強疏水PDMS作為基片材質的亞型豬流感檢測用芯片裝置的制作方法

            文檔序號:11824667閱讀:272來源:國知局
            強疏水PDMS作為基片材質的亞型豬流感檢測用芯片裝置的制作方法

            本發明涉及一種強疏水PDMS作為基片材質的亞型豬流感檢測用芯片裝置,屬于分析測試領域。



            背景技術:

            多通道微流控亞型豬流感診斷技術背景,可以參見CN 201110311127.1等發明專利申請案。

            僅就微流控技術其本身的整體概貌而言,可以參見著名微流控專家林炳承先生不久前出的專著“圖解微流控芯片實驗室”,該專著已經由科學出版社出版,該專著對微流控技術的過去、現在,以及,未來展望等等方面,都有著詳盡的、深入到具體細節的長篇論述。

            那么,下面要談談本案關注的重點問題。

            微流控芯片的基本架構,包括刻蝕有微小液流通道的基片以及與之貼合在一起的蓋片,所述基片上的微小液流通道,在裝配上蓋片之前,表觀上看就是一些微槽道,要等到在其上覆蓋了蓋片之后,才真正閉合形成所述微小液流通道,該微槽道的槽道內表面連同包繞著該微槽道的那部分蓋片一起構成所述的微小液流通道;那么,顯然,裝配完成了之后的該微小液流通道,它的內表面面積的主要部分是那個微槽道的內表面面積,換句話說,該微槽道內表面的狀態或性質基本上決定了該微小液流通道的整體狀態或性質;因此說,這個構建在基片上的微槽道的內表面狀態或內表面性質是關鍵因素;原則上講,任何的能夠保持或基本保持其固體形態的材料,都能夠用來制作基片及蓋片,比如,能夠用作基片及蓋片的材料可以是單晶硅片、石英片、玻璃片、高聚物如聚二甲基硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯、聚碳酸酯等等;當然,基片的選材和蓋片的選材可以相同,也可以不相同;從材料耗費、制作難度以及應用普及前景等等方面來看,這些材料之間存在不小差異,尤其是那個基片的選材,影響較大。

            在各種基片制作材料中,聚二甲基硅氧烷,即PDMS,相對而言十分容易成型,在這樣的基片上制作微槽道極其簡單,并且該材料成本低廉,以該聚二甲基硅氧烷材料制作基片,在其上壓制或刻蝕微槽道,并與玻璃或聚丙烯或其它塑料片等廉價材料制作的蓋片相配合,貌似是一種比較理想的選擇;當然,蓋片材料也可以選擇使用廉價的聚二甲基硅氧烷材料:那么,這種基片選材為聚二甲基硅氧烷材料的方案,材料極便宜,制作極簡易,看似也應當 極易于普及、推廣。

            但是,事情并非如此簡單。

            其一,這個聚二甲基硅氧烷材料,即縮寫字母PDMS所指代的材料,其本身是一種強烈疏水的材料,在這一材料上構建微槽道,如果不進行針對該微槽道表面的改性操作,那么,整體裝配完成之后,即蓋上蓋片后,因結構中的所述微槽道其內表面占據了大部分的液流通道的內表面,那么,該PDMS微槽道內表面其強烈的疏水特性,是決定性因素,它會使得類似于水溶液的極性液體微細液流的通過變得十分困難,其流動阻力之大,甚至一般的微泵都難以推動,當然,如果蓋片也選擇使用該PDMS材料,那么,問題基本上一樣,大同小異;因此,在現有技術之中,特別針對該PDMS材料上的微槽道內表面進行改性修飾,是必須的操作;那么,這個針對PDMS微槽道內表面的改性操作很麻煩嗎?那倒也不是這個問題,構成嚴重技術困擾的,是另一個問題:這個PDMS材料基片其體相內部的PDMS聚合物分子具有自動向表面擴散、遷移的特性,這種基片體相內部PDMS聚合物分子自動向表面擴散、遷移的特性,將使得經過表面改性修飾的那個微槽道其內表面的改性之后的狀態并不能維持足夠長的時間,那個經表面改性之后的微槽道其內表面狀態的維持時間大致僅夠完成實驗室內部測試實驗的時間需要;換句話說,經過表面改性或表面修飾的該PDMS微槽道內表面,其改性之后或曰修飾之后所形成的表面狀態并不能持久,而是很快地自動趨于或曰變回表面改性之前的表面狀態,在較短的時間里就回到那種原本的強烈疏水的表面狀態,那么,試想,這樣的微流控芯片能夠大量制作、大量儲存、廣泛推廣嗎,答案很明顯,那就是,不可能。這個PDMS材料上的微槽道,不做表面修飾的話,類似于水溶液的極性溶液微細液流無法泵送通過,芯片也就沒法使用;而如果做了表面修飾,又無法持久保持其修飾之后的狀態,還是同樣無法推廣應用。

            那么,如何做到既能夠利用廉價的PDMS材料來制作基片,而又能夠解除所述微槽道內表面修飾狀態無法持久、芯片無法大量制作、大量儲備進而廣泛推廣這樣一個令本領域眾多專業人員長期糾結的困擾,就是一個明擺著的其技術障礙不可小覷的高難度問題。

            該高難度問題已經存在很多個年頭了,迄今為止,尚未得到妥善解決。

            其二,未經表面修飾的PDMS材料,上文已經述及,其表面強烈疏水,這種強烈疏水的材料表面并且還有另一個問題,那就是,這種強烈疏水的PDMS表面會吸附生物大分子,并且,這些被吸附的生物大分子還會進一步地在PDMS表面上更深一步的沉陷,漸陷漸深,直至沉陷入到PDMS基片的體相之內,其實,這種過程,部分地也是由于PDMS材料體相內部聚合物分子具有向表面擴散、遷移運動所導致;這種情況,也可以從另一個角度來解釋,即,持續不斷地由PDMS體相內部向其表面擴散、遷移的那些聚合物分子,其運動的結果,是逐 漸地將那些已經被表面吸附的生物大分子卷入PDMS基片的體相之內,簡單地說,這些被吸附的生物大分子就是被PDMS基片體相吞沒了;那么,這種PDMS基片體相吞沒生物大分子的現象,其所造成的影響,必然是導致涉及生物大分子的各類實驗測試數據的嚴重偏差。

