頂空固相微萃取?氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)蠶蛹香氣的方法與流程

本發(fā)明涉及化學(xué)檢測(cè)方法技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)蠶蛹香氣的方法。

背景技術(shù)：

色譜是一種很好的分離手段，可以將復(fù)雜混合物中的各種組分分離開，但其定性、鑒定結(jié)構(gòu)的能力較差；質(zhì)譜對(duì)未知化合物的結(jié)構(gòu)有很強(qiáng)的鑒別能力，靈敏度高，檢測(cè)快速，但質(zhì)譜本身無(wú)法實(shí)現(xiàn)復(fù)雜化合物的分離，因此對(duì)未知化合物鑒定時(shí)需要高純度的樣本。氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(GC-MS)先利用氣相色譜技術(shù)對(duì)復(fù)雜組分樣品進(jìn)行有效分離，得到高純度的樣品正好滿足質(zhì)譜鑒定的要求，具有色譜的高分辨率和質(zhì)譜的高靈敏度、強(qiáng)鑒別能力。固相微萃取(SPME)是一種適用于色譜的樣品預(yù)處理技術(shù)，其原理是將樣品中的分析物直接吸附到一根帶有涂層的熔融石英纖維上，然后解吸分析物。SPME纖維可以直接插入液體樣品中或者停留在樣品上方進(jìn)行頂空取樣，克服了傳統(tǒng)樣品處理技術(shù)的缺點(diǎn)，集采樣、萃取、濃縮、進(jìn)樣于一體，便于攜帶，真正實(shí)現(xiàn)樣品的實(shí)時(shí)采集。

蠶或野生或家養(yǎng)，故蠶蛹屬純天然綠色食品，保持其本身特有的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，蠶鮮蛹經(jīng)簡(jiǎn)單加工即可食用。如用鹽水佐料制成五香蛹，美味可口，香而不膩；用油榨成酥脆蛹，風(fēng)味獨(dú)特，老少皆宜。還可通過冷凍干燥或真空包裝等手段，將柞蠶蛹制成即食性方便食品，供兒童、旅游等消閑食用。蠶蛹因其藥食兩用的寶貴價(jià)值，一直以來都是科學(xué)研究的熱門對(duì)象。盡管目前對(duì)于蠶蛹的研究涉及多方面多領(lǐng)域，然而卻很少有關(guān)于蠶蛹次生代謝產(chǎn)生的揮發(fā)性香氣成分及種類的報(bào)道。蠶蛹作為人類理想的昆蟲性食品，經(jīng)簡(jiǎn)單的油炸或爆炒加工，就能釋放出醉人香氣，令人垂涎欲滴增進(jìn)食欲，這種香氣有別于畜禽肉在美拉德反應(yīng)下產(chǎn)生的香氣成分(吡嗪、噻吩、呋喃等)，是屬于昆蟲特有的香氣物質(zhì)。昆蟲在生長(zhǎng)發(fā)育過程往往會(huì)伴隨有次生代謝，產(chǎn)生多種揮發(fā)性物質(zhì)作為昆蟲信息激素，是由特殊腺體分泌的極微量的化學(xué)物質(zhì)，用于進(jìn)行同種個(gè)體與它種個(gè)體之間的信息交流，包括集合信息素、追蹤素和性信息素幾類。已有報(bào)道證實(shí)，節(jié)肢動(dòng)物全蝎中主要的信息激素為十八烷酸，另外棕櫚酸、十八烷酸、十八碳一烯酸在鼠婦和黑蟻中被證實(shí)是其主要的信息激素種類。正是這些昆蟲中特有的天然香氣化合物的存在，使得蠶蛹這類昆蟲性食物在加工過程中散發(fā)出獨(dú)特的迷人香氣。經(jīng)過本方法的檢測(cè)，蠶蛹中香氣成分主要信息激素物質(zhì)種類除脂肪酸類、醇類外還包括烷烴和酯類，以脂肪酸和烷烴含量為高。

