一種測定乳中鈣含量的方法、測定試劑和試劑盒與流程

本發明涉及生物醫藥領域，具體涉及一種測定乳中鈣含量的方法、測定試劑和試劑盒。
背景技術：
：為了準確地衡量乳制品中鈣離子的含量，需要檢測乳制品，如生乳、牛奶半成品、牛奶成品中的鈣離子含量。目前常見的檢測方法有國標gb541321-2010《食品安全國家標準-嬰幼兒食品和乳品中鈣、鐵、鋅、鈉、鉀、鎂、銅和錳的測定》以及分光光度檢測法。但是上述常見的檢測方法往往操作步驟十分繁瑣，需要花費很多的時間，且需要大型儀器和用到乙炔等較危險氣體，對于操作要求比較高。此外，已知在堿性條件下，樣品中的鈣與偶氮胂ⅲ(式ⅰ)作用生成藍紫色絡合物(式ⅱ)，其顏色深淺與鈣離子的濃度成正比。通過在650nm波長處測定藍色復合物的吸光度的變化值，與經過同樣處理的鈣校準液進行比較，即可計算出樣品中鈣離子的含量。但是由于乳的成分遠遠復雜于血液，并且乳中的一些鈣處于與牛乳蛋白結合的狀態，因此現有技術中的檢測方法難以將待測乳中結合態的鈣釋放出來，從而導致檢測結果與實際情況相比誤差很大。上述這些不足，尤其是獲得檢測結果需要過長的時間的不足，直接制約了檢測乳制品中鈣離子含量的方法的實際應用。因此亟待獲得快速、簡便、可靠、準確地檢測乳中鈣含量的方法。技術實現要素：本發明要解決的技術問題就是針對現有的乳中鈣含量的檢測方法獲得檢測結果需要過長的時間、誤差大、操作復雜、穩定性差的不足，提供一種測定乳中鈣含量的方法、測定試劑和試劑盒。所述的方法和所述的測定試劑能夠快速、可靠、準確地檢測乳中鈣的含量。此外，所述的檢測方法精密度高、重復性好、穩定性高，并且節約時間。所述的試劑盒快速、操作簡便、準確穩定，能夠廣泛用于乳制品行業對乳中鈣含量的檢測中。由于在乳中直接使鈣與偶氮胂ⅲ作用生成藍色復合物再來測定鈣含量的效果十分不理想，準確性很低。發明人針對該問題在乳本身特征的基礎上，創造性地設置了適于乳的稀釋液和測定試劑的配方組分，并進一步根據乳的特質調整了測定乳中鈣含量的計算方法。其中，所述稀釋液是針對乳乃至乳制品的預處理而特殊選擇，能夠使乳和乳制品中的鈣更好地釋放。所述測定試劑與所述稀釋液相互配合，使測定結果更為準確可靠。本發明的技術方案之一是一種測定乳中鈣含量的方法，其包括以下的步驟：(1)將乳與稀釋液混合，得樣品乳；所述稀釋液為以下的組分：0.5～2％鹽酸和0.01～1.0％tritonx-100；或者，為以下的組分：0.5～3％氫氧化鈉，所述百分比為質量百分比；(2)將步驟(1)所得的樣品乳、水和鈣校準品分別與上述的測定試劑混合后反應，分別得到樣品溶液、空白溶液和校準溶液；所述測定試劑為以 下的組分：100～200μmol/l偶氮胂ⅲ、25～70mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和0.05～2％tritonx-100，所述百分比為質量百分比；(3)測定步驟(2)所得的樣品溶液、空白溶液和校準溶液在650nm波長處的吸光度值，計算步驟(1)所述乳中鈣含量。步驟(1)為：將乳與稀釋液混合，得樣品乳；所述稀釋液為以下的組分：0.5～2％鹽酸和0.01～1.0％tritonx-100；或者，為以下的組分：0.5～3％氫氧化鈉，所述百分比為質量百分比。其中，所述的稀釋液中，所述鹽酸的含量為0.5～2％，較佳地為0.5～1％，更佳地為0.8％，所述百分比為質量百分比。所述tritonx-100的含量為0.01～1.0％，較佳地為0.02～0.5％，更佳地為0.02％，所述百分比為質量百分比。或者，本發明所述的稀釋液中，所述氫氧化鈉的含量為0.5～3％，較佳地為0.5％，所述百分比為質量百分比。所述混合時所述乳和所述稀釋液的體積比為本領域常規的體積比，較佳地為1∶8～1∶10，更佳地為1∶9。步驟(2)為：將步驟(1)所得的樣品乳、水和鈣校準品分別與上述的測定試劑混合后反應，分別得到樣品溶液、空白溶液和校準溶液；所述測定試劑為以下的組分：100～200μmol/l偶氮胂ⅲ、25～70mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和0.05～2％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。