            如上所述,PDMS基片的問題是,它不但表面吸附生物大分子,而且吞沒生物大分子,這樣一來,作為實驗測試對象的生物大分子其消失不會因為表面飽和吸附而停止,而是,不斷被吸附,還不斷地被吞沒。

            關于PDMS基片在相關實驗測試過程中其體相不斷吞沒測試相關生物大分子的現象,另一種解釋是說,PDMS體相內存在大量的微小氣孔,相關生物大分子被表面吸附之后,沉陷進入這些微小氣孔,進而被吞沒;然而,本案發明人認為,那些能夠容許微小尺度的空氣分子擠入其間的所述微小氣孔,不等于說它們也能直接容許相對大尺度的生物大分子進入,兩者在尺度上差別巨大,不可一概而論。撇開解釋,無論怎樣,作為相關測試分析對象的生物大分子被PDMS基片微槽道內表面吸附,進而不斷被PDMS基片體相所吞沒,這是已知客觀存在的現象。

            為了阻止這種PDMS基片體相對于生物大分子的吞沒作用,可以從遏制PDMS表面對生物大分子的吸附來著手解決,辦法就是針對該PDMS材料表面進行化學修飾改性,對于以PDMS為基片材料的情況來講,就是對所述的微槽道部分的表面進行化學修飾改性,經過化學修飾改性的所述微槽道內表面,能夠遏制其對生物大分子的吸附,進而避免生物大分子被PDMS基片體相所吞沒;但是,還是那個老問題,那就是,PDMS材料表面上的化學修飾改性之后的表面狀態無法持久保持,該PDMS基片體相內部的聚合物分子其自動向表面擴散、遷移的過程,會很快地將那個經過表面化學修飾改性的微槽道內表面狀態變回原本的強烈疏水并且強烈吸附生物大分子的狀態,換句話說,無論該領域專業人員們怎樣折騰,該PDMS基片其微槽道內表面總是快速地向強烈疏水表面狀態演變。

            那么,如何既能夠獲得PDMS材料價格極其低廉、基片制作極其簡易的好處,又能夠達成長期遏制該PDMS基片微槽道內表面對生物大分子的吸附進程,進而阻止PDMS基片體相對生物大分子的吞沒作用,使得相關芯片制成品能夠維持一個足夠長時間的、合理的保質期,就是一個十分棘手的難題。該難題如同上文述及的另一個難題一樣,同樣令本領域眾多專業人員長期糾結、困擾,該難題同樣是一個明擺著的其技術障礙不可小覷的高難度問題。該難題也已經存在很多個年頭了,迄今為止,也尚未得到妥善解決。



            技術實現要素:

            本發明所要解決的技術問題是,提供一個一攬子的解決方案,一攬子地解決上文述及的兩個難題,并且,將該解決方案應用于亞型豬流感診斷用多通道微流控芯片領域,形成一種 新型的亞型豬流感診斷用多通道裝置。

            本發明通過如下方案解決所述技術問題,該方案提供的裝置是一種強疏水PDMS作為基片材質的亞型豬流感檢測用芯片裝置,該裝置的結構包括多通道微流控芯片,該微流控芯片的結構包括相互貼合裝設在一起的基片和蓋片,所述基片和蓋片均為板狀物或片狀物,該基片的面向該蓋片的那個面含有經由模壓工藝或刻蝕工藝形成的槽道結構,該基片還含有與該槽道結構相連并且洞穿該基片的經由模壓工藝、刻蝕工藝或簡單打孔工藝形成的窗口結構,相互貼合安裝在一起的該基片與該蓋片共同構建成了含有管道結構以及與之相連的液池結構的微流控芯片,該管道的結構位置位于該基片與該蓋片相互貼合的界面區域,該窗口其一側被該蓋片封堵而另一側開放,該窗口的結構位置就是所述液池的結構位置,所述液池的數量是三個,其中的兩個液池其結構位置位于該微流控芯片的進樣端,余下的一個液池其結構位置位于該微流控芯片實際進樣測試時其芯片內液體流動的終端,該終端與該進樣端相互遠離,該管道的一端經由同樣位于該相互貼合的界面區域的歧管狀岔道分別與位于進樣端的該兩個液池聯通,該管道的另一端與位于該微流控芯片的所述終端的該余下的一個液池聯通,以及,依序分別裝設在該管道內不同位置上的工作電極以及對電極以及參比電極,所述工作電極由導電性電極以及貼附在該導電性電極上的包埋了亞型豬流感特異性抗原的金膠敏感膜構成,該管道的構造呈并聯構造,所述呈并聯構造的管道由三條分支管道并聯構成,所述工作電極的數量是三個,該三個工作電極的裝設位置分別位于所述三條分支管道內,以及,該三個工作電極其表層金膠敏感膜結構中的特異性抗原分別是對亞型豬流感抗體能特異性結合的三種亞型豬流感抗原物質,該三種抗原物質分別是亞型豬流感特異性抗原H1N1、H3N2及H1N2,所述工作電極其材質是黃金材質或熱分解導電高分子材質,所述工作電極其形貌呈現片狀或絲狀,重點是,該基片其材質是聚二甲基硅氧烷材質,該基片其表面是原生形態的表面,該原生形態的表面其意思指的是沒有經過任何表面化學修飾或任何表面化學改性的該材質的原生形態的表面,該裝置的結構還包括合頁式夾具,該合頁式夾具其外形輪廓形似合頁,該合頁式夾具由相互鉸接在一起的兩個頁片以及貫穿該兩個頁片的一個緊固螺絲以及一個與該緊固螺絲匹配并與該緊固螺絲套接在一起的用于手動緊固及手動松脫的螺帽構成,該合頁式夾具的兩個頁片各以其末梢相互靠攏并夾持該微流控芯片,所述末梢定位在該微流控芯片的鄰近所述終端的結構位置上,至少在其中的一個所述頁片上貼附固定裝設有微型超聲波換能器,以及,高頻振蕩電訊號傳輸電纜,該高頻振蕩電訊號傳輸電纜的一端與該微型超聲波換能器連接在一起;該合頁式夾具提供了一個方便該裝置拆解的功能;該微型超聲波換能器其主要功能是在微流控芯片實際進樣測試時,利用其所發射的超聲波來降低試樣溶液與所述管道的內壁之間的界面張力,使其能夠相容,并且,利用所述進樣端以及所述終端與該 微型超聲波換能器裝設位置之間的距離差異以及其所感受到的超聲波強度上的差異,誘導形成所述進樣端其界面張力與所述終端其界面張力之間的差異,該微流控芯片該兩端之間的界面張力差異會在該微流控芯片的該兩端之間形成壓力差異,該壓力差異會驅動試樣溶液向所述終端流動;該微型超聲波換能器其功能還包括以其所發射的超聲波遏止試樣中所含有的生物大分子其在所述管道內表面上的吸附,進而遏止該聚二甲基硅氧烷材質的基片其體相對該生物大分子的吞沒作用;所述聚二甲基硅氧烷材質的基片其功能包括與蓋片及工作電極及對電極及參比電極一同構建該微流控芯片,柔軟并具彈性的該聚二甲基硅氧烷材質的基片其功能還包括以其對超聲波強烈吸收的性質,對超聲波進行強烈吸收,并藉此在該微流控芯片該終端到該進樣端之間的有限的短距離之內實現超聲波強度的快速遞減。

