桂醇在0.2～8mg/L，其余38種芳香劑在0.1～8mg/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.9962～0.9999。方法的檢出限(S/N≧3)為6mg/kg(新鈴蘭醛為15mg/kg)，定量限(S/N≧10)為20mg/kg(合金歡醇和新鈴蘭醛為50mg/kg)。

方法的回收率和精密度

鑒于陽性樣品回收率實驗結(jié)果，本研究在ABS材料中50mg/kg(定量限附近)做了添加回收率實驗和精密度(ABS樣品空白和標(biāo)準(zhǔn)添加總離子流圖見圖2)，從表4可知，致敏芳香劑在ABS塑料玩具中，在50mg/kg濃度的加標(biāo)回收率為83.8％～112.2％，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.9％～9.3％。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)、線性范圍、檢出限、定量限及回收率等結(jié)果見表3和表4。

表3 方法的線性回歸方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍、檢出限和定量限

表4 方法的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

實際樣品檢測

利用建立的檢測方法，對市場上常見的塑料玩具進(jìn)行了篩查檢測。項目組從市場上隨機(jī)購買了塑料玩具類樣品36個。

配置0.2、0.5、0.8、1.0、2.0、4.0、8.0、10.0mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液進(jìn)樣分析，以質(zhì)量濃度與峰面積作標(biāo)準(zhǔn)曲線，檢出陽性樣品結(jié)果見表4，陽性樣品色譜及質(zhì)譜圖見圖3。

表4 市場購買塑料玩具中檢出的化合物及濃度

經(jīng)檢測，3種玩具中檢出致敏香味劑，其中1種檢出苯甲酸芐基酯400.5mg/kg，超出歐盟法規(guī)規(guī)定的100mg/kg的標(biāo)示限值，其他2種玩具檢出微量的致敏芳香劑，未超過限量標(biāo)準(zhǔn)。說明市場上部分玩具不同程度的摻有致敏芳香劑，雖然目前檢測出的化合物均在歐盟規(guī)定的超出100mg/kg需要標(biāo)示的11種范圍內(nèi)，但由于收集樣品范圍有限，不排除其他玩具中會有更多禁用芳香劑的檢出。

最后需要說明的是，以上實施例僅幫助本領(lǐng)域技術(shù)人員理解本發(fā)明的實質(zhì)，并不用做對本發(fā)明保護(hù)范圍的限定。