本發(fā)明利用頂空固相微萃取技術(shù)集取樣、萃取及富集于一體，操作簡(jiǎn)便，而且具有萃取速度快、操作成本低，無(wú)需溶劑萃取和浸提等操作等優(yōu)點(diǎn)，與氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化分析，檢測(cè)蠶蛹中特征揮發(fā)性香氣物質(zhì)的成分及種類，選用黃、黑兩種蠶蛹檢測(cè)其香氣成分并通過水煮、油炸、冷凍干燥制粉等多個(gè)方式對(duì)蠶蛹進(jìn)行加工，分析比較不同加工方式對(duì)蠶蛹特征香氣的影響。本發(fā)明不僅提供了不同加工的蠶蛹產(chǎn)品香氣的檢測(cè)方法，更是提供了一種可推廣至昆蟲信息激素的檢測(cè)和定量方法，對(duì)于進(jìn)一步研究昆蟲的次生代謝過程、生物學(xué)交互作用以及動(dòng)植物生態(tài)學(xué)相互影響都具有一定輔助作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

基于背景技術(shù)存在的技術(shù)問題，本發(fā)明提出了一種頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)昆蟲性食材蠶蛹特征香氣的方法，該方法可以對(duì)蠶蛹的香氣成分進(jìn)行詳細(xì)分析，為更好地利用蠶蛹的香氣成分提供參考。

一種頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)蠶蛹香氣的方法，包括以下步驟：

A、蠶蛹的前處理：將未加工或經(jīng)過加工的蠶蛹刨開，去掉其外表皮，取其蛋白，用研缽磨碎，用萬(wàn)分之一天平各稱取2.00g分別放于頂空瓶中備用；

B、頂空固相微萃?。簩?nèi)裝有樣品的頂空瓶至于室溫下平衡10分鐘后，以SPME針管插入頂空瓶的硅橡膠瓶墊，伸出萃取頭，在沸水浴下吸附50min，吸附完畢，取出后插入GC-MS進(jìn)樣口，250℃下解析5min；

C、熱脫附進(jìn)行GC-MS檢測(cè)，并采集數(shù)據(jù)；

D、根據(jù)譜庫(kù)檢索對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行定性、定量分析；

E、檢測(cè)結(jié)果分析：根據(jù)測(cè)試質(zhì)譜數(shù)據(jù)，分析確定蠶蛹中各種香氣成分種類和含量，并比較不同加工方法對(duì)蠶蛹特征香氣種類和含量的影響。

優(yōu)選的，所述的萃取頭為PDMS/CAR/DVB萃取頭。

優(yōu)選的，所述的色譜柱的參數(shù)設(shè)定為：HP-5MS色譜柱，進(jìn)樣量：1μL；分流比：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣口溫度：250℃；檢測(cè)器溫度：250℃；載氣：He(純度99.999％)，流速：1mL/min；電子能量：70ev；離子源溫度：230℃；四級(jí)桿溫度：450℃；升溫程序：90℃保持0min，10℃/min速度升溫至200℃，保持0min，5℃/min升溫至240℃保持3min，后運(yùn)行250℃保持5min。

優(yōu)選的，所述的MS參數(shù)設(shè)定為：離子源為化學(xué)惰性，溶劑延遲4min，電離方式：EI，電子能量：70ev，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度250℃。

優(yōu)選的，所述的步驟A中，蠶蛹分別選取未加工、煮熟、油炸、凍干粉四種不同的加工方法進(jìn)行對(duì)比測(cè)試。

優(yōu)選的，所述的蠶蛹的凍干粉的前處理方法，包括以下步驟：將蠶蛹刨開，分成2部分，置于-80℃冷凍6小時(shí)，取出，放入冷凍干燥器中干燥12小時(shí)，取出，研磨成粉備用。

