本發(fā)明涉及環(huán)境質(zhì)量安全檢測技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及分散固相萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測沉積物中有機磷農(nóng)藥多組分殘留的方法。
背景技術(shù)：
有機磷農(nóng)藥是我國農(nóng)藥市場所占份額最大且使用比較廣泛的一類農(nóng)藥。有機磷農(nóng)藥在理論上被認為是易降解、不易生物富集、對生態(tài)影響較小的農(nóng)藥，曾一度被認為是有機氯農(nóng)藥的替代農(nóng)藥。而事實上，有機磷農(nóng)藥可以在生物體內(nèi)與膽堿酯酶形成磷?；憠A酯酶，從而對生物體產(chǎn)生毒性。2010年年初轟動全國的“毒豇豆”事件，在豇豆中檢出有機磷超標。在2014-2-27青島連現(xiàn)三起韭菜中毒事件，確為農(nóng)藥中毒。在2014年初日本最大水產(chǎn)企業(yè)丸羽日朗旗下公司曝出食品農(nóng)藥污染，在生產(chǎn)的冷凍食品中檢出農(nóng)藥馬拉硫磷，致800多人中毒。毒死蜱是一種高效低毒的有機磷殺蟲劑，被廣泛用于一系列作物上，包括柑橘、蘋果、櫻桃、葡萄、花椰菜和蘆筍等。自1965年開始使用以來，尤其是最近幾年，毒死蜱已導致許多農(nóng)場工人患病。另外，研究人員在水渠中也發(fā)現(xiàn)了毒死蜱的痕跡，威脅著魚類的生存。監(jiān)管人員表示，過度使用毒死蜱可導致靶標害蟲產(chǎn)生抗藥性，并且毒死蜱能夠影響胎兒及兒童的大腦發(fā)育。毒死蜱和三唑磷雖為中等毒有機磷殺蟲劑，但農(nóng)藥殘留驗證試驗結(jié)果表明，毒死蜱即使按照正確的方法和劑量使用，仍存在農(nóng)殘超標的風險。大量的化學農(nóng)藥物質(zhì)因為使用和管理等問題進入到環(huán)境中，其歸趨機制和生物學效應(yīng)嚴重影響著人類生存環(huán)境。對環(huán)境農(nóng)藥殘留檢測和影響評價研究，迫在眉睫，它是一項基礎(chǔ)性和社會公益性研究任務(wù)。
農(nóng)藥多殘留分析需解決的主要問題之一是去除共提取基質(zhì)干擾物對定量準確度、靈敏度及儀器污染的影響。因此樣品前處理中對基質(zhì)凈化方法的選擇及優(yōu)化是多殘留檢測的關(guān)鍵。農(nóng)藥多殘留除雜凈化方法應(yīng)用較多的有固相萃取柱凈化和凝膠滲透色譜凈化，凈化步驟繁瑣且使用溶劑量較大。基質(zhì)分散固相萃取技術(shù)作為一種樣品前處理方法在有機質(zhì)少的蔬菜樣品分析中已得到廣泛應(yīng)用，在有機質(zhì)豐富的環(huán)境樣品中應(yīng)用有限。鑒于以上原因，迫切需要開發(fā)出一種針對環(huán)境基質(zhì)中有機磷農(nóng)藥多組分殘留的準確、便捷測定方法，利用建立的方法來監(jiān)測環(huán)境中有機磷農(nóng)藥殘留水平、組成分布特征。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種分散固相萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測沉積物中有機磷農(nóng)藥多組分殘留的方法，操作方便，重現(xiàn)性較好，定性準確且回收率較高，能夠快速分析沉積物中有機磷農(nóng)藥多組分殘留，是一種便捷、準確的對沉積物中痕量有機磷農(nóng)藥的測定方法，以實現(xiàn)沉積物中痕量有機磷農(nóng)藥的定量及定性分析。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：
一種分散固相萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測沉積物中有機磷農(nóng)藥多組分殘留的方法，包括如下步驟：一、樣品溶劑萃取獲得萃取液，二、銅粉除雜獲得除雜液，三、分散固相萃取凈化和氣相色譜-質(zhì)譜檢測，外標法定量。
作為優(yōu)選，步驟一具體為：準確稱取沉積物5.0g于50mL離心管中，加入20mL萃取液于離心管中，渦旋振蕩2min，超聲萃取15min后，用5000r/min的轉(zhuǎn)速離心5min，將上清液過濾到150mL旋蒸瓶中；殘渣用20mL萃取液重復(fù)渦旋振蕩、超聲萃取、離心，過濾上清液于上述150mL旋蒸瓶中，從而合并萃取液。
