一種測定牛奶中八氯苯乙烯的方法與流程

本發(fā)明涉及一種測定牛奶中八氯苯乙烯的方法。

背景技術(shù)：

八氯苯乙烯CAS號(hào)：29082-74-4;62601-62-1，分子式：C₈Cl₈，分子量：379.7096，英文名稱1,2,3,4,5-pentachloro-6-(trichloroethenyl)benzene，是一種對人體有害的持久性有機(jī)污染物物質(zhì)，廣泛存在于工業(yè)產(chǎn)品當(dāng)中，含有特殊結(jié)構(gòu)的多氯代芳香化合物，被美國環(huán)保局列為12種I級(jí)優(yōu)先控制的PBT物質(zhì)之一，可以通過居民的飲水和食物鏈進(jìn)入人體。牛奶作為一種高蛋白食品，是人們獲取蛋白質(zhì)的主要來源之一。當(dāng)前由于工業(yè)污染的不斷加劇，在自然環(huán)境里面存在大量的八氯苯乙烯。通過牧草、飲水等環(huán)節(jié)八氯苯乙烯都可以遷移到人體里面，并不斷的集聚。另外，在一些包裝材料里面也可能含有八氯苯乙烯，當(dāng)這些包裝材料用來制作盛裝牛奶的盒子和瓶子的時(shí)候，八氯苯乙烯會(huì)滲入牛奶當(dāng)中，進(jìn)一步進(jìn)入人體內(nèi)。八氯苯乙烯的長期積累會(huì)對人體造成嚴(yán)重傷害。過量的八氯苯乙烯可以造成慢性中毒，造成畸胎，腫瘤和免疫功能下降，最嚴(yán)重的是生殖系統(tǒng)障礙，造成男性的精子減少，雄性退化，乃至男性不育癥的高發(fā)。育齡婦女長期受該物質(zhì)的污染，會(huì)使受孕胎兒畸形的可能性大大增加，使胎兒的五官、肢體或性器官的局部畸形。另外透過食物鏈放大與生物體轉(zhuǎn)化后的該物質(zhì)，其可能對于生態(tài)系統(tǒng)與我們自己的健康產(chǎn)生更大的殺傷力。而目前對于該物質(zhì)的檢測方法研究的很少，為了保證廣大居民牛奶飲用安全，建立一種有效簡單的測定牛奶中八氯苯乙烯的方法特別的重要。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有的缺陷，提供了一種測定牛奶中八氯苯乙烯的方法。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

一種測定牛奶中八氯苯乙烯的方法，包括如下步驟：

（1）樣品的預(yù)處理：先用乙腈振蕩提取牛奶樣品，然后向混合液中加入鹽進(jìn)行鹽析，離心，取上層乙腈提取液；

（2）步驟（1）的乙腈提取液用膜過濾后，上高效液相色譜儀進(jìn)行檢測，檢測波長為220-260nm，色譜柱為C₁₈柱，流動(dòng)相為三氟乙酸的水溶液和乙腈。

優(yōu)選地，步驟（1）中所述鹽為氯化鈉與硫酸鎂的混合物。

更優(yōu)選地，所述氯化鈉與硫酸鎂的質(zhì)量比為1:1。

振蕩提取時(shí)，優(yōu)選的牛奶樣品與乙腈的體積比為1:1。

鹽析時(shí)，按濃度為0.05-0.15g/ml向混合液中加入鹽，鹽的濃度優(yōu)選為0.1g/ml。

優(yōu)選地，步驟（2）中所述三氟乙酸的水溶液的體積百分比濃度為0.3%，pH值為3～4。

優(yōu)選地，步驟（2）中所述三氟乙酸的水溶液和乙腈的體積比為90:10。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)

該方法樣品處理簡單，有機(jī)溶劑使用量少，符合綠色化學(xué)的理念，儀器設(shè)備要求相對較低，適合在基層檢測部門推廣應(yīng)用，用于大量牛奶樣品中八氯苯乙烯樣品的篩選工作。

附圖說明

附圖用來提供對本發(fā)明的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說明書的一部分，與本發(fā)明的實(shí)施例一起用于解釋本發(fā)明，并不構(gòu)成對本發(fā)明的限制。在附圖中：

圖1是100μg/L加標(biāo)濃度的色譜圖；

圖2是八氯苯乙烯在不同波長下的吸收曲線。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖對本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用于說明和解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

實(shí)施例1

1、樣品前處理?xiàng)l件

量取5.0ml牛奶樣品，裝入15ml具塞離心管中，加入5ml乙腈，渦旋30s，放入振蕩儀中，劇烈振蕩5min。振蕩完成之后加入0.5g氯化鈉和0.5g無水硫酸鎂，再振蕩5min。8000rpm離心5min，離心完之后，用一次性吸管吸取上層乙腈提取液于另一個(gè)離心管中。用一次性注射器吸取1-1.5ml提取液，過0.22μm復(fù)合濾膜過濾頭到進(jìn)樣瓶中，上機(jī)測定。

2、儀器條件

高效液相色譜儀（waters2695）-二級(jí)陣列管檢測器，色譜柱Xcharge C₁₈ column (250mm×4.6mm, 5 μm,100A)，流動(dòng)相為水和乙腈，水：乙腈（v：v，90:10），其中，水含有0.3%的三氟乙酸（v:v），使用前用濃氨水調(diào)節(jié)pH值到3-4。進(jìn)樣體積為20ul，色譜柱柱溫為30±5℃。

3、最大吸收波長的確定

設(shè)定檢測波長為200-400nm進(jìn)行掃場實(shí)驗(yàn)，優(yōu)化出最佳的檢測波長，如圖2所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在220-260nm具有較佳的吸收，其中檢測波長為233nm時(shí)，目標(biāo)檢測化合物八氯苯乙烯有最大吸收，此時(shí)檢測方法的靈敏度最好。在該方法中，最后選定檢測器的波長為233nm，100μg/L加標(biāo)濃度的色譜圖如圖1所示。

4、方法的準(zhǔn)確度、精密度和靈敏度

向空白牛奶樣品中加入八氯苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)品。使用上述樣品前處理方法處理之后，上機(jī)測定，測定加標(biāo)回收率、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差、最低檢出限和最低定量限等數(shù)據(jù)。該方法的準(zhǔn)確度由加標(biāo)回收率來體現(xiàn)，加標(biāo)實(shí)驗(yàn)測得回收率為70-81%。準(zhǔn)確度由相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）來體現(xiàn)，測得該方法對牛奶樣品檢測RSD小于15%。靈敏度由最低檢出限和最低定量限來體現(xiàn)。最低檢出限（LOD）按照3倍性噪比計(jì)算，最低定量限（LOQ）按照10倍性噪比計(jì)算：該方法的最低檢出限為10 μg/ml，最低定量限為33μg/ml。

最后應(yīng)說明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。