一種中藥材飲片品質評價方法與流程

本發明涉及中藥材領域，特別涉及一種新的中藥材飲片質量評價方法。

背景技術：

中藥飲片的質量是其發揮臨床療效、防病、治病的基礎。然而，目前中藥飲片來源繁多，市場上的藥材質量參次不齊，且缺乏科學的等級評價方法，這嚴重影響了中藥飲片產業的發展，導致中藥的臨床療效得不到保障。

因此，怎樣控制中藥飲片的質量，保證中藥飲片的安全性和有效性，是目前中藥行業所面臨的難題。對中藥飲片進行等級劃分，按照飲片的質量優劣進行定價銷售，實行優質優價服務，不僅能為中藥的臨床療效提供保障，同時也能促進中藥飲片的開發和利用，是一項利國利民的重要舉措。

目前有很多方法來評價中藥飲片的質量優劣，以期控制中藥飲片的質量，例如，傳統飲片評價方法、有效含量評價法、指紋圖譜、生物活性等等。目前藥材等級評價主要有3種方法模式：第一種，性狀評價模式，主要通過外觀形態進行藥材等級評價；第二種，成分評價方法模式，即通過測定藥材中某一種或是多種指標性成分來對藥材飲片進行質量評價；第三種，產地論藥材的評價方法模式，有些人認為只要是道地產區的道地藥材，那就是比其它地方的藥材質量要好，不論大小、不論化學成分質量就比其它產地的好。通過文獻研究發現，這3種評價模式相互之間不能很好的統一，有時甚至是相互矛盾的。如傳統方法認為個頭最大的藥材飲片質量最好，但是有很多文獻報道了個頭大的藥材中，其指標性成分卻不一定是最高的。有研究者試圖統一3種評價模式，但是未見成功報道，行業內需要更為合理的飲片分級評價模式。

鑒于目前中藥飲片等級評價不完善，本發明建立了一種新的飲片等級評價模式，為更好的控制中藥飲片質量，規范飲片市場提供了良好的依據。

技術實現要素：

因此，本發明的目的為提供一種中藥材飲片品質評價方法，其包括以下步驟：

1)測定藥材飲片的客觀指標，包括厚度、長度、寬度和質量；

2)測定藥材飲片中成分的含量，包括質量或質量百分比；

3)根據下列公式計算質量常數A、相對質量常數A’和百分質量常數A％，

$A=\frac{M}{h^2}$

其中，M為單位藥材飲片中成分的質量，h為單位藥材飲片的厚度，

當采用n個單位藥材飲片進行評價時，則

$A=\frac{\frac{M^{,}}{n}}{{\left(\frac{H}{n}\right)}^2}=\frac{{\mathrm{nM}}^{,}}{H^2}$

其中M’為n個單位藥材飲片中成分的質量，H為n個單位藥材飲片的厚度，n為藥材飲片的單位數，

$A^{\′}=\frac{A}{c^{\′}}$

其中，A為利用上式計算的質量常數，c’為相關標準中規定的對應成分的含量標準，包括質量或者質量百分比，

$A\%=\frac{Ai}{A_{\max }}\×100\%=\frac{A_i^{\′}}{A_{\max }^{\′}}\×100\%$

其中，A_i為利用上式計算的藥材飲片的質量常數，A_max為利用上式計算的各批次中最大的質量常數；A’_i為利用上式計算的藥材飲片的相對質量常數，A’_max為利用上式計算的各批次中最大的相對質量常數；

4)根據計算得到的質量常數A、相對質量常數A’和百分質量常數A％評價藥材飲片，并將其分級。

可以通過本領域公知的常規方法來測定藥材飲片中成分的含量，特別可以提及的是色譜法、光譜法、波譜法和滴定法，特別是高效液相色譜法。

1、質量常數A

本發明的質量常數A定義為單位藥材中成分質量/單位藥材厚度的平方，即：

在實際應用中推薦使用多單位藥材進行評價。對非切制藥材，h＝1。所選用成分可以根據需求自由選擇，推薦使用中國藥典中指標成分。

由于中藥飲片種類繁多，包括根莖類、果實種子類、花葉類和皮類等，形態各異。為簡化研究，我們將中藥飲片分為兩大類，一類是經過切制的中藥飲片，主要包括根莖類飲片，如常見的甘草、黃芩、白芍、赤芍、牡丹皮、玄參、當歸、川牛膝、牛膝、白鮮皮、細辛等；另一類是沒有經過切制的飲片，主要包括果實種子類和花類飲片，如常見的羅漢果、枸杞、夏枯草、芡實等。不同形態的飲片，其質量常數A具有不同的表現形式。

1.1切制飲片

1.1.1規則的切制飲片

這類飲片主要是一些根莖類的飲片，根據根莖的粗細、大小等，加工成薄片狀或是小段。其規格厚度通常為：片形飲片分為厚片2～4mm，薄片1～2mm，極薄片0.5mm以下；片形越薄，說明切制的工藝越好，通常也認為越薄的飲片其質 量越好；段形飲片分為長段10～15mm，短段5～10mm。

為簡化研究，將單位藥材視為標準的圓柱體，則：

單位藥材體積V＝πr²h(r是半徑，h是厚度)

單位藥材質量m＝ρV＝ρπr²h(ρ是密度)

單位藥材中成分質量M＝cm＝cρπr²h(c是成分含量)

則

由上式可以看出質量常數A與飲片的大小(πr²)和成分含量(c)成正比，與飲片的厚薄(h)成反比。這意味著個頭越大、指標成分含量越高且切制越薄的飲片則其質量常數越大，對應的飲片等級也越高。這與通常所認為的個頭大，含量高的飲片質量好相吻合。

由于測量單個藥材的質量常數較為困難，且存在個體誤差，因而推薦實際的使用中，采用測量多個藥材取平均值的做法，即：

$A=\frac{{\mathrm{\Σ}}_{i=1}^n\frac{{{\mathrm{ci\ρ\πr}}_i}^2{h}_i}{{h_i}^2}}{n}$

(n為所研究藥材的個數)

假設藥材的厚度均勻，則上式可變為

$A=\frac{1}{n}{\mathrm{\Σ}}_{i=1}^n\frac{c_i{{\mathrm{\ρ\πr}}_i}^2{h}_i}{{\left(\frac{H}{n}\right)}^2}=n\frac{{\mathrm{\Σ}}_{i=1}^n{c}_i{{\mathrm{\ρ\πr}}_i}^2{h}_i}{H^2}=\frac{{\mathrm{nM}}^{\′}}{H^2}---\left(1\right)$

H為所研究藥材的總厚度，M′為所研究藥材中指標成分的總質量。

在飲片加工的過程中，部分廠家將藥材加工成橢圓形的薄片，而不是圓形的，這就使得公式(1)不能正常使用。對于這類橢圓形薄片，為了可以和其他廠家的圓形薄片更好的進行比較，我們在公式里引入一個片形系數a，a為橢圓形短半徑

與長半徑的比值，則公式(1)可化為公式(2)，如下。

$A=a\×\frac{{\mathrm{nM}}^{\′}}{H^2}=\frac{r1}{r2}\×\frac{{\mathrm{nM}}^{\′}}{H^2}---\left(2\right)$

(r₁為短半徑，r₂為長半徑)

1.1.2不規則的切制飲片

對于不規則的切制藥材，如玄參、當歸等，其飲片形狀為不規則的薄片，因此不能選用上述公式來進行等級評價，為了能評價飲片的整體質量，包括飲片的個頭大小、厚薄程度和成分含量高低，我們在一批飲片中隨機選取100cm長的飲片，測定其總重量和飲片的平均厚度。在此我們認為100cm長的飲片為一個單位長度飲片，則其質量常數A可用公式(3)來計算，如下：

$A=\frac{M^{\′}}{h^{\′2}}---\left(3\right)$

h’為所研究藥材的平均厚度，M′為所研究藥材中指標成分的總質量。

從公式(3)中可以看出，當藥材含量越高且個頭越大切制的厚度越薄，則質量常數越大。根據不同飲片的情況，單位長度可以進行適當的增加或減少。

1.2非切制的飲片

這類飲片主要包括果實類、種子類和花類的整藥材，如羅漢果，枸杞，夏枯草等，或者質量優劣與長短無關只與粗細有關，且不需要切制的根莖類藥材如遠志，細辛等。該類藥材h值為1。則A＝M。