            當然也可以在兩個所述頁片上都裝設所述的微型超聲波換能器;但是,僅裝設一個微型超聲波換能器已經足夠應付使用了。

            合頁一詞其本身的技術含義是公知的。

            所述金膠敏感膜是將殼聚糖金膠溶液與亞型豬流感特異性抗體溶液充分混合均勻,用點樣儀點樣或涂布于指定結構位置,并使其干燥成膜而成。所述金膠敏感膜中的亞型豬流感特異性抗體均為辣根過氧化物酶或者葡糖糖氧化酶標記的亞型豬流感抗體,所述金膠敏感膜已包含為固定上述各亞型豬流感特異性抗體而引入其中的輔助性介質,所述輔助性介質例如殼聚糖、醋酸纖維素、明膠其中的一種或它們的混合物。

            所述微流控芯片結構中的所述管道以及所述分支管道以及所述歧管狀岔道,其內徑尺寸均可以是任意選定的尺寸,但是,出于盡量少用待測液樣以及降低試劑損耗等方面的考慮,所述管道以及所述分支管道以及所述歧管狀岔道最好均選用毛細管級的通道,所述毛細管級的通道意即其內徑與通常意義上的毛細管的內徑相當的通道。所述毛細管其內部通道的橫截面形狀可以是任意的形狀,所述橫截面形狀例如圓形、橢圓形、方形、矩形、條形,當然也可以是任意的存在彎曲的線形,并且,所述毛細管的內部形狀隨著管道的延伸,不同部位的橫截面形狀也可以允許是不同的形狀。僅就毛細管一詞而言,其技術含義是公知的。

            結構中涉及的對電極以及參比電極均為微小尺寸的電極,其電極形狀均可以是任意選定的形狀,所述任意選定的形狀例如方片形狀、矩形片狀、條狀或圓形片狀等等。所述對電極以及所述參比電極其本身的詞匯的技術含義是公知的。

            本案微流控芯片結構中涉及若干個液池,所述液池是用于過渡性儲液的池形或囊形構造,其中的每一個液池的內腔其形狀均可以是任意選定的形狀,所述內腔形狀例如圓柱形空腔狀、方柱形空腔狀、橢圓形空腔狀或球形空腔狀等等。所述液池的尺寸可以是任意選定的 尺寸,但是,為了能夠盡量少用待測液樣以及降低試劑損耗,所述液池最好是能夠與毛細管匹配的微小型的液池。

            僅就超聲波換能器一詞其本身的技術含義對于超聲波技術領域的專業人員來說,是公知的。

            各種尺寸、各種形狀的超聲波換能器均有市售;市售的微型超聲波換能器其尺寸可以小到僅以毫米計算的量級。

            僅就微型超聲波換能器其在一般工業應用對象固態物體表面上的固定技術其本身而言,對于超聲波技術領域的專業人員來說,是已知的一般技術。本案不對此展開贅言。

            僅就裸的PDMS基片其本身的微槽道模壓或刻蝕技術來說,是極簡單的已知的技術;同樣地,在裸的PDMS基片上開孔洞的技術更是已知的簡單技術。本案亦不對此展開贅言。

            所涉高頻振蕩電訊號傳輸電纜其各種規格的工業產品市場均有售。

            該裝置的結構還可以包括高頻振蕩電訊號發生器;所述高頻振蕩電訊號傳輸電纜其另一端可以與該高頻振蕩電訊號發生器連接。

            所涉高頻振蕩電訊號發生器其本身的技術,對于超聲波技術領域的專業人員來說,是簡單的和公知的;所述高頻振蕩電訊號發生器可以向超聲波儀器專業廠家定制。

            該微型超聲波換能器其額定超聲波發射功率的優選范圍是介于5毫瓦與9000毫瓦之間;該微型超聲波換能器其在運行時所發射的超聲波的頻率的優選范圍是介于100KHz與12MHz之間。

            本案裝置當然還可以進一步包括一些附件,所述附件例如多道電化學工作站等等,所述多道電化學工作站的技術含義是公知的。本案微流控芯片結構中涉及的各個工作電極以及對電極以及參比電極等,可以分別經由相應的專用串線與所述多道電化學工作站的相應接口進行聯接。所述專用串線是用來將各所述電極與所述多道電化學工作站的各相應接口進行相互聯接的專用電纜。本案裝置中的所述微流控芯片,其結構也可以包括微閥,所述微閥的數量不限,根據實際需要,所述微閥可以裝設在該微流控芯片結構中的任何需要安裝的部位;該微閥一詞對于微流控芯片技術領域的專業人員來說,其本身的技術含義是公知的;該微閥其本身的制作技術及使用技術亦是公知的;該微閥不是必需的構件。

            所述工作電極的直徑可以允許是任意設定的便于安裝使用的適宜的直徑,但是,推薦的或曰優選的所述直徑其范圍介于0.1微米至2000微米之間;所述工作電極的長度可以允許是任意設定的便于安裝使用的長度,但是,推薦的或曰優選的所述長度其范圍是在1微米至15000微米個之間。

            通過噴涂或點樣儀點樣或其它合適工藝涂布裝設于所述工作電極表面層的所述金膠敏感膜,其膜層厚度可以允許是任意設定的可對待測樣液發生電性信號響應的厚度,但是,推薦的厚度或者說是優選的厚度是介于10納米與200納米之間。