其中，所述測定試劑中，所述偶氮胂ⅲ的含量為100～200μmol/l，較佳地為150～200μmol/l，更佳地為150μmol/l。所述哌嗪-1,4-二乙磺酸(pipes)的含量為25～70mmol/l，較佳地為25～50mmol/l，更佳地為50mmol/l。所述tritonx-100的含量為0.05～2％，較佳地為0.05～0.1％，更佳地為0.1％，所述百分比為質量百分比。所述反應的時間為本領域常規的時間，較佳地為4～6分鐘，更佳地為5分鐘。所述反應的溫度為本領域常規的溫度，較佳地為36～38℃，更佳地為37℃。所述反應的方式為本領域常規的方式，較佳地為水浴。所述樣品乳、水和鈣校準品分別與上述的測定試劑混合的體積比為本領域常規的體積比，較佳地為1∶99～1∶101，更佳地為1∶100。所述水為本領域常規的水，較佳地為蒸餾水，更佳地為去離子水。步驟(3)為：測定步驟(2)所得的樣品溶液、空白溶液和校準溶液在650nm波長處的吸光度值，計算步驟(1)所述乳中鈣含量。其中，所述計算的方法為本領域常規的計算方法，能夠計算出步驟(2)所得的樣品溶液中鈣含量即可，較佳地，按照以下的公式進行計算：ca(mg/100ml)＝鈣校準品濃度×(a樣品溶液-a空白溶液)/(a校準溶液-a空白溶液)×稀釋倍數，其中，a樣品溶液為所述樣品溶液的a值；a空白溶液為所述空白溶液的a值；a校準溶液為所述校準溶液的a值；a值指吸光度；所述鈣校準品濃度指鈣元素占所述鈣校準品的質量體積百分比，通常指每100ml所述鈣校準品中鈣的質量(mg)。所述稀釋倍數指所述樣品乳用所述稀釋液稀釋的稀釋倍數。如所述乳和所述稀釋液的體積比1:9，則所述稀釋倍數為10。本發明的一個較佳實例為：所述的方法中，所述稀釋液為0.5％氫氧化鈉；且所述測定試劑為150μmol/l偶氮胂ⅲ、50mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和0.1％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。本發明的一個較佳實例為：所述的方法中，所述稀釋液為2％鹽酸和0.5％tritonx-100；且所述測定試劑為150μmol/l偶氮胂ⅲ、50mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和0.1％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。本發明的一個較佳實例為：所述的方法中，所述稀釋液為0.8％鹽酸和0.02％tritonx-100；且所述測定試劑為150μmol/l偶氮胂ⅲ、50mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和0.1％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。本發明還提供了所述的方法中，所述稀釋液和所述測定試劑的制備方法，其包括以下步驟：將鹽酸和tritonx-100加入水中混合；或者，將氫氧化鈉溶解于水中混合，即得所述稀釋液；將偶氮胂ⅲ、哌嗪-1,4-二乙磺酸和tritonx-100加入水中混合，即得所述測定試劑。本發明所述稀釋液的形態為本領域常規的形態，較佳地為無色透明澄清液體。本發明所述測定試劑的形態為本領域常規的形態，較佳地為紫色透明澄清液體。本發明所述乳為本領域常規的乳，其包括生乳和經過加工的處理乳。所述處理乳為本領域常規的處理乳，較佳地包括半成品乳和成品乳，更佳地包括殺菌乳、酸乳、滅菌乳、乳粉、干酪、發酵乳、乳清和復原乳。所述乳的來源為本領域常規的來源，較佳地包括人、牛、羊、馬、驢和駱駝，更佳地為牛。本發明所述的方法所使用的儀器是本領域常規的儀器，較佳地為分光光度儀，更佳地為varioskanflash全波長掃描式多功能讀數儀，購自thermoscientific。較佳地，所述的方法是以非疾病診斷或治療目的的方法。