1.2.1對于果實類和種子類的飲片藥材

將果實和種子類藥材簡化為球形物體，隨機選取n個藥材飲片為單位，則質量常數等于為：

$A=M=\frac{M^{\′}}{n}=\frac{4}{3}\frac{{\mathrm{\Σ}}_{i=1}^n{c}_i{r_i}^3}{n}---\left(4\right)$

M′為多個藥材中一種成分的總質量，r_i為單位藥材的半徑，c_i為單位藥材中一種成分的質量百分含量，ρ為藥材的密度，n為藥材的個數。

從公式(4)中可以看出，當藥材含量越高且個頭越大，則質量常數越大。

1.2.2對于不需切制的根莖類飲片藥材

這類飲片藥材一般都沒有經過切制，外形都是一整段的，且將飲片藥材掰斷不會影響藥材飲片的質量，其質量優劣只與飲片的粗細有關，與飲片的長短無關。因此評價這類飲片藥材，選取單位長度的飲片，測定其成分重量。

A＝M (5)

M為單位長度飲片的總質量。從公式(5)中可知，當藥材含量越高且藥材越粗，則認為藥材的質量越好。

1.2.3形狀不規則的飲片藥材

對于不規則的藥材，如花、全草等，同樣可以采用A＝M進行質量常數的評價。

2、相對質量常數A’

對于檢測指標為單個成分的中藥飲片，用上述方法來評價藥材等級較為方便。然而對檢測指標為兩個或多個成分的藥材，如果還是使用上述飲片質量常數，就面臨如何將基于不同指標成分的質量常數進行加和的問題。如果只是簡單的將質量常數進行加和，必然會引起因為不同指標成分含量差異較大而導致的某個質量常數在總質量常數中占比過大，導致質量評價被某個質量所主導，出現評價誤差。為了解決這一問題，我們引入飲片相對質量常數A'。

我們規定相對質量常數A’為質量常數A除以指標成分的規定含量標準，即：

$A^{\′}=\frac{A}{c^{\′}}$

(c'為有關標準中規定的指標成分含量標準)

當藥材中含有多個指標成分時，推薦采用相對質量常數之和進行等級的評價。即：

$A^{\′}=\frac{A1}{c1}+\frac{A2}{c2}+...\frac{An}{cn},(n\≥1)---\left(6\right)$

A1、A2…An為藥材中不同成分對應的質量常數，c1、c2…cn為藥材中相關標準規定的各個不同成分的最低含量，通過A'可以很好的解決測定兩個或是多個成分的藥材的質量評價。

3、百分質量常數A％

對于同種飲片，我們通過飲片質量常數A或相對飲片質量常數A'可以很好的來評價藥材質量等級的優劣，可以用很直觀明了的用具體數值來區分藥材等級。

但是不同的藥材之間，所得到的飲片質量常數A或相對飲片質量常數A'的數值范圍區間差別較大。比如，甘草飲片的相對質量常數范圍為2.8～15.4；黃芩飲片的相對質量常數為4.3～49.1。因而可以看出，不同飲片的質量常數和相對飲片質量常數的范圍區間存在較大的差異。這種差異對于單一藥材的評價不會導致任何問題，但是對于多種藥材放在一起評價時容易導致質量評價混亂，不利于市場推廣。這好比我們要評價英語、數學和語文成績最好的學生。英語總分為50分，考的最好成績為45分；數學總分為100分，考的最好成績為90分；語文為150分，考的最好成績為135分。因此英語、數學和語文最好的考試成績為45、90和135分。如果不了解由于是總成分不一樣導致3個學科的最高分不同，那么一定引起疑問：為什么3個學科的成績差別那么大呢？是不是英語很難呢？就像甘草和黃芩的相對質量常數差別較大，有可能引起使用者的疑問：是不是甘草的質量比黃芩差呢？很顯然不是這樣的。因而，我們定義了百分質量常數A％，將目前能夠檢測到的最大相對質量常數設為100％，其余相對質量常數與最大相對質量常數的百分比為百分質量常數。

$A\%=\frac{Ai}{A_{\max }}\×100\%=\frac{A_i^{\′}}{A_{\max }^{\′}}\×100\%---\left(7\right)$

A_i為某批藥材飲片的質量常數，A_max為各批次中最大的質量常數；A’_i為某批藥材飲片的相對質量常數，A’_max為各批次中最大的相對質量常數。

通過A％的值，我們可以將不同藥材之間的飲片質量常數的范圍區間相平衡，使范圍大的區間縮小，使范圍小的區間擴大，目的是讓不同藥材所得到的百分質量常數數值基本處于同一水平狀態，從而可以為使用者直觀的評價不同藥材飲片之間的等級優劣提供幫助。

質量常數同時涵蓋了大小、厚度和含量三個關鍵因素，即對應外觀評價指標中藥材的大小、藥材的厚薄和成分評價中的指標成分含量，能夠綜合評價藥材的質量等級。而且質量常數是數字常數，不存在主觀因素，能夠客觀、準確的評價不同廠家、產地的藥材質量，能夠將所有藥材批次放置在統一尺度下進行比較，有利于規范全國藥材市場，推動全國藥材質量統一。

本發明所述的“藥材飲片”是指中藥飲片或中藥材。中藥材和中藥飲片并沒有絕對的界限，中藥飲片包括了部分經產地加工的中藥切片(包括切段、塊、瓣)、原形藥材飲片以及經過切制(在產地加工的基礎上)、炮炙的飲片。在本發明中的“藥材”、“飲片”和“藥材飲片”可以互換使用。

本發明所述的“百單位”指以100個任何單位表示的計量標準，特別指100cm的藥材總長度。

本發明未特殊指明的計量單位，例如厚度、寬度、長度、半徑、密度、質量、重量等，均可用其常規計量單位描述。特別地，厚度、寬度、長度和半徑的計量單位為cm，密度的計量單位為g/cm³，質量或重量的計量單位為g。

本發明所述的“相關標準”是指國家、省市、行業、協會或企業等制定的藥材飲片質量標準，例如《中國藥典》、北京市藥材標準、中國中藥協會團體標準等。上述標準中，根據不同藥材飲片的成分含量情況，一般都會規定對應的含量標準。這個含量標準有時會稱為最低含量、限量標準等。原則上低于該含量標準的藥材飲片是不合格的藥材飲片，不能在臨床使用。

附圖說明

圖1A-1V為實施例1中22批黃芩飲片的外觀照片。其中，圖1A為天齊堂A-001，圖1B為天齊堂A-002，圖1C為天齊堂A-003，圖1D為天齊堂A-004，圖1E為天齊堂B-001，圖1F為天齊堂B-002，圖1G天齊堂B-003，圖1H為天齊堂B-004，圖1I為天齊堂C-001，圖1J為天齊堂C-002，圖1K為天齊堂C-003，圖1L為天齊堂C-004，圖1M為天齊堂D-001，圖1N為天齊堂D-002，圖1O為天齊堂D-003，圖1P為天齊堂D-004，圖1Q為天齊堂家統-1，圖1R為天齊堂家統-2，圖1S為天齊堂野統-1，圖1T為天齊堂野統-2，圖1U為協和圓統片，圖1V為協和斜選片。

圖2為實施例1中22批黃芩飲片的質量常數折線圖。

圖3為實施例1中22批黃芩飲片的相對質量常數折線圖。

圖4為實施例1中22批黃芩飲片的百分質量常數折線圖。

圖5A-5Y為實施例2中25批甘草飲片的外觀照片。其中，圖5A為天齊堂A-001，圖5B為天齊堂A-002，圖5C為天齊堂B-001，圖5D為天齊堂B-002，圖5E為天齊堂B-003，圖5F為天齊堂B-004，圖5G為天齊堂C-001，圖5H為天齊堂C-002，圖5I為天齊堂C-003，圖5J為天齊堂C-004，圖5K為天齊堂D-001，圖5L為天齊堂D-002，圖5M為天齊堂D-003，圖5N為天齊堂D-004，圖5O為天齊堂選圓-1，圖5P為天齊堂選圓-2，圖5Q為天齊堂統圓-1，圖5R為天齊堂統圓-2，圖5S為北京三和A，圖5T為北京三和B，圖5U為滬譙一等品，圖5V為滬譙二等品，圖5W為協和成藥選貨，圖5X為協和成藥統貨-1，圖5Y為協和成藥統貨-2。

圖6為實施例2中甘草飲片的相對質量常數折線圖。

圖7為實施例2中甘草飲片的百分質量常數折線圖。

圖8A-8K為實施例3中11批牡丹皮飲片的外觀照片。其中，圖8A為北京三和A，圖8B為北京三和B，圖8C為天齊堂統貨-1，圖8D為天齊堂統貨-2，圖8E 為天齊堂選貨-1，圖8F為天齊堂選貨-2，圖8G為滬譙一等品，圖8H為滬譙二等品，圖8I為北京華邈一等品，圖8J為北京華邈二等品，圖8K為北京華邈三等品。