            芯片結構中的所述蓋片,其材質可以允許是任何的電絕緣性材質,例如:聚丙烯、玻璃、聚甲基丙烯酸甲酯、聚二甲基硅氧烷,等等,為了做出更小尺寸的微流控芯片,比如做成長度僅2.0厘米到3.0厘米的超小尺寸的微流控芯片,并在該極短的距離內實現對超聲波的極快速衰減,可以優選聚二甲基硅氧烷來作為蓋片。當然,在大尺寸的微流控芯片上選擇使用聚二甲基硅氧烷來作為所述蓋片,也是本案技術方案所允許的。

            位于該微流控芯片的該進樣端的該兩個液池其與位于該微流控芯片該終端的該余下的一個液池之間的直線距離根據需要可以是任意選定的合適的距離,但是,該距離的優選值是介于3厘米與7厘米之間。

            所述蓋片及基片其厚度可以允許是任意設定的便于裝配的厚度,推薦的厚度或曰優選的厚度是介于1.0毫米與5.0毫米之間。較小的厚度有利于節省材料。

            本案微流控芯片的使用方法:

            基于本案首次提出并首次公開的該新型液流驅動原理,本案微流控芯片其應用運作之中,該新型液流驅動方法決定了完全不需要牽扯到任何外加的微泵。

            本案以所述超聲波所造成的該微流控芯片該兩端之間所形成的該界面張力差異,驅動液流在該三通道微流控芯片的毛細管通道中流動,利用多通道電化學分析儀器分別對三種亞型豬流感診斷抗原加以檢測。

            以三種亞型豬流感抗原來偵測相應的三種亞型豬流感抗體,與用三種亞型豬流感抗體來偵測相應的三種亞型豬流感抗原,同樣地,都能夠診斷相應的亞型豬流感;其所依據的原理是,亞型豬流感病患體內必然是抗原、抗體并存,并相互可逆結合,形成可逆的結合物,因此,用抗原來偵測抗體并藉此診斷相應的亞型豬流感,與用抗體去偵測抗原并診斷相應的亞型豬流感,都可以達到診斷目的。當然,不同的手段其相應的電極敏感修飾層在技術上并不相同。

            本案微流控芯片的具體檢測使用步驟如下:

            1、在微管路中加入血清樣品液,在所述超聲波驅動下,各種亞型豬流感抗體分子被各通道中電極表面上金膠敏感膜包埋的相應的辣根過氧化物酶標記的亞型豬流感特異性抗原捕獲。

            2、辣根過氧化物酶標記的亞型豬流感特異性抗原與血清樣品中的亞型豬流感抗體形成免疫復合物。

            3、采用多通道電化學分析儀,加入鄰苯二酚等電子媒介體,采用安培法檢測上述反應引起的電流變化,由此獲得各種分析物的種類和含量。

            4、將結果進行綜合分析,對亞型豬流感抗體進行綜合診斷。

            本發明的優點是,在所述微流控芯片的所述終端其鄰近位置定位所述合頁式夾具,以該合頁式夾具其頁片上所貼附安裝的微型超聲波換能器,利用其所發射的低功率、高頻頻段的超聲波,使得未經過表面化學改性或表面化學修飾的強烈疏水的該微流控芯片內部管道其管壁與測試對象水溶液之間的相容性大幅增加,這為試樣液流的通過提供了一個現實可能性;同時,利用聚二甲基硅氧烷基片其對超聲波的強烈吸收能力,在比較短的距離內,也就是,從所述終端到所述進樣端之間的僅數厘米尺度的很短的距離內,達成超聲波強度的快速遞減,藉此在該微流控芯片的所述兩端造成所述界面張力的差異,進而,利用該兩端之間的界面張力的差異其所形成的該兩端之間的壓力差異,驅動試樣液流在這樣一種原本強烈疏水的毛細管通道內向所述終端方向流動。藉由本案液流驅動方案,完全無須對該聚二甲基硅氧烷材質的基片及其內部管道進行任何的表面化學修飾或化學改性,完全免除了該表面化學修飾或化學改性的麻煩程序;并且完全免除了傳統意義上的微泵之類的設備;另一方面,該低功率、高頻頻段的超聲波,還能夠遏制試樣中的生物大分子在該無修飾的裸的聚二甲基硅氧烷基片其管道內表面上的吸附,進而遏制該聚二甲基硅氧烷基片其體相對所述生物大分子的吞沒作用;所述抗原、抗體以及抗原與抗體的可逆結合物當然都是屬于所述的生物大分子的類型;由于所述的吸附作用以及所述的吞沒作用被有效地遏制,因此,相關測試結果將更加能夠客觀地反映實際情況;該低功率、高頻頻段超聲波的作用,當然還包括促成抗原、抗體之間的可逆結合反應的快速達成,這使得相關測試操作能夠以比較快的速度完成。

            由于不需要進行針對該聚二甲基硅氧烷基片其相關表面的表面化學修飾或化學改性操作,因此,這個表面化學修飾層或化學改性層根本就不需要存在,那么,該聚二甲基硅氧烷基片其體相內部聚合物分子不斷自動向表面擴散、遷移其所導致的對所述表面化學修飾層或化學改性層的破壞性影響也就不存在了。

            本案的技術方案一攬子地化解了上文述及的與聚二甲基硅氧烷基片其應用相關的一系列技術難題。基于本案方案,該種十分廉價的聚二甲基硅氧烷材料便有可能在該微流控芯片制備、生產、應用等等領域發揮更大的作用。

            本案結構中的該合頁式夾具其頁片上固定裝設了所述微型超聲波換能器,該結構提供了一個方便該裝置拆解的功能,如此,該合頁式夾具連同其頁片上所附的微型超聲波換能器便能夠方便地與該微流控芯片相互脫離,那么,該部分可自由脫離的構件便能夠良性循環地重復使用許多次;該結構特征有利于節約該裝置的使用成本。

            附圖說明

            圖1是本案該裝置其實施例芯片部分構造的示意圖,所展示的是該例結構的俯視角度下的芯片內部管道及各電極及各相關液池的結構形態,該圖中沒有描繪出所述合頁式夾具以及其頁片上附設的微型超聲波換能器以及其它所述附件。