作為優(yōu)選，所述萃取液為乙腈與乙酸乙酯按照1:1體積比的混合物。
作為優(yōu)選，步驟二具體為：向步驟一所得萃取液中加入1g銅粉，35℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，加乙腈溶解并定容至1.0mL得除雜液。
作為優(yōu)選，步驟三具體為：向步驟二所得萃取液中加入0.05g乙二胺-N-丙基硅烷，渦旋振蕩1min，靜置分層后，經(jīng)0.22μm有機相微孔濾膜過濾到樣品瓶中，然后氣相色譜-質(zhì)譜檢測，外標法定量。
作為優(yōu)選，氣相色譜-質(zhì)譜檢測采用安捷倫7890B-5977A氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，配置EI源，使用DB-35毛細管氣相色譜柱(30m×0.25mm×0.25μm)實現(xiàn)組分分離，氣相色譜柱升溫程序為：80℃保持2min，10℃/min升溫至140℃，5℃/min升溫至200℃，保持2min，以1℃/min升溫至210℃，再以10℃/min升溫至290℃，保持2min。
作為優(yōu)選，質(zhì)譜條件為：傳輸線溫度260℃，離子源溫度230℃，四級桿溫度150℃，溶劑延遲時間3min，質(zhì)量掃描范圍m/z50-450，選擇離子監(jiān)測。作為優(yōu)選，所述有機磷農(nóng)藥多組分包括敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、馬拉硫磷、殺冥硫磷、甲基異柳磷、水胺硫磷、喹硫磷、殺撲磷、丙溴磷、三唑磷、伏殺磷。
本發(fā)明的有益效果是：
本發(fā)明建立了沉積物中有機磷農(nóng)藥多組分殘留的檢測方法；采用銅粉除雜，乙二胺-N-丙基硅烷基質(zhì)分散固相萃取進行樣品凈化，除雜凈化效果好，有效降低了雜質(zhì)對測定過程的干擾；采用氣相色譜-質(zhì)譜法進行選擇離子監(jiān)測，具有較高的靈敏度和精確度；該方法操作步驟少、靈敏度高、重現(xiàn)性好、能夠快速分析環(huán)境沉積物中的有機磷農(nóng)藥多組分殘留含量。
附圖說明
圖1是16種有機磷農(nóng)藥標準溶液的氣相色譜質(zhì)譜全掃描圖；1.敵敵畏，2.甲胺磷，3.乙酰甲胺磷，4.氧化樂果，5.樂果，6.甲基對硫磷，7.毒死蜱，8.馬拉硫磷，9.殺冥硫磷，10.甲基異柳磷，11.水胺硫磷，12.喹硫磷，13.殺撲，14.丙溴磷，15.三唑磷，16.伏殺磷。
具體實施方式
下面通過具體實施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步的具體說明。
本發(fā)明中，若非特指，所采用的原料和設(shè)備等均可從市場購得或是本領(lǐng)域常用的。下述實施例中的方法，如無特別說明，均為本領(lǐng)域的常規(guī)方法。
實施例1舟山某海域沉積物中16種有機磷農(nóng)藥的測定
(1)樣品溶劑萃?。簻蚀_稱取舟山某海域沉積物樣品5.0g于50mL離心管中，加入20mL乙腈+乙酸乙酯(1：1體積比)于離心管中，渦旋振蕩2min，超聲萃取15min后，用5000r/min的轉(zhuǎn)速離心5min,將上清液過濾到150mL旋蒸瓶中，殘渣用20mL乙腈+乙酸乙酯(1：1體積比)重復(fù)渦旋振蕩、超聲萃取，用上述同樣條件離心，過濾上清液于上述150mL旋蒸瓶中，合并萃取液；
(2)銅粉除雜：合并的萃取液中加入1g銅粉，萃取液35℃旋蒸濃縮至干，加乙腈溶解并定容至1.0mL；
(3)基質(zhì)分散固相萃取凈化：在定容至1.0mL乙腈提取液中，加入0.05g乙二胺-N-丙基硅烷，渦旋振蕩1min，靜置分層后，經(jīng)0.22μm有機相微孔濾膜過濾到樣品小瓶中，在已設(shè)定的氣相色譜-質(zhì)譜條件下檢測，進行定性定量分析；