圖9為實施例3中11批牡丹皮飲片的質量常數折線圖。

圖10為實施例3中11批牡丹皮飲片的相對質量常數折線圖。

圖11為實施例3中11批牡丹皮飲片的百分質量常數折線圖。

圖12A-12J為實施例4中10批羅漢果飲片的外觀照片。其中，圖12A為北京三和大果，圖12B為北京三和小果，圖12C為北京仟草中果，圖12D為沁漓大果，圖12E為百壽元大果-1，圖12F為百壽元大果-2，圖12G為百壽元大果-3，圖12H為百壽元大果-4，圖12I為龍脊特大果-1，圖12J為龍脊特大果-2。

圖13為實施例4中10批羅漢果飲片的質量常數折線圖。

圖14為實施例4中10批羅漢果飲片的相對質量常數折線圖。

圖15為實施例4中10批羅漢果飲片的百分質量常數折線圖。

圖16A-16D為實施例5中4批細辛飲片的外觀照片。其中，圖16A為北京三和A，圖16B為北京三和B，圖16C為天齊堂統貨-1，圖16D為天齊堂統貨-2。

圖17為實施例5中4批細辛飲片的質量常數折線圖。

圖18為實施例5中4批細辛飲片的相對質量常數折線圖。

圖19為實施例5中4批細辛飲片的百分質量常數折線圖。

圖20A-20I為實施例6中9批當歸飲片的外觀照片。其中，圖20A為北京三和A，圖20B為北京三和B，圖20C為天齊堂選片-1，圖20D為天齊堂選片-2，圖20E為天齊堂統片-1，圖20F為天齊堂統片-2，圖20G為北京華邈一等品，圖20H為北京華邈二等品，圖20I為北京華邈三等品。

圖21為實施例6中9批當歸飲片的質量常數折線圖。

圖22為實施例6中9批當歸飲片的相對質量常數折線圖。

圖23為實施例6中9批當歸飲片的百分質量常數折線圖。

圖24A-24K為實施例7中11批玄參飲片的外觀照片。其中，圖24A為北京三和A，圖24B為北京三和B，圖24C為天齊堂統貨-1，圖24D為天齊堂統貨-2，圖24E為華邈一等品，圖24F為華邈二等品，圖24G為華邈三等品，圖24H為滬譙二等品，圖24I為滬譙三等品，圖24J為金貴選片-1，圖24K為金貴選片-2。

圖25為實施例7中11批玄參飲片的質量常數折線圖。

圖26為實施例7中11批玄參飲片的相對質量常數折線圖。

圖27為實施例7中11批玄參飲片的百分質量常數折線圖。

具體實施方式

下面通過以下具體實施例詳細說明本發明，但應理解其僅是為了說明本發明的技術方案并不以任何方式限制本發明的范圍。

實施例1黃芩飲片的分級與質量評價

黃芩史載于《神農本草經》，為唇形科植物黃芩Scutelaria baicalensis Georgi的干燥根。目前，黃芩藥材或飲片的質量等級評價主要是通過外觀性狀來評價，外觀性狀評價屬于傳統評價方法。經調查，書中記載的很多黃芩等級在市場流通中已很少見到或已消失，現僅能見到部分地區將條芩分為一等、統貨；其飲片分為選裝片、統貨飲片等；枯芩分為大片、統貨飲片；根據不同產家炮制工藝的不同，又分類圓形薄片或是斜片等(李先端，顧雪竹，程立平，毛淑杰.黃芩飲片規格分級市場情況調查及有關古今文獻論述[J].中藥材,2014,37(1):150-152.)。由于沒有統一的飲片質量標準規定，近年來，對黃芩需求逐年增加，原有商品等級標準已不太適合黃芩飲片流通現狀。

本發明對不同批次、不同產家的黃芩飲片進行含量分析與外觀測定，將傳統飲片分級方法與現代儀器檢測法有機結合起來，通過計算飲片的質量常數A、相對質量常數A’和百分質量常數A％，從而對不同等級的黃芩飲片進行質量評價與等級劃分。

1)儀器與試劑

分析高效液相 島津SHIMADZU-20系列；

KQ-3200E型超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司；

十萬分之一電子分析天平德國賽多利斯股份有限公司；

甲醇色譜級(Thermo Fisher Scientific，USA)；娃哈哈純凈水(浙江，杭州)；磷酸(85％優級純，國藥集團化學試劑有限公司)；黃芩苷對照品(批號：110715-201117)，購自中國食品藥品鑒定研究院。

2)藥材

22批黃芩飲片廠家、產地、規格及批號見下表1，樣品照片見圖1A-1V。

表1黃芩飲片信息

注：/-為無批號。

3)黃芩飲片外觀指標測定

在購買的22批黃芩飲片中，有兩種不同形狀的飲片，一種是類圓形片，即天齊堂A、B、C、D、野統片和協和圓統片；一種是橢圓形片，即天齊堂家統片和斜統片。對黃芩飲片進行外觀指標的測定，類圓形的黃芩飲片測定百單位的厚度、寬度與質量(由于是類圓形的，所以飲片的長度即是飲片的寬度，測定一個即可)，橢圓形的黃芩飲片測定百單位的厚度、長度、寬度和質量。結果見下表2，表2中的數據均為隨機選取100個飲片為測量對象。

表2黃芩飲片外觀指標

4)色譜條件

色譜柱Merck Chromolith RP-18e(4.6mm×100mm)；流動相A0.05％磷酸(含0.01mol/L磷酸二氫鉀)-B乙腈，梯度洗脫，0～15min，8％～14％B；15～25min，14％～16％B；25～45min，16％～38％B，流速2mL/min，柱溫35℃，進樣量10μL；檢測波長為280nm。理論板數按黃芩苷峰計算應不低于2500。

參照文獻“章軍，劉宇政，王躍生，劉安.HPLC同時測定葛根芩連湯中12個有效成分的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(15):68-72”所載的標準曲線方程對黃芩飲片進行測定。

5)對照品溶液的制備

取在60℃減壓干燥4小時的黃芩苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每l ml含444.4μg的溶液，即得。

6)供試品溶液的制備

將各批次黃芩藥材粉碎成粉末，取粉末約0.3g，精密稱定，加70％乙醇40ml，加熱回流3小時，放冷，濾過，濾液置100ml量瓶中，用少量70％乙醇分次洗滌容器和殘渣，洗液濾入同一量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻。精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

7)黃芩苷含量測定

取黃芩苷對照溶液配制成5個濃度，依次是8.888、17.776、44.44、88.88、444.4mg/L進樣10μL分析，以峰面積對進樣濃度作線性回歸，所得回歸方程為Y＝16391.24X-9600，r＝0.9999。結果表明黃芩苷在0.0888～4.444μg峰面積呈良好的線性關系。

通過文獻“章軍，劉宇政，王躍生，劉安.HPLC同時測定葛根芩連湯中12個有效成分的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(15):68-72”中的標準曲線方程與黃芩飲片樣品中黃芩苷的峰面積，計算出黃芩飲片中黃芩苷的含量，結果見下表3。

表3各藥材中的黃芩苷含量

由表3中測定的結果可知，22批黃芩樣品中黃芩苷的含量均符合《中國藥典》黃芩下黃芩飲片中黃芩苷的含量不得低于8.0％的規定。說明22批黃芩飲片均是合格的飲片藥材。

8)黃芩飲片的質量常數的測定

在22批黃芩飲片中，存在兩種形狀，對類圓形的飲片，用公式(1)計算飲片質量常數A；對于切制成橢圓形的飲片，用公式(2)計算飲片的質量常數A。

通過上述兩個公式與含量測定的結果，通過公式(6)和公式(7)分別計算出不同等級黃芩飲片的相對質量常數A'和百分飲片質量常數A％，結果見下表4。

表4黃芩飲片質量常數結果

為了更好更直觀的看出22批黃芩飲片之間質量常數的差異，將表4做成折線圖，結果見圖2-4。

9)結論

從表4中可以看出，通過計算飲片的各質量常數后，不同等級的飲片可以很好的區分開來。從圖2-4可以看出，天齊堂的4個等級的黃芩飲片質量常數從A等級、B等級、C等級和D等級逐漸減小，這與傳統飲片分級方法的結果相同，而其余6批未知等級的黃芩飲片，其飲片質量常數都分布在A等級和D等級之間，說明通過飲片質量常數可以用來評價黃芩飲片的質量等級優劣。