本發明提供的技術方案之二是一種測定乳中鈣含量的測定試劑，其包括以下的組分：100～200μmol/l偶氮胂ⅲ、25～70mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和0.05～2％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。較佳地，所述的測定試劑為150μmol/l偶氮胂ⅲ、50mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和0.1％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。本發明提供的技術方案之三是一種測定乳中鈣含量的試劑盒，其包括上述的測定試劑和上述的稀釋液。所述稀釋液為以下的組分：0.5～2.0％鹽酸和0.01～1.0％tritonx-100；或者，所述稀釋液為以下的組分：0.5～3.0％氫氧化鈉，所述百分比為質量百分比。較佳地，所述稀釋液為0.5％氫氧化鈉；或者，所述稀釋液為0.5～1％鹽酸和0.02～0.5％tritonx-100，或者，所述稀釋液為0.8％鹽酸和0.02％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。本發明中，較佳地，所述的試劑盒還包括鈣校準品。所述的鈣校準品為本領域常規使用的鈣校準品。所述的鈣校準品濃度為本領域常規的濃度，較佳地為8～12％，所述百分比為鈣占所述鈣校準品的質量體積百分比。本發明中，較佳地，所述的試劑盒還包括水。所述水為本領域常規的水，較佳地為蒸餾水，更佳地為去離子水。本發明所述的試劑盒操作簡便，能夠高效、準確地特異性檢測乳中鈣含 量。在符合本領域常識的基礎上，上述各優選條件，可任意組合，即得本發明各較佳實例。本發明所用試劑和原料均市售可得。本發明的積極進步效果在于：本發明提供一種測定乳中鈣含量的檢測試劑、方法和試劑盒。所述的檢測試劑能夠準確、可靠地檢測乳中的鈣含量。所述的方法能夠將乳中結合態的鈣釋放出來，從而能夠可靠、準確地檢測乳中鈣的含量。具體地，使用所述的方法對生乳樣品、半成品牛奶樣品和成品牛奶樣品進行檢測的結果的偏差均<10％，符合國標允許的偏差要求。其中生乳樣品不同方法間的偏差≤5％的符合率達到60％、牛奶半成品樣品符合率達到100％、牛奶成品樣品符合率達到73.3％。此外，所述的方法精密度高，對生乳樣品、半成品牛奶樣品和成品牛奶樣品進行檢測的結果的相對標準偏差均小于5％；穩定性好，不同時間檢測同一批樣品cv值小于5％，符合要求；速度快，單個樣品進行檢測僅需8分鐘，大批量檢測還能進一步縮短3-5分鐘。所述的試劑盒操作簡便、準確可靠，能夠廣泛用于乳制品行業對乳中鈣含量的檢測中。附圖說明圖1為不同檢測方法檢測生乳樣品的正態性檢驗圖。其中，均值為-3.42、標準差為4.595、n為30、a為0.351、p值為0.446。圖2為不同檢測方法檢測半成品牛奶樣品的正態性檢驗圖。其中，均值為-0.925、標準差為2.249、n為4、a為0.286、p值為0.404。圖3為不同檢測方法檢測成品牛奶樣品的正態性檢驗圖。3a為原子吸收分光光度計1檢測檢測成品牛奶樣品的正態性檢驗圖。其中，均值為-4.86、標準差為2.240、n為15、a為0.356、p值為0.410。3b為原子吸收分光光度計2檢測檢測成品牛奶樣品的正態性檢驗圖。其中，均值為3.92、標準差為1.666、n為10、a為0.482、p值為0.177。原子吸收分光光度計1，2為 兩臺相同型號的原子吸收分光光度計。具體實施方式下面通過實施例的方式進一步說明本發明，但并不因此將本發明限制在所述的實施例范圍之中。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，按照常規方法和條件，或按照商品說明書選擇。實施例中，所述生乳樣品購自蒙牛集團分析測定中心。所述半成品牛奶樣品購自蒙牛集團分析測定中心。所述成品牛奶樣品購自蒙牛集團分析測定中心。