本發(fā)明提供的頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)蠶蛹香氣的方法，利用頂空固相微萃取技術(shù)集取樣、萃取及富集于一體，操作簡(jiǎn)便，而且具有萃取速度快、操作成本低，無(wú)需溶劑萃取和浸提等操作等優(yōu)點(diǎn)，與氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化分析，首次對(duì)昆蟲性食材蠶蛹的特征風(fēng)味物質(zhì)的種類和含量進(jìn)行了分析，并探索了黑黃兩種不同成蛹溫度條件對(duì)蠶蛹鮮蛹特征風(fēng)味物質(zhì)種類和形成的影響，同時(shí)比較了傳統(tǒng)(水煮、油炸)及現(xiàn)代加工方式(凍干)對(duì)黑黃蠶蛹特征風(fēng)味物質(zhì)的影響情況，以期推動(dòng)蠶蛹深加工產(chǎn)品向特征風(fēng)味調(diào)味品的生產(chǎn)和開發(fā)；結(jié)果表明高溫成蛹的黃蠶蛹含有更多種類和更高含量的特征香氣成分，以脂肪酸、烷烴、酯、醇構(gòu)成其特征香氣組群物質(zhì)，而較低溫度成蛹的黑蠶蛹其特征香氣物質(zhì)在種類及含量上都不及黃蠶蛹，說明高溫有利于蠶蛹的次生代謝進(jìn)程，能更好地生成和積累香氣物質(zhì)；同時(shí)，較低溫度的加工方式(凍干處理)可以最大限度的保留蠶蛹中香氣成分不被破壞；本發(fā)明不僅提供了不同加工的蠶蛹產(chǎn)品香氣的檢測(cè)方法，更是提供了一種可推廣至昆蟲信息激素的檢測(cè)和定量方法，對(duì)于進(jìn)一步研究昆蟲的次生代謝過程、生物學(xué)交互作用以及動(dòng)植物生態(tài)學(xué)相互影響都具有一定輔助作用。

附圖說明

圖1：未加工的黃蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖；

圖2：經(jīng)水煮后的黃蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖；

圖3：經(jīng)油炸后的黃蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖；

圖4：黃蠶蛹制成凍干粉后的香氣成分的總離子流圖；

圖5：未加工的黑蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖；

圖6：經(jīng)水煮后的黑蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖；

圖7：經(jīng)油炸后的黑蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖；

圖8：黑蠶蛹制成凍干粉后的香氣成分的總離子流圖；

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：

一種頂空固相微萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)蠶蛹香氣的方法，包括以下步驟：

1、材料與儀器設(shè)備：

1.1材料：

新鮮黃蠶蛹、新鮮黑蠶蛹各250g、金龍魚精煉一級(jí)大豆油。

1.2儀器與設(shè)備：

7890GC-5975MS氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀(美國(guó)Agilent公司)、57330-U SUPELCO固相微萃取手柄、萬(wàn)分之一天平(德國(guó)Sartorius集團(tuán))、凍干機(jī)(美國(guó)Simon公司)、海爾超低溫冰箱、電磁爐、水浴鍋；

2、實(shí)驗(yàn)方法與內(nèi)容

2.1蠶蛹的前處理

2.1.1蛋白勻漿香氣測(cè)定實(shí)驗(yàn)：將不同種類的蠶蛹分別刨開，去掉其外表皮，取其蛋白，用研缽磨碎，用萬(wàn)分之一天平各稱取2.00g分別放于頂空瓶中備用；

2.1.2熟蛋白勻漿香氣測(cè)定實(shí)驗(yàn)：將不同種類的蠶蛹煮熟后分別刨開，去掉其外表皮，取其蛋白，用研缽磨碎，用萬(wàn)分之一天平各稱取2.00g分別放于頂空瓶中備用；

2.1.3油炸蠶蛹特征香氣測(cè)定實(shí)驗(yàn)：將不同種類的蠶蛹文火用金龍魚油炸至表面出現(xiàn)金黃色撈出后，將表面油漬擦干后分別刨開，去其外表皮，取其蛋白，用研缽磨碎，用萬(wàn)分之一天平各稱取2.00g分別放于頂空瓶中備用；

2.1.4凍干粉香氣測(cè)定實(shí)驗(yàn)：取2種蠶蛹，分別將其刨開，分成2部分，置于海爾超低溫冰箱-80℃冷凍6小時(shí)，取出，放入凍干機(jī)中凍干24小時(shí)，取出，研磨成粉，用萬(wàn)分之一天平各稱取2.00g分別放于頂空瓶中備用；

2.2GC-MS檢測(cè)

2.2.1頂空固相微萃?。簩?nèi)裝有樣品的頂空瓶至于室溫下平衡十分鐘后，以SPME針管插入頂空瓶的硅橡膠瓶墊，伸出PDMS/CAR/DVB萃取頭，在沸水浴下吸附50min，吸附完畢，取出后插入GC-MS進(jìn)樣口，250℃下解析5min，熱脫附進(jìn)行GC-MS檢測(cè)。

2.2.2GC條件：色譜柱：HP-5MS色譜柱；進(jìn)樣量：1μL；分流比：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣口溫度：250℃；檢測(cè)器溫度：250℃；載氣：He(純度99.999％)，流速：1mL/min；電子能量：70ev；離子源溫度：230℃；四級(jí)桿溫度：450℃；升溫程序：90℃保持0min，10℃/min速度升溫至200℃，保持0min，5℃/min升溫至240℃保持3min，后運(yùn)行250℃保持5min。