根據所計算出的三種飲片質量常數，可對黃芩飲片進行質量等級劃分。可將黃芩飲片分為3個等級，一級黃芩飲片規定百分質量常數≥80，相對質量常數≥4.91，質量常數≥0.39；二級黃芩飲片規定百分質量常數＜80且≥30，相對質量常數＜4.91且≥1.84，質量常數＜0.39且≥0.15；三級黃芩飲片規定百分質量常數＜30，相對質量常數＜1.84，質量常數＜0.15。對黃芩飲片進行質量等級劃分，3個等級范圍是用已測的藥材飲片進行設定的，在測定了更多飲片后，可以對這3個等級范圍進 行修改和修正，從而更好的來評價黃芩飲片的質量優劣。

實施例2甘草飲片的分級與質量評價

甘草為豆科甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、脹果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.和光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根莖。2010版《中國藥典》(一部)中規定甘草的含量測定指標為黃酮類成分甘草苷和皂苷類成分甘草酸。近年來，其國內外巿場需求量很大，且呈逐年遞增趨勢，已被廣泛用于醫藥、食品、煙草、飼料及化妝品等行業(于福來，甘草優良種質遴選指標與傳粉特性研究[D]：北京中醫藥大學，2012)。藥用甘草野生資源主要分布于我國西北干旱區域的溫帶荒漠區和溫帶草原區，包括了內蒙古、寧夏、青海、甘肅、山西、河北省的北部，遼寧、吉林、黑龍江的西部，甘肅為我國甘草種植的大省之一，也是甘草的道地產區(張林林.油松節藥材與甘草飲片質量標準研究[D].北京:中國協和醫科大學,2009.)。近年來，由于對甘草的需求量與日俱增，誘發了對野生甘草的肆意挖采，造成了甘草野生資源的急劇下降，現在市場上流通的甘草主要都是人工種植的，但其質量能否達到野生甘草的臨床療效，還需進一步研究。現在對于甘草飲片的質量評價主要是通過傳統評價模式，通過甘草飲片的外形大小，質地等因素進行優劣區分，然而傳統評價方法是否具有科學性，還沒有得到證實。

本發明通過對不同批次、不同產家的甘草飲片進行含量分析與外觀測定，將傳統飲片分級方法與現代儀器檢測法有機結合起來，通過計算飲片質量常數，從而對不同質量的甘草飲片進行質量評價與等級劃分。

1)儀器與試劑

分析高效液相 島津SHIMADZU-20系列；

KQ-3200E型超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司；

十萬分之一電子分析天平德國賽多利斯股份有限公司；

甲醇色譜級(Thermo Fisher Scientific，USA)；娃哈哈純凈水(浙江，杭州)；磷酸(85％優級純，國藥集團化學試劑有限公司)；甘草苷和甘草酸銨對照品購自中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心。

2)藥材

25批甘草飲片廠家、產地、規格及批號見表5，樣品圖片見圖5A-5Y。

表5甘草飲片信息

注：/-為無批號。

3)甘草飲片外觀指標測定

25批甘草飲片都是類圓形飲片，因此，對甘草飲片進行外觀指標測定時，隨機選取100個甘草飲片進行測定，測定百單位飲片的厚度、寬度和重量，數據結果見表6。

表6甘草飲片外觀指標

4)色譜條件

色譜柱Merck Chromolith RP-18e(4.6mm×100mm)；流動相A 0.05％磷酸(含0.01mol/L磷酸二氫鉀)-B乙腈，梯度洗脫，0～15min，8％～14％B；15～25min，14％～16％B；25～45min，16％～38％B，流速2mL/min，柱溫35℃，進樣量10μL；檢測波長為237nm。理論板數按甘草苷峰計算應不低于5000。參照文獻“章軍，劉宇政，王躍生，劉安.HPLC同時測定葛根芩連湯中12個有效成分的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(15):68-72.”所載方法對甘草飲片進行測定。

5)對照品溶液的制備

取甘草苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加70％乙醇分別制成每lml含甘草苷14.64μg、甘草酸銨14.03μg的溶液，即得，(甘草酸質量＝甘草酸銨質量/1.0207)。

6)供試品溶液的制備

將各批次甘草藥材粉碎成粉末，取粉末約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％乙醇100ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用70％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

7)甘草苷與甘草酸的含量測定

取黃芩苷對照溶液配制成5個濃度，依次是8.888、17.776、44.44、88.88、444.4mg/L進樣10μL分析，以峰面積對進樣濃度作線性回歸，所得回歸方程為Y＝16391.24X-9600，r＝0.9999。結果表明黃芩苷在0.0888～4.444μg峰面積呈良好的線性關系。

通過文獻“章軍，劉宇政，王躍生，劉安.HPLC同時測定葛根芩連湯中12個有效成分的含量[J].中國實驗方劑學雜志,2011,17(15):68-72.”中的標準曲線方程與甘草飲片樣品中甘草苷的峰面積和甘草酸銨的峰面積，計算出甘草飲片中甘草苷和甘草酸的含量，結果見表7。

表7甘草苷和甘草酸的含量測定

由表7中測定的結果可知，不同廠家的甘草飲片甘草苷的含量差異較大，按照2015版《中國藥典》甘草項下甘草飲片中甘草苷含量不得少于0.45％，甘草酸不得少于1.80％。在25批甘草飲片樣品中，有9批甘草飲片不符合藥典規定，合格率為64％。其中甘草苷的含量差異較大，最高含量達1.67％，最低含量為0.32％；甘草酸的含量最高達2.25％，最低為1.39％。

8)甘草飲片質量常數測定

上述藥材中含量合格的16批甘草樣品中，切制形狀都是類圓形，所以飲片質量常數A可用公式(1)進行計算。

因為2015版《中國藥典》中對甘草飲片測定了兩個成分，如果計算飲片質量常數的話，會得到兩個數值，為了結合兩個成分從而對飲片質量進行綜合評價，我們計算飲片相對質量常數A'，用公式(6)；并用公式(7)計算飲片的百分質量常數A％，結果見表8。

表8甘草飲片質量常數

將表8中的相對飲片質量常數和百分質量常數制成折線圖，從而更好更直觀的來分析不同等級飲片的質量優劣，結果見圖6-7。

9)結論

從圖6-7中可以看出，天齊堂4個等級的甘草飲片，從A等級到D等級，在圖中的相對飲片質量常數的值呈現緩慢的下降趨勢，且選貨的相對質量常數大于統貨的相對質量常數，說明選貨的質量優于統貨的質量，這均符合廠家給定的飲片等級劃分。而其余廠家的飲片，根據其相對飲片質量常數的不同，北京三和的兩個飲片A等級飲片的相對質量常數大于B等級的飲片，說明A等級的飲片質量優于B等級的飲片。

根據所計算出的三種飲片常數，可對甘草飲片進行質量等級劃分。由于甘草飲片測定了兩個成分，為了評價甘草飲片的整體質量，只用相對質量常數和百分質量常數來進行質量等級評價，將甘草飲片分為3個等級，一級甘草飲片規定百分質量常數≥80，相對質量常數≥9.30；二級甘草飲片規定百分質量常數＜80且≥50，相對質量常數＜9.30且≥5.82；三級甘草飲片規定百分質量常數＜50，相對質量常數＜5.82。這3個等級范圍是用已測的藥材飲片進行設定的，在測定了更多飲片后，可以對這3個等級范圍進行修改和修正，從而更好的對甘草飲片進行質量等級評價。

在對飲片進行成分含量測定時，發現合格率僅有64％，其中天齊堂的A等級飲片，兩種成分的含量都非常低，只剛好符合《中國藥典》合格的標準，且A-002飲片所含的兩種成分含量低于《中國藥典》規定，飲片外觀呈現黃白色，究其原因，可能是炮制不規范，導致成分流失嚴重；或是被不法商販進行了成分提取，再二次出售所致。

對飲片所含成分量進行分析，發現甘草苷和甘草酸的量與飲片等級沒有正相關的關系，而是隨著等級的下降，含量越來越高，這與傳統飲片評價方法相矛盾。而通過計算飲片的相對飲片質量常數，綜合考慮了飲片外觀和成分這兩個因素后，所得到的結果與傳統飲片評價方法一致。其中，三和藥業的A等飲片、滬譙藥業的一等品、天齊堂的A等飲片和選貨所得到的相對飲片質量常數值都較大，表明飲片的質量比其余飲片質量要好，可以通過相對飲片質量常數的值來客觀的評價飲片質量優劣。