            圖2是本案該裝置其大略的外觀側視圖。

            圖中,1、2、8分別是三個裝設位置不同的液池,3是歧管狀岔道,4、9、12分別是裝設位置不同但相互并聯形成并聯聯通結構的三條分支管道,5是裝設在分支管道4內的其表層金膠敏感膜結構中的特異性抗原物質為亞型豬流感特異性抗原H1N1的工作電極,10是裝設在分支管道9內的其表層金膠敏感膜結構中的特異性抗原物質為亞型豬流感特異性抗原H3N2的工作電極,11是裝設在分支管道12內的其表層金膠敏感膜結構中的特異性抗原物質為亞型豬流感特異性抗原H1N2的工作電極,6是對電極,7是參比電極,13是合頁式夾具,14標示鉸接機構所在位置,15是緊固螺絲,16是高頻振蕩電訊號傳輸電纜,17是微型超聲波換能器,18、23分別是結構位置不同的兩個頁片,19是蓋片,20是基片,21是進樣端,22是終端,24是螺帽;圖例中的該合頁式夾具結構僅是示意的圖例結構,實際該合頁式夾具其結構不限于該圖例合頁式夾具結構;圖例中的箭頭符號標示該微流控芯片其在實際運行時,受兩端壓力差驅動,其試樣液流的流動方向。

            具體實施方式

            在圖1及圖2所展示的本案該實施例中,該裝置的結構包括多通道微流控芯片,該微流控芯片的結構包括相互貼合裝設在一起的基片20和蓋片19,所述基片20和蓋片19均為板狀物或片狀物,該基片20的面向該蓋片19的那個面含有經由模壓工藝或刻蝕工藝形成的槽道結構,該基片20還含有與該槽道結構相連并且洞穿該基片20的經由模壓工藝、刻蝕工藝或簡單打孔工藝形成的窗口結構,相互貼合安裝在一起的該基片20與該蓋片19共同構建成了含有管道結構以及與之相連的液池結構的微流控芯片,該管道的結構位置位于該基片20與該蓋片19相互貼合的界面區域,該窗口其一側被該蓋片19封堵而另一側開放,該窗口的結構位置就是所述液池的結構位置,所述液池的數量是三個,該三個液池分別是液池1、液池2、液池8,其中的兩個液池即液池1和液池2其結構位置位于該微流控芯片的進樣端21,余下的一個液池即液池8其結構位置位于該微流控芯片實際進樣測試時其芯片內液體流動的終端22,該終端22與該進樣端21相互遠離,該管道的一端經由同樣位于該相互貼合的界面區域的歧管狀岔道3分別與位于進樣端21的該兩個液池即液池1和液池2聯通,該管道的另一端與位于該微流控芯片的所述終端22的該余下的一個液池即液池8聯通,以及,依序分別裝設在該管道內不同位置上的工作電極以及對電極6以及參比電極7,所述工作電 極由導電性電極以及貼附在該導電性電極上的包埋了亞型豬流感特異性抗原的金膠敏感膜構成,該管道的構造呈并聯構造,所述呈并聯構造的管道由三條分支管道并聯構成,所述工作電極的數量是三個,該三個工作電極的裝設位置分別位于所述三條分支管道內,以及,該三個工作電極其表層金膠敏感膜結構中的特異性抗原分別是對亞型豬流感抗體能特異性結合的三種亞型豬流感抗原物質,該三種抗原物質分別是亞型豬流感特異性抗原H1N1、H3N2及H1N2,具體展開來講,5是裝設在分支管道4內的其表層金膠敏感膜結構中的特異性抗原物質為亞型豬流感特異性抗原H1N1的工作電極,10是裝設在分支管道9內的其表層金膠敏感膜結構中的特異性抗原物質為亞型豬流感特異性抗原H3N2的工作電極,11是裝設在分支管道12內的其表層金膠敏感膜結構中的特異性抗原物質為亞型豬流感特異性抗原H1N2的工作電極,所述工作電極其材質是黃金材質或熱分解導電高分子材質,所述工作電極其形貌呈現片狀或絲狀,重點是,該基片20其材質是聚二甲基硅氧烷材質,該基片20其表面是原生形態的表面,該原生形態的表面其意思指的是沒有經過任何表面化學修飾或任何表面化學改性的該材質的原生形態的表面,該裝置的結構還包括合頁式夾具13,該合頁式夾具13其外形輪廓形似合頁,該合頁式夾具13由相互鉸接在一起的兩個頁片18、23以及貫穿該兩個頁片18、23的一個緊固螺絲15以及一個與該緊固螺絲15匹配并與該緊固螺絲15套接在一起的用于手動緊固及手動松脫的螺帽24構成,圖例中的該螺帽24是一種蝶形螺帽,該種蝶形螺帽比較便利于實際操作,該合頁式夾具13的兩個頁片18、23各以其末梢相互靠攏并夾持該微流控芯片,所述末梢定位在該微流控芯片的鄰近所述終端22的結構位置上,至少在其中的一個所述頁片即頁片18或頁片23上貼附固定裝設有微型超聲波換能器17,本例中,該微型超聲波換能器17是貼附裝設在頁片18上,以及,高頻振蕩電訊號傳輸電纜16,該高頻振蕩電訊號傳輸電纜16的一端與該微型超聲波換能器17連接在一起;該合頁式夾具13提供了一個方便該裝置拆解的功能;該微型超聲波換能器17其主要功能是在微流控芯片實際進樣測試時,利用其所發射的超聲波來降低試樣溶液與所述管道的內壁之間的界面張力,使其能夠相容,并且,利用所述進樣端21以及所述終端22與該微型超聲波換能器17裝設位置之間的距離差異以及其所感受到的超聲波強度上的差異,誘導形成所述進樣端21其界面張力與所述終端22其界面張力之間的差異,該微流控芯片該兩端之間的界面張力差異會在該微流控芯片的該兩端之間形成壓力差異,該壓力差異會驅動試樣溶液向所述終端22流動;該微型超聲波換能器17其功能還包括以其所發射的超聲波遏止試樣中所含有的生物大分子其在所述管道內表面上的吸附,進而遏止該聚二甲基硅氧烷材質的基片20其體相對該生物大分子的吞沒作用;所述聚二甲基硅氧烷材質的基片20其功能包括與蓋片19及工作電極5、10、11及對電極6及參比電極7一同構建該微流控芯片,柔軟并具彈 性的該聚二甲基硅氧烷材質的基片20其功能還包括以其對超聲波強烈吸收的性質,對超聲波進行強烈吸收,并藉此在該微流控芯片該終端22到該進樣端21之間的有限的短距離之內實現超聲波強度的快速遞減。