所述鈣校準品的濃度為10％，所述百分比為鈣占所述鈣校準品的質量體積百分比。所述分光光度儀為varioskanflash全波長掃描式多功能讀數儀，購自thermoscientific。國標法，又稱原吸法：參見國標gb541321-2010《食品安全國家標準-嬰幼兒食品和乳品中鈣、鐵、鋅、鈉、鉀、鎂、銅和錳的測定》中有關鈣的測定的相關內容。國標法所用的原子吸收分光光度計為z-2000原子吸收分光光度計，購自日本hitachi公司。若無特別說明，實施例中各檢測方法測得的結果的單位均為mg/100ml。實施例1不同稀釋液的比對采用分光光度檢測法進行檢測：(1)、樣品稀釋：取樣品與稀釋液加入到ep管中，震蕩混勻，得樣品乳。(2)、將步驟(1)所得的樣品乳、水和鈣校準品分別與測定試劑震蕩混勻后于37℃水浴反應5min，分別得到樣品溶液、空白溶液和校準溶液。測定試劑為以下的組分：150μmol/l偶氮胂ⅲ、50mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和0.1％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。具體的混合比例如表1所示：表1樣品溶液、空白溶液和校準溶液編號試驗管名稱試劑名稱組分1空白溶液管空白溶液1000μl測定試劑和10μl去離子水2校準溶液管校準溶液1000μl測定試劑和10μl校準品3樣品溶液管樣品溶液1000μl測定試劑和10μl樣品乳(3)、測定步驟(2)所得的樣品溶液、空白溶液和校準溶液在650nm波長處的吸光度值。分別吸取200μl空白溶液管、校準溶液管和樣品溶液管中的液體至對應的微孔杯中，并將微孔杯放置于分光光度儀卡槽中，順序如表2所示，運行lb程序進行檢測并讀數。根據吸光度讀數計算所述待測乳中鈣含量。該計算按照以下的公式進行：ca(mg/100ml)＝鈣校準品濃度×(a樣品溶液-a空白溶液)/(a校準溶液-a空白溶液)×稀釋倍數。其中，a樣品溶液為所述樣品溶液的a值；a空白溶液為所述空白溶液的a值；a校準溶液為所述校準溶液的a值；a值指吸光度；所述鈣校準品濃度指鈣占所述鈣校準品的質量體積百分比；所述稀釋倍數為10。表2檢測順序編號試驗管名稱對應檢測孔1空白溶液管第一孔2校準溶液管第二孔3樣品溶液管第三孔或第四孔a、采用分光光度檢測法進行檢測步驟(1’)為將100μl生乳樣品分別與900μl稀釋液1或900μl稀釋液2在ep管中混合，得待測樣品1和待測樣品2。其中，稀釋液1為以下的組分：0.5％氫氧化鈉，所述百分比為質量百分比。稀釋液2為以下的組分：2％鹽酸和0.5％tritonx-100，所述百分比為質 量百分比。步驟(1’)完成后按照上述分光光度檢測法的步驟(2)、(3)對步驟(1’)所得的待測樣品1和待測樣品2的鈣含量進行檢測。b、使用國標法進行檢測按照上述國標法對生乳樣品中的鈣含量進行檢測，分別采用兩臺相同型號的原子吸收分光光度計進行檢測，結果分別表3和表4所示。表3分光光度檢測法與國標法檢測的結果比對其中，偏差的含義是使用本發明的分光光度檢測法的測定值與國標法的測定值的差值和國標法的測定值的比值；從表3結果可知選擇氫氧化鈉為稀釋液(稀釋液1)與國標法的檢測結果進行比較，偏差≤5％的符合率為85％，偏差＜10％的符合率達到100％。選擇鹽酸和tx-100為稀釋液(稀釋液2)與國標法的檢測結果進行比較，偏差≤5％的符合率達到100％。表4分光光度檢測法與國標法檢測的結果比對從表4結果可知，選擇氫氧化鈉為稀釋液(稀釋液1)與國標法的檢測結果進行比較，偏差≤5％的符合率為40％，偏差＜10％的符合率達到95％；選擇鹽酸和tx-100為稀釋液(稀釋液2)與國標法的檢測結果進行比較，偏差≤5％的符合率達到70％，偏差＜10％的符合率達到100％。綜合上述結果可知，鹽酸和tx-100為稀釋液(稀釋液2)作為稀釋液偏差均小于10％，因此選擇稀釋液2作為稀釋液檢測樣品中鈣含量相對于稀釋液1效果更好，結果更為準確。實施例2不同樣品的比對隨機選取30個不同批次的生乳樣品、4個不同批次的半成品牛奶樣品和25個不同批次的成品牛奶樣品作為樣品。