綜上所述，本發明的飲片質量評價新模式具有較高的實際使用價值，可以綜合評價飲片質量，且有較強的科學內涵，隨著該方法的深入應用，可以用于中藥飲片的質量控制與評價。

實施例3牡丹皮飲片的分級與質量評價

牡丹皮為毛茛科植物牡丹Paeonia sufruticosa Andr.的干燥根皮。牡丹皮主要含有丹皮酚、芍藥苷、羥基芍藥苷、苯甲酰基芍藥苷以及苯甲酰羥基芍藥苷等成分，其中丹皮酚是牡丹皮中主要的有效成分之一。牡丹皮的炮制為將皮迅速洗凈，潤后切薄片，曬干，本品一般呈圓形或卷曲形的薄片。牡丹皮有清熱涼血，活血化瘀的功效，可用于熱入營血，溫毒發斑，夜熱早涼，無汗骨蒸等癥的治療。在《76種藥材商品規格標準》中，介紹了牡丹皮3個品種，分別是鳳丹、連丹和刮丹，并對這3中品種的藥材進行了等級劃分，主要是根據藥材的粗細、長短和完整度來劃分評判。目前，對于牡丹皮的質量評價方法主要是通過傳統方法和化學成分方法，而這兩種評判方法都有其缺點，傳統方法缺乏科學內涵，化學成分法測定的化學成分單一，不能揭示其整體的飲片質量。

本發明通過對不同批次、不同產家的牡丹皮飲片進行含量分析與外觀指標測定，通過將傳統飲片分級方法與現代儀器檢測法有機結合起來，運用新的質量評判模式，計算牡丹皮的飲片質量常數，從而對不同質量的牡丹皮飲片進行質量評價與等級劃分。

1)儀器與試劑

分析高效液相 島津SHIMADZU-20系列；

KQ-3200E型超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司；

十萬分之一電子分析天平德國賽多利斯股份有限公司；

甲醇色譜級(Thermo Fisher Scientific，USA)；娃哈哈純凈水(浙江，杭州)；丹皮酚對照品(批號:708-9003，中國藥品生物制品檢定所)。

2)藥材

11批牡丹皮飲片廠家、產地、等級和批號信息見表9，樣品圖片見圖8A-8K。

表9牡丹皮飲片信息

3)牡丹皮飲片外觀指標測定

在購買的11批牡丹皮飲片中，飲片外形基本都是按藥典規定的片形切制，呈圓形或卷曲形的薄片，但是天齊堂選貨-2的切制的飲片厚度較厚，可能會對其質量評價造成一定的影響。由于飲片都是類圓形或卷曲形的薄片和厚片，因此測定飲片的單位厚度與重量，隨機選取100個飲片進行測量，結果見表10。

表10牡丹皮飲片外觀指標測定

4)色譜條件

色譜柱Diamonsil C18(250×4.6mm)；以甲醇-水(45:55)為流動相等度洗脫；流速1mL/min，柱溫37℃，進樣量10μL；檢查波長274nm。理論板數按丹皮酚峰計算應不低于5000。

5)對照品溶液的制備

取丹皮酚對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每l ml含20.03μg的溶液，即得。

6)供試品溶液的制備

將各批次牡丹皮藥材粉碎成粉末，取粉末約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50rnl，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液l ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

7)丹皮酚的含量測定

線性關系的考察

取丹皮酚對照溶液1.0、2.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μL進樣分析。以峰面積對進樣質量作線性回歸，所得回歸方程為Y＝5E+06X-99693，r＝0.9998。結果表明丹皮酚在0.02003～0.50075μg與峰面積呈良好的線性關系。

樣品含量測定

牡丹皮樣品制備供試品溶液，進樣10μL測定，外標法計算丹皮酚的質量分數。結果見表11。

表11丹皮酚的含量測定

由表11數據可知，11批牡丹皮飲片都符合藥典規定的牡丹皮飲片中丹皮酚含量不得低于1.2％的限定，說明11批牡丹皮飲片都是合格的飲片藥材。

8)牡丹皮飲片質量常數測定

11批牡丹皮飲片中，飲片均呈圓形或卷曲形的薄片(厚片)，運用公式(1)計算牡丹皮飲片的質量常數，公式(6)和公式(7)分別計算相對質量常數和百分質量常數，結果見表12。

表12牡丹皮飲片質量常數

為了能更直觀的看出11批牡丹皮飲片之間質量常數的差異，將上表做成折線圖，結果見圖9-11。

9)結論

從圖9-11中可以看出，不同廠家、不同產地、不同等級的牡丹皮飲片，通過計算飲片的質量常數后，可在圖中區分開來。華邈飲片的3個等級，一等品、二等品和三等品在圖中呈逐漸下降的趨勢，說明在這3個等級中，一等品質量優于二等品質量，二等品質量優于三等品質量；北京三和飲片的2個等級，A等級飲片質量常數大于B等級飲片，說明A等級飲片質量優于B等級飲片。這均符合飲片廠家對飲片的分級標準。滬譙飲片的兩個等級，外形差異較小，成分含量也相差不大，因此所得的飲片質量常數也相差甚微，均屬于品質較好的藥材。而對于天齊堂的選貨-2，雖然其外觀大小、成分含量都與選貨-1相差不大，但由于其切制的厚度太厚，致使其所得的飲片質量常數最小。綜上所述，可以通過計算飲片的質量常數來評價牡丹皮飲片的質量等級優劣。

根據所計算出的三種飲片常數，可對牡丹皮飲片進行質量等級劃分。將牡丹皮飲片分為3個等級，一級牡丹皮飲片規定百分質量常數≥80，相對質量常數≥3.01，質量常數≥0.36；二級牡丹皮飲片規定百分質量常數＜80且≥50，相對質量常數＜3.01且≥1.88，質量常數＜0.36且≥0.23；三級牡丹皮飲片規定百分質量常數＜50，相對質量常數＜1.88，質量常數＜0.23。這3個等級范圍是用已測的藥材飲片進行設定的，測定了更多飲片后，可以對這3個等級范圍進行修改和修正。

實施例4羅漢果飲片的分級與質量評價

羅漢果為葫蘆科植物羅漢果Siraitia grosvenori(Swingle)C.Jeffrey ex A.M.Lu et Z.Y.Zhang的干燥果實。羅漢果是一種很好的清涼茶飲，可提神生津，預防呼吸道感染，常年服用，能延年益壽，被譽為“東方神果”和“長壽之果”(陳瑤，賈恩禮.羅漢果化學成分和藥理作用的研究進展[J].解放軍藥學學報,2011,27(2):171-174)。羅漢果是我國特有的葫蘆科多年生草質藤本植物，原產于廣西、廣東、海南、江西、貴州等省，現主要產于廣西永福、臨桂和龍勝等縣(廖日權，李俊，黃錫山，黃艷，何星存，蘇小建.羅漢果化學成分的研究[J].西北植物學報,2008,28(6):1250-1254)。有研究發現，羅漢果苷類成分是羅漢果中活性較強的化學組分，具有鎮咳平喘、調節血糖、肝臟保護、降血糖和降血脂、抗菌、抗致齲、增強免疫力及抗癌等作用(夏星，鐘振國，林彩云，何偉平，朱曉韻.羅漢果皂苷抗疲勞及耐缺氧作用[J].中國實驗方劑學雜志,2012,18(17):198-201)。

羅漢果是中國傳統中藥材和重要的出口商品，隨著國內與國際市場的需求量增大，對羅漢果質量的要求也會越來越高，但對羅漢果的栽培管理仍缺乏統一的標準體系和質量等級標準(張宏，李嘯紅.羅漢果的藥理作用和毒性研究進展[J].中國農學通報,2011,27(5):430-433)。目前，羅漢果的質量評價鮮見報道，而現在關于羅漢果的質量評價方法是依靠傳統評價方法，根據羅漢果的個頭大小可分為小果、中果、大果和特大果；而根據不同的干燥方式，又分為低溫烘烤脫水和低溫冷凍脫水兩種方式。傳統評價方法是人們通過長期的用藥經驗總結出來的，缺 乏現代科學內涵；而對于不同的干燥方法，哪種方法更好也未見文獻報道。

本發明運用新的飲片質量評價模式，通過對不同產家、不同干燥方式的羅漢果飲片進行含量測定和外觀系數測定，將傳統飲片分級方法與現代儀器檢測法有機結合起來，綜合評價了飲片質量，為控制羅漢果飲片質量提供了參考，給國家制定不同規格的藥材、飲片價格標準提供科學依據。