2.2.3MS條件：離子源為化學(xué)惰性，溶劑延遲4min，電離方式：EI，電子能量：70ev，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度250℃。

2.2.4萃取時(shí)間的確定：分別取各類別樣品進(jìn)行3組預(yù)實(shí)驗(yàn)，以萃取時(shí)間為自變量，分析在30分鐘、40分鐘、50分鐘下色譜峰面積以及色譜峰數(shù)量的變化，觀察得出，在30～50分鐘范圍內(nèi)隨著溫度的上升，色譜峰數(shù)量增加且色譜峰面積增大，因此最終確定以50分鐘作為萃取時(shí)間是本實(shí)驗(yàn)的最佳條件。

3香氣的定性定量方法：①將采集到的揮發(fā)物的質(zhì)譜圖與NIST標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)進(jìn)行匹配進(jìn)行定性②根據(jù)揮發(fā)物的峰面積確定香氣濃度大小變化。

(二)結(jié)果與討論

圖1是未加工的黃蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖

表1.未加工的黃蠶蛹中的香氣成分匯總

圖2是水煮后的黃蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖

表2.水煮后的黃蠶蛹中的香氣成分匯總

圖3是經(jīng)油炸后的黃蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖

表3.經(jīng)油炸后的黃蠶蛹中的香氣成分匯總

圖4黃蠶蛹制成凍干粉后的香氣成分的總離子流圖

表4.黃蠶蛹凍干粉中的香氣成分匯總

圖5是未加工的黑蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖

表5.未加工的黑蠶蛹中的香氣成分匯總

圖6是水煮后的黑蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖

表6.水煮后的黑蠶蛹中的香氣成分匯總

圖7是經(jīng)油炸后的黑蠶蛹中的香氣成分的總離子流圖

表7.經(jīng)油炸后的黑蠶蛹中的香氣成分匯總

圖8黃蠶蛹制成凍干粉后的香氣成分的總離子流圖

表8.黑蠶蛹凍干粉中的香氣成分匯總

統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明：

(一)未經(jīng)加工的黃蠶蛹共檢測(cè)出13種物質(zhì)，包括5種烷烴(十五烷、2，6，10-三甲基十四烷、2，6，10-三甲基十二烷、二十一烷、二十六烷)、7種脂肪酸(十四碳酸、十五碳酸、9-十六碳一烯酸、十六酸、油酸、亞油酸、硬脂酸)、1種酯(雙-(2-乙基己基)-鄰苯二甲酸甲酯)；這些脂肪酸、烷烴、酯共同構(gòu)成了蠶蛹的特征香氣組成，并且這些揮發(fā)性成分極有可能是蠶蛹次生代謝途徑產(chǎn)生的信息激素組群物質(zhì)，在蠶蛹變態(tài)發(fā)育中起著重要的信息傳導(dǎo)作用，同時(shí)也是蠶蛹食材的主要特征香氣的貢獻(xiàn)物質(zhì)。其中脂肪酸是含量最大的一類香氣成分，并且保留時(shí)間為13.804min的十六烷酸含量最多，其次含量多的是烷烴類物質(zhì)，可見揮發(fā)性烷烴也是昆蟲體內(nèi)的重要信息激素類物質(zhì)，含量最少的是酯類。

水煮后的黃蠶蛹中檢測(cè)出11種香氣物質(zhì)，包括3種烷烴(2，6，10-三甲基十二烷、2，6，10-三甲基十四烷、二十一烷)、6種脂肪酸(十四烷酸、十五烷酸、9-十六碳一烯酸、十六烷酸、油酸、亞油酸)、1種醇(4，8，12，15-15-5甲基-[9，3，1]雙環(huán)-十五-3，7-二亞乙基三胺-12-1-醇)、1種烯烴(十六烯)以及1種酯(雙-(2-乙基己基)-鄰苯二甲酸甲酯)，特征香氣種類與未經(jīng)加工的黃蠶蛹類似，以脂肪酸、烷烴、酯為其特征香氣組群，同樣含量最高的是脂肪酸類香氣成分，但經(jīng)過水煮處理，黃蠶蛹中各類香氣成分均有不同程度減少，也可能在加熱條件下分解成其它成分。