采用分光光度檢測法進行檢測：步驟(1a)為將100μl樣品與900μl稀釋液3在ep管中混合，得待測樣品。其中，其中，步驟(1a)中稀釋液3為以下的組分：0.8％鹽酸和0.02％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。步驟(1a)完成后按照實施例1所述的分光光度檢測法的步驟(2)、(3) 對步驟(1a)所得的待測樣品的鈣含量進行檢測。同時按照上述國標法對樣品進行檢測。結果分別如表5～7和圖1～3所示。表5不同檢測方法檢測生乳樣品的比對結果其中，“/”的含義為沒有測平行值。表5說明，本發明的分光光度檢測法的測定結果與國標法比較，偏差≤5％的符合率為60％，偏差<10％的符合率為100％。計算上述平行樣品的cv值可知，國標法的cv值在0.6-3.9之間，本發明的分光光度檢測法cv值在0-2.8之間。通過對表5數據進行正態性檢驗分析可知(參見圖1)，a＝0.351，小于95％置信區間的臨界值0.725，可見系統服從正態分布，數據處于統計受控狀態。表6不同檢測方法檢測成品牛奶樣品的比對結果表6說明，本發明的分光光度檢測法的測定結果與國標法比較，偏差≤5％的符合率達到100％。計算上述平行樣品的cv值可知，國標法的cv值在0.5-2.1之間，本發明的分光光度檢測法的cv值在0-2.8之間。通過對表6數據進行正態性檢驗分析可知(參見圖2)，a＝0.286，小于95％置信區間的臨界值0.725，可見系統服從正態分布，數據處于統計受控狀態。表7不同檢測方法檢測半成品牛奶樣品的比對結果表7說明，本發明的分光光度檢測法的測定結果與國標法比較，偏差≤5％的符合率達到73.3％，偏差<10％的符合率達到100％。計算上述兩種方法 的平行樣品的cv值可知，國標法的cv值在0.4-4.9之間，本發明的分光光度檢測法的cv值在0.7-2.8之間，可知本發明的分光光度檢測法的檢測結果穩定性較好。過對表7數據進行正態性檢驗分析可知(參見圖3a、圖3b)，ad值分別為0.356和0.482，小于95％置信區間的臨界值0.725，可見系統服從正態分布，數據處于統計受控狀態。實施例3精密度實驗隨機選取實施例2中的任意的1個生乳樣品、1個半成品牛奶樣品和1個成品牛奶樣品分別作為樣品。采用分光光度檢測法進行檢測：步驟(1b)為將100μl樣品與900μl稀釋液3在ep管中混合，得待測樣品。其中，其中，步驟(1b)中稀釋液3為以下的組分：0.8％鹽酸和0.02％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。步驟(1b)完成后按照實施例1所述的分光光度檢測法的步驟(2)、(3)對步驟(1b)所得的待測樣品的鈣含量進行檢測。為了進行精密度實驗，將上述每種樣品各做20次重復的平行實驗。檢測結果如表8所示。表8的結果說明，本發明的分光光度檢測法檢測生乳樣品的相對標準偏差為2.0％、檢測半成品牛奶樣品的相對標準偏差為1.4％、檢測成品牛奶樣品的相對標準偏差為1.4％，偏差均小于2.0％，而國標法的標準偏差為5％，可見本發明的分光光度法效果優于國標法，完全勝任對乳中鈣的測定。說明本發明的分光光度檢測法檢測生乳、半成品牛奶和成品牛奶的精密度均滿足要求。表8精密度實驗的結果實施例4穩定性實驗隨機選取實施例2中的任意的1個成品牛奶樣品(樣品a)和購自內蒙古蒙牛乳業的特侖蘇牛奶(樣品b)作為樣品。采用分光光度檢測法進行檢測：步驟(1c)為將100μl樣品與900μl稀釋液4在ep管中混合，得待測樣品。其中，步驟(1c)中稀釋液4為以下的組分：2％鹽酸和0.5％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。步驟(1c)完成后按照實施例1所述的分光光度檢測法的步驟(2)、(3)對步驟(1c)所得的待測樣品的鈣含量進行檢測。同時按照上述國標法對樣品進行檢測。為了進行穩定性實驗，分別在不同的日期進行檢測。結果如表9所示。表9穩定性實驗的結果其中，“/”的含義為沒有數據。