1)儀器與試劑

分析高效液相 島津SHIMADZU-20系列；

KQ-3200E型超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司；

十萬分之一電子分析天平德國賽多利斯股份有限公司；

TDA-8002型水浴鍋；

95％乙醇；大孔吸附樹脂AB-8(河北華眾)；乙腈、甲醇色譜級(Thermo Fisher Scientific，USA)；娃哈哈純凈水(浙江，杭州)；羅漢果皂苷V對照品(批號：111754-201502，中國食品藥品檢定研究院)。

2)藥材

10個批次羅漢果飲片廠家、產地、規格、脫水方式及批號見表13，樣品圖見圖12A-12J。

表13羅漢果飲片信息

注：/-為無批號。

3)羅漢果飲片外觀指標測定

羅漢果飲片是果實類藥材，是一個完整的整體，所以外觀指標只測定飲片的質量。由于一批飲片中含有10到12個羅漢果，因此在每個批次中隨機選取10個羅漢果進行測定，數據見表14。

表14羅漢果飲片外觀指標

4)色譜條件

色譜柱Thermo BDS HYPERSIL C18(250×4.6mm)；流動相乙腈-水(23:77)，等度洗脫；流速1mL/min，進樣量10μL，檢測波長203nm，柱溫37℃，理論板數按羅漢果皂苷V峰計算應不低于3000。

5)對照品溶液的制備

取羅漢果皂苷V對照品適量，精密稱定，加流動相制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。

6)供試品溶液的制備

取各批次羅漢果飲片，粉碎成粉末，取粉末約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中。精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流2小時，放冷，再稱定重量。用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取，續濾液20ml，回收溶劑至干，加水10ml溶解，通過大孔吸附樹脂柱AB-8(內徑為1cm，柱高為l0cm)，以水100ml洗脫，棄去水液。再用20％乙醇100ml洗脫，棄去洗脫液。繼用稀乙醇100ml洗脫，收集洗脫液。回收溶劑至干，殘渣加流動相溶解，轉移至10ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，即得。

7)羅漢果皂苷V的含量測定

線性關系的考察

取羅漢果苷V對照溶液1.0、2 0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0μL進樣分析。以峰面積對進樣質量作線性回歸，所得回歸方程為Y＝262190X-45148,r＝0.9991。結果表明羅漢果苷V在0.211～5.275μg與峰面積呈良好的線性關系。

樣品測定結果

羅漢果樣品制備供試品溶液，進樣10μL測定，外標法計算羅漢果皂苷V的質量分數。結果見表15。

表15羅漢果皂苷V的含量測定

由表15中測定的結果可知，10批羅漢果飲片中，羅漢果皂苷V的含量均符合2015版《中國藥典》中含量不得與0.5％的規定，說明10批羅漢果飲片均是合格的飲片藥材。

8)羅漢果飲片質量常數

對于果實類的藥材飲片，由于羅漢果都是一個一個的個體，我們隨機選取n個整藥材飲片進行測量，來評價這類飲片的質量優劣，用公式(4)計算其飲片質量常數A。

通過公式(6)和公式(7)分別計算出不同等級大小的羅漢果飲片的相對質量常數A'和百分質量常數A％，結果見表16。

表16羅漢果飲片質量常數

為了更直觀的比較不同廠家的羅漢果質量，將表16中的羅漢果飲片3種質量常數做成折線圖，結果見圖13-15。

9)結論

從圖13-15中可以看出，通過計算出的3種飲片質量常數可以對羅漢果飲片進行等級評價。其中三和藥業的兩個不同等級的羅漢果，通過運用飲片質量常數后，可以明確的區分兩個飲片的等級，大果比小果的質量要好，符合飲片廠家給定的等級劃分。在10批羅漢果中，飲片質量常數的值最大的是使用低溫冷凍脫水的沁漓飲片，在樣品圖中可以發現，沁漓飲片的個頭不是最大的，但是因為所采用的脫水方式不同，其中含有的羅漢果皂苷V含量最多，且外殼顏色較其他方式脫水的羅漢果更鮮艷，所得出的飲片質量常數值最大，說明沁漓飲片的質量最好，且使用低溫冷凍脫水工藝可以減少羅漢果皂苷V的損失。

根據所計算出的三種飲片質量常數，可對羅漢果飲片進行質量等級劃分。將羅漢果飲片分為3個等級，一級羅漢果飲片規定百分質量常數≥80，相對質量常數≥61.38，質量常數≥0.31；二級羅漢果飲片規定百分質量常數＜80且≥50，相對質量 常數＜61.28且≥38.37，質量常數＜0.31且≥0.19；三級羅漢果飲片規定百分質量常數＜50，相對質量常數＜38.37，質量常數＜0.19。這3個等級范圍是用已測的藥材飲片進行設定的，在測定了更多飲片后，可以對這3個等級范圍進行修改和修正。

實施例5細辛飲片的分級與質量評價

細辛為馬兜鈴科植物北細辛Asarum heterotropoides Fr.Schmidt var.mandshuricum(Maxim.)Kitag.、漢城細辛Asarum sieboldi Miq.Var seoulense Nakai或華細辛Asarum sirboldii Miq.的干燥根與根莖，前二種習稱“遼細辛”。細辛道地藥材是產于東北的遼細辛(包括北細辛和漢城細辛)和產于陜西華山周圍的華細辛(周長征，李銀，楊春澍.細辛道地藥材與微量元素[J].中草藥,2000,31(4):54-57.)。細辛的炮制方法為除去雜質，噴淋清水，稍潤，切段，陰干，呈不規則的段。根莖呈不規則圓形，外表皮灰棕色。

在《76種藥材商品規格標準》中，對細辛藥材分了北細辛和華細辛，在北細辛的規格標準中，又分為兩類，野生統貨和家種統貨，這是因為北細辛野生變家種后植株和產品有差異，故以家種和野生分規格。主要區分特征為野生統貨須根細，須毛多，葉片心形，先端急尖，小而薄，灰綠色，葉柄細長，花蕾較多；家種統貨須根較粗長均勻，須毛少，葉片心形，大而厚，黃綠色，葉柄粗短，花蕾較少。華細辛不分規格，都統一為統貨。

目前在藥材市場上占主流的遼細辛多為栽培品。由于各地氣候條件和栽培技術的不同，藥材質量存在較大差異，因此正確地評價不同產地遼細辛栽培品的質量，對臨床用藥有重要意義。

本發明對不同批次、不同產家的細辛飲片進行含量分析與外觀測定，通過將傳統飲片分級方法與現代化學成分法有機結合起來，運用新的飲片質量評價模式，計算出細辛飲片的質量常數，從而對不同等級的細辛飲片進行質量評價與等級劃分。

1)儀器與試劑

分析高效液相 島津SHIMADZU-20系列；

KQ-3200E型超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司；

十萬分之一電子分析天平德國賽多利斯股份有限公司；

乙腈色譜級(Thermo Fisher Scientific，USA)；娃哈哈純凈水(浙江，杭州)；細辛脂素對照品(批號:140716，中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心)。

2)藥材

4批細辛飲片廠家、產地、等級和批號見表17，樣品圖見圖16A-16D。

表17細辛飲片信息

3)細辛飲片外觀指標測定

從圖16可看出，細辛飲片是一種易斷的植物根莖，根莖的長短對飲片的臨床療效無影響，影響臨床療效的主要因素是根莖的粗細。因此，在測量飲片外觀指標時，選取100cm長度的細辛飲片測量其總重量，結果見表18。

表18細辛飲片外觀指標測定

4)色譜條件

色譜柱Diamonsil C18(250×4.6mm)；流動相A乙腈-B水，梯度洗脫，0～20min，50％A；20～26min，50％～100％A；流速1mL/min，柱溫40℃，進樣量10μL；檢測波長為287nm。理論板數按細辛脂素峰計算應不低于10 000。

5)對照品溶液的制備

取細辛脂素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含50.10μg的溶液，即得。

6)供試品溶液的制備

將各批次細辛粉碎成粉末，取粉末(過三號篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇15ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率500W，頻率40kHz)45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

7)細辛脂素的含量測定根據2015版中國藥典方法，細辛樣品制備供試品溶液，進樣10μL測定，外標法計算細辛脂素的質量分數。結果見表19。

表19細辛脂素的含量測定

由表19中測定的結果可知，4批細辛飲片均符合藥典規定的細辛飲片細辛脂素不低于0.050％的限定，說明4批細辛飲片均是合格的飲片藥材。

8)細辛飲片質量常數的測定

細辛飲片符合公式(5)的定義，飲片質量與長度無關的根莖類藥材，因此用公式(5)計算細辛飲片的飲片質量常數，用公式(6)和公式(7)分別計算飲片的相對質量常數和百分質量常數，結果見表20。