(4)氣相色譜質(zhì)譜檢測：采用安捷倫7890B-5977A氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，配置EI源，使用DB-35毛細管氣相色譜柱(30m×0.25mm×0.25μm)實現(xiàn)組分分離。氣相色譜柱升溫程序為：80℃保持2min，10℃/min升溫至140℃，5℃/min升溫至200℃，保持2min，以1℃/min升溫至210℃，再以10℃/min升溫至290℃，保持2min。按照設(shè)定好的氣相色譜質(zhì)譜檢測條件進行檢測(表1)，SIM方式掃描，外標法定量。16種有機磷農(nóng)藥標準溶液的氣相色譜質(zhì)譜全掃描圖見圖1。
(5)標準曲線繪制(外標法)：分別取適量的有機磷農(nóng)藥標準儲備液，用乙腈配置濃度為0.020mg/L、0.050mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、0.400mg/L、0.600mg/L的有機磷農(nóng)藥混合標準溶液。按照上述步驟(4)的要求進行操作，根據(jù)外標法的要求繪制標準曲線。采用該外標法，測得舟山某海域沉積物中16種有機磷農(nóng)藥物質(zhì)均為未檢出，本發(fā)明的檢出限見表2。
(6)回收率的測定
分別按照5μg/kg、15μg/kg、50μg/kg的濃度在在舟山某海域沉積物中添加有機磷農(nóng)藥的混合標準溶液，每個添加水平分別做6個平行樣；按照步驟(1)-(4)進行氣相色譜-質(zhì)譜檢測，并與上述得到的標準曲線比較，通過換算最終得到待測沉積物中有機磷農(nóng)藥的濃度。方法的回收率在78％-113％，RSD<15％。
實施例2某水庫沉積物中16種有機磷農(nóng)藥的測定
(1)樣品溶劑萃取：準確稱取某水庫沉積物樣品5.0g于50mL離心管中，加入20mL乙腈+乙酸乙酯(1：1體積比)于離心管中，渦旋振蕩2min，超聲萃取15min后，用5000r/min的轉(zhuǎn)速離心5min,將上清液過濾到150mL旋蒸瓶中，殘渣用20mL乙腈+乙酸乙酯(1：1體積比)重復(fù)渦旋振蕩、超聲萃取，用上述同樣條件離心，過濾上清液于上述150mL旋蒸瓶中，合并萃取液；
(2)銅粉除雜：合并的萃取液中加入1g銅粉，萃取液35℃旋蒸濃縮至近干，加乙腈溶解并定容至1.0mL；
(3)基質(zhì)分散固相萃取凈化：在定容至1.0mL乙腈提取液中，加入0.05g乙二胺-N-丙基硅烷，渦旋振蕩1min，靜置分層后，經(jīng)0.22μm有機相微孔濾膜過濾到樣品小瓶中，在已設(shè)定的氣相色譜-質(zhì)譜條件下檢測，進行定性定量分析；
(4)氣相色譜質(zhì)譜檢測：采用安捷倫7890B-5977A氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，配置EI源，使用DB-35毛細管氣相色譜柱(30m×0.25mm×0.25μm)實現(xiàn)組分分離。氣相色譜柱升溫程序為：80℃保持2min，10℃/min升溫至140℃，5℃/min升溫至200℃，保持2min，以1℃/min升溫至210℃，再以10℃/min升溫至290℃，保持2min。按照設(shè)定好的氣相色譜質(zhì)譜檢測條件進行檢測(表1)，SIM方式掃描，外標法定量。
(5)標準曲線繪制(外標法)：分別取適量的有機磷農(nóng)藥標準儲備液，用乙腈配置濃度為0.020mg/L、0.050mg/L、0.100mg/L、0.200mg/L、0.400mg/L、0.600mg/L的有機磷農(nóng)藥混合標準溶液。按照上述步驟(4)的要求進行操作，根據(jù)外標法的要求繪制標準曲線。采用該外標法，測得某水庫沉積物中16種有機磷農(nóng)藥物質(zhì)均為未檢出，本發(fā)明的檢出限見表2。
(6)回收率的測定
分別按照5μg/kg、15μg/kg、50μg/kg的濃度在某水庫沉積物中添加有機磷農(nóng)藥的混合標準溶液，每個添加水平分別做6個平行樣；按照步驟(1)-(4)進行氣相色譜-質(zhì)譜檢測，并與上述得到的標準曲線比較，通過換算最終得到待測沉積物中有機磷農(nóng)藥的濃度。方法的回收率在81％-103％，RSD<15％。
表1有機磷農(nóng)藥的保留時間和質(zhì)譜信息
表2有機磷農(nóng)藥的方法檢出限
以上所述的實施例只是本發(fā)明的一種較佳的方案，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，在不超出權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體及改型。