經(jīng)油炸后黃蠶蛹中香氣成分為14種，包括2種烷烴(2，6，10-三甲基十四烷、9-甲基-十九烷)、7種脂肪酸(二甲基-7-十六碳一烯酸、3，7，11，15-四甲基-2-十六碳一烯酸、十四烷酸、十六烷酸、9，12-十八碳二烯酸、9-十八碳一烯酸、硬脂酸)、3種醇(11-十六炔-1-醇、R-Z-2，13-十六碳一烯醇、(R)-(-)-(Z)-14甲基-8-十六烯-1-醇)以及2種酯(丁基辛基-1，2-苯二羧酸酯、雙-(2-乙基己基)-鄰苯二甲酸甲酯)；特征香氣種類也與未經(jīng)加工的黃蠶蛹類似，以脂肪酸、烷烴、酯為其特征香氣組群，同樣含量最高的是脂肪酸類香氣成分，但經(jīng)過高溫油炸處理，黃蠶蛹中各類香氣成分均大量減少，只有原本含量高的幾種香氣成分還能定量，如十六碳酸，其它種類的香氣成分只剩痕量。

黃蠶蛹凍干粉中香氣成分為13種，包括6種烷烴(2，6，10-三甲基十四烷、2，6，10-三甲基十二烷、十六烷、十七烷、二十一烷、二十七烷)、6種酸(十四烷酸、十八碳一烯酸、十五烷酸、9-十六碳一烯酸、十六烷酸、硬脂酸)、1種酯(雙-(2-乙基己基)-鄰苯二甲酸甲酯)。特征香氣種類與未經(jīng)加工的黃蠶蛹類似，以脂肪酸、烷烴、酯為其特征香氣組群，同樣含量最高的是脂肪酸類香氣成分，經(jīng)過凍干處理的黃蠶蛹中各類香氣成分均有提高，這與蠶蛹中水分的減少有關(guān)，同時(shí)，凍干處理未經(jīng)高溫處理，可以極大地保留蠶蛹的特征香氣成分。

(二)未經(jīng)加工的黑蠶蛹共檢測(cè)出10種特征香氣物質(zhì)，包括4種烷烴(2，6，10-三甲基十二烷、二十一烷、2，6.，10-三甲基十四烷、2，6，10，15-四甲基十七烷)、4種脂肪酸(順-11-十六碳一烯酸、十六烷酸、油酸、硬脂酸)、一種烯烴(十六烯)、1種醇(4，8，12，15，15-五甲基-[9，3，1]雙環(huán)-十五-3，7-二亞乙基三胺-12-1-醇)、1種酯(雙-(2-乙基己基)-鄰苯二甲酸甲酯)。黑色蠶蛹中特征香氣種類與黃蠶蛹大體類似，也是以脂肪酸、烷烴、酯為其特征香氣組群，但是脂肪酸、烷烴、酯的種類及含量更少，這可能與蠶蛹成蛹溫度的影響有關(guān)，黃蠶蛹在高溫下成蛹，更利于次生代謝產(chǎn)物的生成與積累，使得蠶蛹變態(tài)發(fā)育更加完善；黑色蛹在較低溫度下成蛹，低溫不利于次生代謝進(jìn)程，使得信息激素物質(zhì)沒有充分形成所導(dǎo)致，這也是市場(chǎng)上黑蛹比黃蛹便宜的一種原因。

在經(jīng)水煮后的黑蠶蛹中檢測(cè)出香氣物質(zhì)為12種，包括3種烷烴(十六烷、2，6，10-三甲基十四烷、二十一烷)、4種脂肪酸(9-十六碳一烯酸、十六烷酸、十八碳一烯酸、硬脂酸)、2種酯(10-羥基-11-對(duì)氧氮己環(huán)-4-十一烷酸丙酯、雙-(2-乙基己基)-鄰苯二甲酸甲酯)、1種烯烴(十六烯)、1種酮(3，6，7，8-丙烯酸氫糠酯-3，3，6，6-四甲基-六環(huán)酮)、1種醇(4，8，12，15，15-五甲基-[9，3，1]雙環(huán)-十五3，7-二亞乙基三胺-12-1-醇)。特征香氣種類與未經(jīng)加工的黑蠶蛹類似，以脂肪酸、烷烴、酯為其特征香氣組群，同樣含量最高的是脂肪酸類香氣成分，但經(jīng)過水煮處理，黑蠶蛹中各類香氣成分均有不同程度減少，也可能在加熱條件下分解成其它成分。