表20細辛飲片質量常數

為了能更直觀的看出4批細辛飲片之間相對飲片質量常數的差異，將表20做成折線圖，結果見圖17-19。

9)結論

從圖17-19可以看出，不同廠家、不同等級的細辛飲片，通過計算飲片的質量常數后，可在圖中區分開來，其中北京三和飲片公司的2個等級飲片在圖中的分布，符合飲片廠家對飲片的分級標準；北京三和公司的A等級飲片和B等級飲片質量均優于天齊堂統貨-1，而天齊堂統貨-2的質量又優于其他3個批次的藥材，原因可能是統貨都是隨機裝袋的，可能正好這袋飲片的質量確實優于其它統貨。綜上所述，說明通過新的飲片等級評價模式，可以用于評價細辛飲片的質量優劣。

根據所計算出的三種飲片質量常數，可對細辛飲片進行質量等級劃分。由于細辛飲片所測定的飲片批次較少，因此暫時將細辛飲片分為2個等級，一級細辛飲片規定百分質量常數≥80，相對質量常數≥4.00，質量常數≥2.00E-03；二級細辛飲片規定百分質量常數＜80且≥50，相對質量常數＜4.00且≥2.5，質量常數＜2.00E-03且≥1.25E-03。這2個等級范圍是用已測的藥材飲片進行設定的，且測定的飲片批次較少，可以測定更多不同等級的細辛飲片來擴充數據庫，得出細辛飲片的質量常數范圍，并將質量等級劃分為3個等級，從而更好的對細辛飲片等級質量進行評價與控制。

實施例6當歸飲片的分級與質量評價

當歸為傘形科植物當歸Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根。當歸主要分布于甘肅、云南、四川、湖北、陜西、寧夏、青海、貴州和山西等地，歷代本草記載均以隴西(甘肅)產地質量最好(劉榮霞，周婷婷，董婷霞，詹華強，畢開順.建立評價當歸質量的HPLC指紋圖譜分析方法[J].中國藥學雜志,2003,38(10):29-32.)。

當歸的產區較多，而不同的環境會影響其次生代謝物的含量，所以不同產地的當歸其質量肯定存在著差異。目前對于當歸的質量評價方法還沒有全國統一的標準，這嚴重影響了當歸藥材飲片的開發和利用。李少泓等(李少泓，夏鵬飛，馬肖，邵歡.基于灰色關聯分析方法評價當歸藥材質量[J].中藥材,2012,35(11):1742-1746)基于灰色關聯分析方法評價當歸藥材質量，并對當歸的21份藥材樣品進行了質量評價，結果與道地藥材的基本內涵相符合建立了可用于當歸藥材的質量評價模型。李陽等(李陽，夏鵬飛，馬肖，樊秦，趙磊，王亞麗，劉雄.基于變 異系數權重的模糊物元模型評價道地產區當歸藥材的質量[J].中藥材,2013,36(8):1227-1231)采用變異系數權重的模糊物元模型評價道地產區當歸藥材的質量的方法。李碩等(李碩，李敏.炮制對當歸質量影響的研究概述[J].時珍國醫國藥,2013,24(12):2986-2989)綜述了炮制對當歸質量的影響，發現經過不同的炮制，會對當歸的臨床療效的著重點產生影響。郭延生等(郭延生，華永麗，杜天璽，楊洪申，曲亞玲，魏彥明.基于數據挖掘的道地產區當歸不同炮制品質量評價方法的建立[J].藥學學報,2010,45(9):1155-1159)建立了基于數據挖掘的道地產區當歸不同炮制品質量評價方法，為當歸炮制品的分類和質量評價提供了一定的科學依據。上述方法均缺乏實際的應用價值。

本發明用新建立的飲片評價模式，對不同廠家和不同等級的當歸飲片進行質量分析與等級評價。

1)儀器與試劑

分析高效液相 島津SHIMADZU-20系列；

KQ-3200E型超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司；

十萬分之一電子分析天平德國賽多利斯股份有限公司；

TDA-8002型水浴鍋；

乙腈色譜級(Thermo Fisher Scientific，USA)；甲醇(分析純，北京化工廠)；娃哈哈純凈水(浙江，杭州)；磷酸(85％優級純，國藥集團化學試劑有限公司)；阿魏酸對照品(批號：0773-9708，中國藥品生物制品檢定所)。

2)藥材

9批當歸飲片廠家、產地、規格及批號見表21，樣品圖片見圖20A-20I。

表21當歸飲片信息

3)當歸飲片外觀指標測定

當歸飲片屬于不規則形飲片，不能用常規的測量指標，為了可以體現當歸飲片的整體外觀，我們測定了百單位長度的飲片重量和飲片平均厚度，數據見表22。

表22當歸飲片外觀指標

4)色譜條件

色譜柱Thermo BDS HYPERSIL C18(250×4.6mm)；流動相乙腈-0.085％磷酸溶液(17:83)等度洗脫，流速1mL/min，柱溫35℃，進樣量10μL；檢測波長為320nm。理論板數按阿魏酸峰計算應不低于5000。

5)對照品溶液的制備

取阿魏酸對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加70％甲醇制成每1ml含12.09μL的溶液，即得。

6)供試品溶液的制備

將各批次當歸粉碎成粉末，取粉末(過三號篩)約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加70％甲醇20ml，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70％甲醇補足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液濾過，取續濾液，即得。

7)阿魏酸的含量測定

根據2015版中國藥典方法，進行含量測定。當歸樣品制備供試品溶液，進樣10μL測定，外標法計算阿魏酸的質量分數，結果見表23，色譜圖見圖21-23。

表23阿魏酸的含量測定

由表23中測定的結果可知，9批當歸飲片均符合藥典規定的當歸飲片阿魏酸不低于0.050％的限定，說明9批當歸飲片均是合格的飲片藥材。

8)當歸飲片質量常數的測定

從圖20中可以看出，當歸飲片屬于形狀不規則的飲片，計算不規則飲片的飲片質量常數選用公式(3)來計算，并根據公式(6)和公式(7)分別計算飲片相對質量常數和百分質量常數，結果見表24。由于華邈一等品的切制方法不符合藥 典的要求，因而不進行等級劃分。

表24當歸飲片的質量常數

為了能更直觀的看出8批當歸飲片之間相對飲片質量常數的差異，將上表做成折線圖，結果見圖21-23。

9)結論

從圖21-23可以看出，不同廠家、不同等級的當歸飲片，通過計算飲片的質量常數后，可在圖中直觀的看出飲片的質量優劣。北京華邈的3批飲片中，一等品由于切制工藝的不同，雖然個頭很大，且計算出的質量常數也遠遠好于二等品和三等品，但是切制工藝不符合藥典要求，為了排除不同切制工藝的影響，因此不與其他廠家的飲片進行比較。而二等品與三等品進行比較，華邈的二等品與三等品的大小相近，然而三等品的含量較二等品要高，且厚度更薄，所以導致三等品的質量常數比二等品的質量常數大。北京三和藥材的兩個等級的飲片，A等級的飲片計算出的質量常數比B等級飲片大，符合飲片廠家對飲片的分級標準。天齊堂藥業的選貨和統貨的質量常數進行比較，發現統貨2的質量常數大于選貨1，其原因是統貨2與選貨1的個頭相差不大，但是統貨2的含量比選貨1高，且厚度比選貨1更薄，因此計算出的質量常數值統貨2更大。天齊堂中各選貨進行比較，其中選貨2含量與選貨1一致，而選貨2個頭比選貨1大，且厚度比選貨1薄，因此得出的質量常數選貨2大于選貨1。綜上所述，運用質量常數評價方法可以評價出飲片質量等級的優劣，且結果與廠家所給定的等級標準基本一致，因此，可以用此評價方法來評價當歸飲片質量等級的優劣。

根據所計算出的三種飲片常數，可對當歸飲片進行質量等級劃分。暫時將當歸飲片分為3個等級，一級當歸飲片規定百分質量常數≥80，相對質量常數≥599.88，質量常數≥0.29；二級當歸飲片規定百分質量常數＜80且≥50，相對質量常數＜599.88且≥374.92，質量常數＜0.29且≥0.19；三級當歸飲片規定百分質量常數＜50，相對質量常數＜374.92，質量常數＜0.19。這3個等級范圍是用已測的藥材飲片進行設定的，且測定的飲片批次較少，將來測定更多不同等級的當歸飲片來擴充數據庫，可以對這3個等級范圍進行修改和修正，從而更好的對當歸飲片質量等級進行評價與控制。