            圖例中的箭頭符號標示該微流控芯片其在實際運行時,受兩端壓力差驅動,其試樣液流的流動方向。

            圖1中沒有繪出該合頁式夾具13以及其一個頁片上所附設的該微型超聲波換能器17以及高頻振蕩電訊號傳輸電纜16;并且,圖1及圖2中均沒有繪出所述高頻振蕩電訊號發生器及多道電化學工作站等附屬件。

            所涉微型超聲波換能器17市場有售;也可以向超聲波換能器廠家定制。

            所涉高頻振蕩電訊號傳輸電纜16市場有售;也可以向超聲波換能器廠家定制。

            所涉高頻振蕩電訊號發生器市場有接近需要的產品可購;也可以向相關廠家定制。

            本例結構中的各工作電極以及對電極以及參比電極可以分別經由各自專用的電纜或曰串線分別與作為附件的多道電化學工作站的對應電纜接口或曰串線接口聯接。

            所涉合頁式夾具13其本身可以利用市售合頁進行簡單的切割改制。圖例中的合頁式夾具13的結構形態僅是一個實例,本案合頁式夾具的結構形態不限于該圖例中的結構形態。

            慣常表達意義上的毛細管指的是親水的玻璃毛細管;本案所涉的毛細管通道卻是疏水的毛細管形態的管道。

            當前第1頁1 2 3 
            網友詢問留言 已有0條留言
            • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
            1
            婷婷六月激情在线综合激情,亚洲国产大片,久久中文字幕综合婷婷,精品久久久久久中文字幕,亚洲一区二区三区高清不卡,99国产精品热久久久久久夜夜嗨 ,欧美日韩亚洲综合在线一区二区,99国产精品电影,伊人精品线视天天综合,精品伊人久久久大香线蕉欧美
            亚洲精品1区 国产成人一级 91精品国产欧美一区二区 亚洲精品乱码久久久久久下载 国产精品久久久久久久伊一 九色国产 国产精品九九视频 伊人久久成人爱综合网 欧美日韩亚洲区久久综合 欧美日本一道免费一区三区 夜夜爽一区二区三区精品 欧美日韩高清一区二区三区 国产成人av在线 国产精品对白交换绿帽视频 国产视频亚洲 国产在线欧美精品 国产精品综合网 国产日韩精品欧美一区色 国产日韩精品欧美一区喷 欧美日韩在线观看区一二 国产区精品 欧美视频日韩视频 中文字幕天天躁日日躁狠狠躁97 视频一二三区 欧美高清在线精品一区二区不卡 国产精品揄拍一区二区久久 99久久综合狠狠综合久久aⅴ 亚洲乱码视频在线观看 日韩在线第二页 亚洲精品无码专区在线播放 成人亚洲网站www在线观看 欧美三级一区二区 99久久精品免费看国产高清 91麻豆国产在线观看 最新日韩欧美不卡一二三区 成人在线观看不卡 日韩国产在线 在线亚洲精品 亚洲午夜久久久久中文字幕 国产精品成人久久久久久久 精品国产一区二区在线观看 欧美精品国产一区二区三区 中文在线播放 亚洲第一页在线视频 国产午夜精品福利久久 九色国产 精品国产九九 国产永久视频 久久精品人人做人人综合试看 国产一区二区三区免费观看 亚洲精品国产电影 9999热视频 国产精品资源在线 麻豆久久婷婷国产综合五月 国产精品免费一级在线观看 亚洲国产一区二区三区青草影视 中文在线播放 国产成人综合在线 国产在线观看色 国产亚洲三级 国产片一区二区三区 久久99精品久久久久久牛牛影视 亚洲欧美日韩国产 四虎永久免费网站 国产一毛片 国产精品视频在 九九热在线精品 99精品福利视频 色婷婷色99国产综合精品 97成人精品视频在线播放 精品久久久久久中文字幕 亚洲欧美一区二区三区孕妇 亚洲欧美成人网 日韩高清在线二区 国产尤物在线观看 在线不卡一区二区 91网站在线看 韩国精品福利一区二区 欧美日韩国产成人精品 99热精品久久 国产精品免费视频一区 高清视频一区 精品九九久久 欧美日韩在线观看免费 91欧美激情一区二区三区成人 99福利视频 亚洲国产精品91 久热国产在线 精品久久久久久中文字幕女 国产精品久久久久久久久99热 成人自拍视频网 国产精品视频久久久久久 久久影院国产 国产玖玖在线观看 99精品在线免费 亚洲欧美一区二区三区导航 久久久久久久综合 国产欧美日韩精品高清二区综合区 国产精品视频自拍 亚洲一级片免费 久久久久久九九 国产欧美自拍视频 视频一区二区在线观看 欧美日韩一区二区三区久久 中文在线亚洲 伊人热人久久中文字幕 日韩欧美亚洲国产一区二区三区 欧美亚洲国产成人高清在线 欧美日韩国产码高清综合人成 国产性大片免费播放网站 亚洲午夜综合网 91精品久久一区二区三区 国产无套在线播放 国产精品视频网站 国产成人亚洲精品老王 91在线网站 国产视频97 欧美黑人欧美精品刺激 国产一区二区三区免费在线视频 久久久国产精品免费看 99re6久精品国产首页 久久精品91 国产成人一级 国产成人精品曰本亚洲 日本福利在线观看 伊人成综合网 久久综合一本 国产综合久久久久久 久久精品成人免费看 久久福利 91精品国产91久久久久久麻豆 亚洲精品成人在线 亚洲伊人久久精品 欧美日本二区 国产永久视频 国产一区二 一区二区福利 国产一毛片 亚洲精品1区 毛片一区二区三区 伊人久久大香线蕉综合影 国产欧美在线观看一区 亚洲国产欧洲综合997久久 国产一区二区免费视频 国产91精品对白露脸全集观看 久久亚洲国产伦理 欧美成人伊人久久综合网 亚洲性久久久影院 久久99国产精一区二区三区! 