經(jīng)油炸后黑蠶蛹中香氣成分為11種，包括3種烷烴(二十一烷、2，6，10-三甲基十二烷、二十六烷)、4種脂肪酸(二甲基-反-7-十六碳一烯酸、硬脂酸、十八碳一烯酸、十六烷酸)、2種醇(E，Z-2，13-十八碳二烯-1-醇、11-十六炔-1-醇)、1種酯(雙-(2-甲基丙基)-鄰苯二甲酸二酯)、1種酮(6，10，14-三甲基十五烷酮)；特征香氣種類也與未經(jīng)加工的黑蠶蛹類似，以脂肪酸、烷烴、酯為其特征香氣組群，同樣含量最高的是脂肪酸類香氣成分，但經(jīng)過高溫油炸處理，黑蠶蛹中各類香氣成分均大量減少。

黑蠶蛹凍干粉香氣成分為16種，包括5種烷烴(2，6，10-三甲基十四烷、二十一烷、二十六烷)、4種脂肪酸(9-十六碳一烯酸、十六烷酸、9，12-十八碳二烯酸、硬脂酸)、3種酯(雙-(2-甲基丙基)-鄰苯二甲酸二酯、10-羥基-11-對(duì)氧氮己環(huán)-4基-十一烷酸丙酯、丁基辛基-1，2-苯二羧酸酯)、1種烯烴(十六烯)。特征香氣種類與未經(jīng)加工的黑蠶蛹類似，以脂肪酸、烷烴、酯為其特征香氣組群，同樣含量最高的是脂肪酸類香氣成分，經(jīng)過凍干處理的黑蠶蛹中各類香氣成分均有提高，這與蠶蛹中水分的減少有關(guān)，同時(shí)，凍干處理未經(jīng)高溫處理，可以極大地保留蠶蛹的特征香氣成分。

三、結(jié)論

1.不論黃蠶蛹還是黑蠶蛹，脂肪酸、烷烴、酯、醇共同構(gòu)成了蠶蛹的特征香氣組成，并且這些揮發(fā)性成分極有可能是蠶蛹次生代謝途徑產(chǎn)生的信息激素組群物質(zhì)，在蠶蛹變態(tài)發(fā)育中起著重要的信息傳導(dǎo)作用，同時(shí)也是蠶蛹食材的主要特征香氣的貢獻(xiàn)物質(zhì)。其中脂肪酸是含量最大的一類香氣成分，并且保留時(shí)間為13.804min的十六烷酸含量最多，其次含量多的是烷烴類物質(zhì)，可見揮發(fā)性烷烴也是昆蟲體內(nèi)的重要信息激素類物質(zhì)，含量最少的是酯類。

2.黑色蠶蛹中特征香氣種類與黃蠶蛹大體類似，但是脂肪酸、烷烴、酯的種類及含量更少，這可能與蠶蛹成蛹溫度的影響有關(guān)，黃蠶蛹在高溫下成蛹，更利于次生代謝產(chǎn)物的生成與積累，使得蠶蛹變態(tài)發(fā)育更加完善；黑色蛹在較低溫度下成蛹，低溫不利于次生代謝進(jìn)程，使得信息激素物質(zhì)沒有充分形成所導(dǎo)致，這也是市場(chǎng)上黑蛹比黃蛹便宜的一種原因。

3.高溫加工處理(水煮、油炸)會(huì)顯著減少蠶蛹中香氣物質(zhì)的種類和含量，同時(shí)產(chǎn)生一些其它揮發(fā)性成分，如酮類；經(jīng)過凍干處理的蠶蛹中各類香氣成分均有提高，這與蠶蛹中水分的減少有關(guān)，同時(shí)，凍干處理未經(jīng)高溫處理，可以最大限度地保留蠶蛹的特征香氣成分。

4.本發(fā)明不僅提供了蠶蛹特征香氣的檢測(cè)方法，更是提供了一種可推廣至各類昆蟲信息激素的檢測(cè)和定量方法，對(duì)于進(jìn)一步研究昆蟲的次生代謝過程、生物學(xué)交互作用以及動(dòng)植物生態(tài)學(xué)相互影響都具有一定輔助作用。

以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。