表9說明，對樣品a，國標法的檢測結果的cv值為3.7％，本發明的分光光度檢測法的檢測結果的cv值為1.7％；對樣品b，國標法的檢測結果的cv值為5.0％，本發明的分光光度檢測法的檢測結果的cv值為1.6％。可見本發明的分光光度檢測法的穩定性優于國標法，且這兩種檢測方法均滿足穩定性的要求。此外，采用國標法對樣品b進行檢測，發現2016年1月11日的檢測結果與2016年1月12日和2016年1月13日的檢測結果偏差較大。即使這些較大的偏差在10％以下，仍視為對穩定性有一定的不利影響。綜合上述的實施例的結果可知，當稀釋液為以下的組分：2％鹽酸和0.5％tritonx-100，所述百分比為質量百分比時，該稀釋液為分光光度檢測法檢測乳中鈣含量的最優稀釋液。使用改進的分光光度檢測法對生乳樣品、半成品牛奶樣品和成品牛奶樣品進行檢測的結果的偏差均<10％，符合國標允許的偏差要求。其中生乳樣品不同方法間的偏差≤5％的符合率達到60％、牛奶半成品樣品符合率達到100％、牛奶成品樣品符合率達到73.3％。此外，改進的分光光度檢測法精密度高，對生乳樣品、半成品牛奶樣品和成品牛奶樣品進行檢測的結果的相對標準偏差均小于5％；改進的分光光度檢測法穩定性好，不同時間檢測同一批樣品cv值小于5％，符合要求。實施例5采用分光光度檢測法進行檢測：稀釋液為以下的組分：3％氫氧化鈉，所述百分比為質量百分比。測定試劑為以下的組分：100μmol/l偶氮胂ⅲ、25mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和0.05％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。其余步驟和條件均與實施例1中“a、采用分光光度檢測法進行檢測”中的步驟和條件完全一致。結果發現，改進的分光光度檢測法準確性好、穩定性高，能夠用于乳中鈣含量的檢測。實施例6采用分光光度檢測法進行檢測：稀釋液為以下的組分：0.8％鹽酸和0.2％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。其余步驟和條件均與實施例1中“a、采用分光光度檢測法進行檢測”中的步驟和條件完全一致。表10分光光度檢測法與國標法檢測的結果比對表10說明，當稀釋液的組分含有0.8％的鹽酸時，所得的結果與國標法對比的偏差非常小，說明實施例6的稀釋液能夠準確地測定乳中的鈣含量。結果發現，改進的分光光度檢測法準確性好、穩定性高，能夠用于乳中鈣含量的檢測。實施例7采用分光光度檢測法進行檢測：稀釋液為以下的組分：0.5％鹽酸和0.01％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。測定試劑為以下的組分：200μmol/l偶氮胂ⅲ、70mmol/l哌嗪-1,4-二乙磺酸和2％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。其余步驟和條件均與實施例1中“a、采用分光光度檢測法進行檢測”中的步驟和條件完全一致。結果發現，改進的分光光度檢測法準確性好、穩定性高，能夠用于乳中鈣含量的檢測。實施例8采用分光光度檢測法進行檢測：稀釋液為以下的組分：0.5％鹽酸和1.0％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。其余步驟和條件均與實施例1中“a、采用分光光度檢測法進行檢測”中的步驟和條件完全一致。結果發現，改進的分光光度檢測法準確性好、穩定性高，能夠用于乳中鈣含量的檢測。對比例1采用分光光度檢測法進行檢測：稀釋液為以下的組分：5％鹽酸和0.5％tritonx-100，所述百分比為質量百分比。其余步驟和條件均與實施例1中“a、采用分光光度檢測法進行檢測”中的步驟和條件完全一致。表11分光光度檢測法與國標法檢測的結果比對表11說明，當稀釋液的組分含有5％的鹽酸時，所得的結果與國標法對比的偏差很大，說明此時的稀釋液不能準確地測定乳中的鈣含量。應理解，在閱讀了本發明的上述內容之后，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。當前第1頁12