91精品国产欧美一区二区 欧美日韩亚洲区久久综合 日韩精品一二三区 久久久夜色精品国产噜噜 国产在线精品福利91香蕉 久久久久久久亚洲精品 97se色综合一区二区二区 91国语精品自产拍在线观看性色 91久久国产综合精品女同我 日韩中文字幕a 国产成人亚洲日本精品 久久国产精品-国产精品 久久国产经典视频 久久国产精品伦理 亚洲第一页在线视频 国产精品久久久久三级 日韩毛片网 久久免费高清视频 麻豆国产在线观看一区二区 91麻豆国产福利在线观看 国产成人精品男人的天堂538 一区二区三区中文字幕 免费在线视频一区 欧美日韩国产成人精品 国产综合网站 国产资源免费观看 亚洲精品亚洲人成在线播放 精品久久久久久中文字幕专区 亚洲人成人毛片无遮挡 国产一起色一起爱 国产香蕉精品视频在 九九热免费观看 日韩亚洲欧美一区 九九热精品在线观看 精品久久久久久中文字幕专区 亚洲欧美自拍偷拍 国产精品每日更新 久久久久国产一级毛片高清板 久久天天躁狠狠躁夜夜中文字幕 久久精品片 日韩在线毛片 国产成人精品本亚洲 国产成人精品一区二区三区 九九热在线观看 国产r级在线观看 国产欧美日韩精品高清二区综合区 韩国电影一区二区 国产精品毛片va一区二区三区 五月婷婷伊人网 久久一区二区三区免费 一本色道久久综合狠狠躁篇 亚洲综合色站 国产尤物在线观看 亚洲一区亚洲二区 免费在线视频一区 欧洲精品视频在线观看 日韩中文字幕a 中文字幕日本在线mv视频精品 91精品在线免费视频 精品国产免费人成在线观看 精品a级片 中文字幕日本在线mv视频精品 日韩在线精品视频 婷婷丁香色 91精品国产高清久久久久 国产成人精品日本亚洲直接 五月综合视频 欧美日韩在线亚洲国产人 精液呈暗黄色 亚洲乱码一区 久久精品中文字幕不卡一二区 亚洲天堂精品在线 激情婷婷综合 国产免费久久精品久久久 国产精品亚洲二区在线 久久免费播放视频 五月婷婷丁香综合 在线亚洲欧美日韩 久久免费精品高清麻豆 精品久久久久久中文字幕 亚洲一区网站 国产精品福利社 日韩中文字幕免费 亚洲综合丝袜 91精品在线播放 国产精品18 亚洲日日夜夜 伊人久久大香线蕉综合影 亚洲精品中文字幕乱码影院 亚洲一区二区黄色 亚洲第一页在线视频 一区二区在线观看视频 国产成人福利精品视频 亚洲高清二区 国内成人免费视频 精品亚洲性xxx久久久 国产精品合集一区二区三区 97av免费视频 国产一起色一起爱 国产区久久 国产资源免费观看 99精品视频免费 国产成人一级 国产精品九九免费视频 欧美91精品久久久久网免费 99热国产免费 久久精品色 98精品国产综合久久 久久精品播放 中文字幕视频免费 国产欧美日韩一区二区三区在线 精品久久蜜桃 国产小视频精品 一本色道久久综合狠狠躁篇 91在线免费观看 亚洲精品区 伊人成综合网 伊人热人久久中文字幕 伊人黄色片 99国产精品热久久久久久夜夜嗨 久久免费精品视频 亚洲一区二区三区高清不卡 久久久久国产一级毛片高清板 国产片一区二区三区 久久狠狠干 99久久婷婷国产综合精品电影 国产99区 国产精品成人久久久久 久久狠狠干 青青国产在线观看 亚洲高清国产拍精品影院 国产精品一区二区av 九九热在线免费视频 伊人久久国产 国产精品久久久久久久久久一区 在线观看免费视频一区 国产精品自在在线午夜区app 国产精品综合色区在线观看 国产毛片久久久久久国产毛片 97国产免费全部免费观看 国产精品每日更新 国产尤物视频在线 九九视频这里只有精品99 一本一道久久a久久精品综合 久久综合给会久久狠狠狠 国产成人精品男人的天堂538 欧美一区二区高清 毛片一区二区三区 国产欧美日韩在线观看一区二区三区 在线国产二区 欧美不卡网 91在线精品中文字幕 在线国产福利 国内精品91久久久久 91亚洲福利 日韩欧美国产中文字幕 91久久精品国产性色也91久久 亚洲性久久久影院 欧美精品1区 国产热re99久久6国产精品 九九热免费观看 国产精品欧美日韩 久久久久国产一级毛片高清板 久久国产经典视频 日韩欧美亚洲国产一区二区三区 欧美亚洲综合另类在线观看 国产精品自在在线午夜区app 97中文字幕在线观看 视频一二三区 精品国产一区在线观看 国产欧美日韩在线一区二区不卡 欧美一区二三区 伊人成人在线观看 国内精品91久久久久 97在线亚洲 国产在线不卡一区 久久久全免费全集一级全黄片 国产精品v欧美精品∨日韩 亚洲毛片网站 在线不卡一区二区 99re热在线视频 久久激情网 国产毛片一区二区三区精品 久久亚洲综合色 中文字幕视频免费 国产视频亚洲 婷婷伊人久久 国产一区二区免费播放 久久99国产精品成人欧美 99国产在线视频 国产成人免费视频精品一区二区 国产不卡一区二区三区免费视 国产码欧美日韩高清综合一区 久久精品国产主播一区二区 国产一区电影 久久精品国产夜色 国产精品国产三级国产 日韩一区二区三区在线 久久97久久97精品免视看 久久国产免费一区二区三区 伊人久久大香线蕉综合电影网 99re6久精品国产首页 久久激情网 亚洲成人高清在线 国产精品网址 国产成人精品男人的天堂538 香蕉国产综合久久猫咪 国产专区中文字幕 91麻豆精品国产高清在线 久久国产经典视频 国产精品成人va在线观看 国产精品爱啪在线线免费观看 日本精品久久久久久久久免费 亚洲综合一区二区三区 久久五月网 精品国产网红福利在线观看 久久综合亚洲伊人色 亚洲国产精品久久久久久网站 在线日韩国产 99国产精品热久久久久久夜夜嗨 国产综合精品在线 国产区福利 精品亚洲综合久久中文字幕 国产制服丝袜在线 毛片在线播放网站 在线观看免费视频一区 国产精品久久久精品三级 亚洲国产电影在线观看 最新日韩欧美不卡一二三区 