實施例7玄參飲片的分級與質量評價

玄參為玄參科植物玄參Scrophularia ning poensis Hemsl.的干燥根。主要含環烯醚萜苷類、苯丙素苷類、有機酸類、甾醇及其苷類以及萜類，其中環烯醚萜苷類中的哈巴苷和哈巴俄苷為主要有效成分。主產于浙江、四川、湖北、安徽、江蘇等地，玄參藥用歷史悠久，有廣泛的栽培地區與不同類型的種植資源，且炮制方法多樣，具有凈制、切制、單純加熱制、輔料制等(賈成友，張傳輝，趙鳳平，傅亞，王云紅，楊榮平.玄參飲片質量控制方法研究[J].天然產物研究與開發,2015,27(8):1385-1390)。

近年來，基于中藥化學、分析化學、中藥炮制學、細胞生物學、計算機科學、化學計量學、光譜分析技術等多學科結合，玄參質量方面研究已取得一定的成果。有代表的玄參質量控制模式有單指標控制、多指標控制和指紋圖譜等(陳鵬，李碩，邱佳，覃洪含，李飛雁.玄參藥材質量控制研究進展[J].中國實驗方劑學雜志,2015,21(18):220-225)。單指標控制和多指標控制主要以其中含有的少數活性成分作為指標進行含量測定(劉洪宇，蔡鐵全.玄參HPLC指紋圖譜的比較研究[J].藥物分析雜志,2012,32(7):1277-1282,1288)，而指紋圖譜因具有系統性、特征性和重現性特點，能較全面反映中藥品質，現已成為中藥質量評價和控制研究的熱點之一。

目前，中藥研究僅對某一種或多種成分的含量進行控制，且控制中藥質量的基本模式是借鑒化學藥品的質控模式建立的，達不到反映中藥材的內在質量，阻礙并影響中藥材國際化的進程。

本發明用新建立的飲片評價模式，對不同廠家、不同產地和不同等級的玄參飲片進行質量評價，為玄參的質量控制提供新方法。

1)儀器與試劑

分析高效液相 島津SHIMADZU-20系列；

KQ-3200E型超聲波清洗器昆山市超聲儀器有限公司；

十萬分之一電子分析天平德國賽多利斯股份有限公司；

乙腈色譜級(Thermo Fisher Scientific，USA)；娃哈哈純凈水(浙江，杭州)；磷酸(85％優級純，國藥集團化學試劑有限公司)；哈巴苷對照品(批號：111729-2001506，中國食品藥品檢定研究院)，哈巴俄苷對照品(批號：1282-051218，中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心)。

2)藥材

11批玄參飲片廠家、產地、等級及批號見表25，樣品圖片見圖24A-24K。

表25玄參飲片信息

注：/-為無批號。

3)玄參飲片外觀指標測定

雖然《中國藥典》規定玄參飲片呈類圓形或橢圓形的薄片，但是我們在中藥飲片企業所購買的玄參飲片大多都呈不規則的薄片，對于不規則的薄片，我們通過測量百單位長度的飲片重量和飲片平均厚度來作為玄參飲片的外觀性指標，結果見表26。

表26玄參飲片外觀指標

4)色譜條件

色譜柱Diamonsil C18(250×4.6mm)；以乙腈為流動相A，以0.03％磷酸溶液為流動相B，按表27中的規定進行梯度洗脫；檢測波長為210nm。理論板數按哈巴俄苷與哈巴苷峰計算均應不低于5000。

表27梯度洗脫條件

5)對照品溶液的制備

取哈巴苷對照品、哈巴俄苷對照品適量，精密稱定，加30％甲醇制成每l mL 含哈巴苷61.124μg、哈巴俄苷20.02μg的混合溶液，即得。

6)供試品溶液的制備

取各玄參飲片粉碎成粉末，取粉末(過三號篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加人50％甲醇50mL，密塞，稱定重量，浸泡1小時，超聲處理(功率500W，頻率40kHz)45分鐘，放冷，再稱定重量，用50％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

7)哈巴苷和哈巴俄苷的含量測定

參照2015版中國藥典方法，進行含量測定。玄參樣品制備供試品溶液，進樣10μL測定，外標法計算哈巴苷與哈巴俄苷的質量百分比，結果見表28。

表28哈巴苷與哈巴俄苷含量測定

《中國藥典》中規定，玄參飲片中含哈巴苷和哈巴俄苷的總量不得少于0.45％。根據表28中含量測定的結果，11批玄參飲片的哈巴苷和哈巴俄苷的總量均大于0.45％，說明11批玄參飲片均是合格的藥材飲片。

8)玄參飲片質量常數的測定

由于所購買的玄參飲片的外形都是不規則的，因此選用公式(3)計算玄參飲片的飲片質量常數，并通過公式(6)和公式(7)分別計算飲片相對質量常數和百分質量常數，結果見表29。

表29玄參飲片質量常數

為了能更直觀的看出不同批玄參飲片之間質量常數的差異，將表26做成折線圖，結果見圖25-27。

9)結論

從圖25-27可知，不同批玄參飲片的質量在圖中呈下降趨勢，其中北京三和藥業的兩個不同等級的飲片，所得到的飲片質量常數值相差較小，原因是A等級的飲片個頭大小與B等級的飲片大小相近，但是哈巴苷和哈巴俄苷的總量卻比B等級的飲片低，這使得所計算出的飲片質量常數值相差甚微，說明這兩個不同等級的飲片其實可以歸為同一等級，且質量均優于天齊堂的統貨飲片。北京華邈三個等級中，計算出的質量常數的值與廠家給定的分級標準有所差別，其原因是三等品與二等品相比，三等品的成分含量與個頭均略大于二等品，因此計算出的質量常數也較大。而金貴藥業的選片與天齊堂的統貨相比，金貴藥業的選片在整體上要略好于天齊堂的統貨飲片。綜上所述，運用飲片質量常數評價模式可以用來評價不同等級的玄參飲片的質量等級。

根據計算出的飲片質量常數，可大致將不同廠家、不同等級的玄參飲片分為3個等級。一級飲片規定百分質量常數≥70，相對質量常數≥408.65，質量常數≥1.84；二級飲片規定百分質量常數≥50且＜70，相對質量常數≥291.89且＜408.65，質量常數≥1.32且＜1.84；三級飲片規定百分質量常數<50，相對質量常數＜291.89，質量常數＜1.32。這3個等級范圍是用已測的玄參藥材飲片進行設定的，在測定了更多飲片后，可以對這3個等級范圍進行修改和修正，為從而更好的對玄參飲片進行等級評價。

本發明還利用上述本發明的評價方法，對川牛膝、白芍、赤芍、牛膝、白鮮皮等中藥飲片的質量評價和分級進行了考察，均獲得了可信的結果。

目前，中藥飲片的優質優價政策越來越被認可，很多中藥飲片企業都開始對飲片進行分級定價，然而不同飲片企業對相同飲片的分級規格卻有所不同，這就可能造成對同是標記一等品的藥材飲片，但是因為來自不同的飲片企業，其分級的標準不同，可能造成兩個一等品的藥材質量卻差異較大，這就使得飲片市場的質量仍舊混亂，沒有達到優質優價的最終目標，消費者還是不能判斷飲片的質量。

本發明為了解決這一難題，建立了一種新的飲片評價模式，運用所建立的新型中藥飲片評價模式，測定了不同批次、不同等級、不同廠家的各種中藥飲片，通過測量飲片的外觀性指標與飲片的有效成分，計算飲片質量常數與相對飲片質量常數，來評價中藥飲片的質量等級，并與飲片企業所給予的飲片等級進行對比。

結果證明，運用建立的新型中藥飲片評價模式，可以用來評價不同等級的中藥飲片，且所得質量等級結果符合飲片企業各自的飲片分級標準。說明可以使用此模式來對不同廠家的不同等級飲片進行統一評價。在用此模式評價飲片等級時， 應該剔除不合格的飲片，如變質的飲片(霉變、油變等)，且在相同質量常數的情況下，我們認為飲片的均勻性好的，含雜質量少的飲片的質量更好。

利用本發明，樂意通過此評價模式建立一個全國的中藥飲片質量等級數據庫，運用飲片百分質量常數來對不同廠家、不同產地、不同品種的中藥飲片施行統一的評價標準，為臨床用藥的安全性有效性提供保障，也為中藥飲片的優質優價服務的推廣提供參考。