狠狠综合久久综合鬼色 日本精品1在线区 国产日韩一区二区三区在线播放 欧美日韩精品在线播放 亚洲欧美日韩国产一区二区三区精品 久久综合久久网 婷婷六月激情在线综合激情 亚洲乱码一区 国产专区91 97av视频在线观看 精品久久久久久中文字幕 久久五月视频 国产成人福利精品视频 国产精品网址 中文字幕视频在线 精品一区二区三区免费视频 伊人手机在线视频 亚洲精品中文字幕乱码 国产在线视频www色 色噜噜国产精品视频一区二区 精品亚洲成a人在线观看 国产香蕉尹人综合在线 成人免费一区二区三区在线观看 国产不卡一区二区三区免费视 欧美精品久久天天躁 国产专区中文字幕 久久精品国产免费中文 久久精品国产免费一区 久久无码精品一区二区三区 国产欧美另类久久久精品免费 欧美精品久久天天躁 亚洲精品在线视频 国产视频91在线 91精品福利一区二区三区野战 日韩中文字幕免费 国产精品99一区二区三区 欧美成人高清性色生活 国产精品系列在线观看 亚洲国产福利精品一区二区 国产成人在线小视频 国产精品久久久久免费 99re热在线视频 久久久久久久综合 一区二区国产在线播放 成人国产在线视频 亚洲精品乱码久久久久 欧美日韩一区二区综合 精品久久久久免费极品大片 中文字幕视频二区 激情粉嫩精品国产尤物 国产成人精品一区二区视频 久久精品中文字幕首页 亚洲高清在线 国产精品亚洲一区二区三区 伊人久久艹 中文在线亚洲 国产精品一区二区在线播放 国产精品九九免费视频 亚洲二区在线播放 亚洲狠狠婷婷综合久久久久网站 亚洲欧美日韩网站 日韩成人精品 亚洲国产一区二区三区青草影视 91精品国产福利在线观看 国产精品久久久久久久久99热 国产一区二区精品尤物 久碰香蕉精品视频在线观看 亚洲日日夜夜 在线不卡一区二区 国产午夜亚洲精品 九九热在线视频观看这里只有精品 伊人手机在线视频 91免费国产精品 日韩欧美中字 91精品国产91久久久久 国产全黄三级播放 视频一区二区三区免费观看 国产开裆丝袜高跟在线观看 国产成人欧美 激情综合丝袜美女一区二区 国产成人亚洲综合无 欧美精品一区二区三区免费观看 欧美亚洲国产日韩 日韩亚州 国产欧美日韩精品高清二区综合区 亚洲午夜国产片在线观看 精品久久久久久中文字幕 欧美精品1区 久久伊人久久亚洲综合 亚洲欧美日韩精品 国产成人精品久久亚洲高清不卡 久久福利影视 国产精品99精品久久免费 久久久久免费精品视频 国产日产亚洲精品 亚洲国产午夜电影在线入口 精品无码一区在线观看 午夜国产精品视频 亚洲一级片免费 伊人久久大香线蕉综合影 国产精品久久影院 久碰香蕉精品视频在线观看 www.欧美精品 在线小视频国产 亚洲国产天堂久久综合图区 欧美一区二区三区不卡 日韩美女福利视频 九九精品免视频国产成人 不卡国产00高中生在线视频 亚洲第一页在线视频 欧美日韩在线播放成人 99re视频这里只有精品 国产精品91在线 精品乱码一区二区三区在线 国产区久久 91麻豆精品国产自产在线观看一区 日韩精品成人在线 九九热在线观看 国产精品久久不卡日韩美女 欧美一区二区三区综合色视频 欧美精品免费一区欧美久久优播 国产精品网址 国产专区中文字幕 国产精品欧美亚洲韩国日本久久 日韩美香港a一级毛片 久久精品123 欧美一区二区三区免费看 99r在线视频 亚洲精品国产字幕久久vr 国产综合激情在线亚洲第一页 91免费国产精品 日韩免费小视频 亚洲国产精品综合一区在线 国产亚洲第一伦理第一区 在线亚洲精品 国产精品一区二区制服丝袜 国产在线成人精品 九九精品免视频国产成人 亚洲国产网 欧美日韩亚洲一区二区三区在线观看 在线亚洲精品 欧美一区二区三区高清视频 国产成人精品男人的天堂538 欧美日韩在线观看区一二 亚洲欧美一区二区久久 久久精品中文字幕首页 日本高清www午夜视频 久久精品国产免费 久久999精品 亚洲国产精品欧美综合 88国产精品视频一区二区三区 91久久偷偷做嫩草影院免费看 国产精品夜色视频一区二区 欧美日韩导航 国产成人啪精品午夜在线播放 一区二区视频在线免费观看 99久久精品国产自免费 精液呈暗黄色 久久99国产精品 日本精品久久久久久久久免费 精品国产97在线观看 99re视频这里只有精品 国产视频91在线 999av视频 亚洲美女视频一区二区三区 久久97久久97精品免视看 亚洲国产成人久久三区 99久久亚洲国产高清观看 日韩毛片在线视频 综合激情在线 91福利一区二区在线观看 一区二区视频在线免费观看 激情粉嫩精品国产尤物 国产成人精品曰本亚洲78 国产成人精品本亚洲 国产精品成人免费视频 国产成人啪精品视频免费软件 久久精品国产亚洲妲己影院 国产精品成人久久久久久久 久久大香线蕉综合爱 欧美一区二区三区高清视频 99热国产免费 在线观看欧美国产 91精品视频在线播放 国产精品福利社 欧美精品一区二区三区免费观看 国产一区二区免费视频 国产午夜精品一区二区 精品视频在线观看97 91精品福利久久久 国产一区福利 国产综合激情在线亚洲第一页 国产精品久久久久久久久久久不卡 九色国产 在线日韩国产 黄网在线观看 亚洲一区小说区中文字幕 中文字幕丝袜 日本二区在线观看 日本国产一区在线观看 欧美日韩一区二区三区久久 欧美精品亚洲精品日韩专 国产日产亚洲精品 久久综合九色综合欧美播 亚洲国产欧美无圣光一区 欧美视频区 亚洲乱码视频在线观看 久久无码精品一区二区三区 九九热精品免费视频 久久99精品久久久久久牛牛影视 国产精品成久久久久三级 国产一区福利 午夜国产精品视频 日本二区在线观看 99久久网站 国产亚洲天堂 精品国产一区二区三区不卡 亚洲国产日韩在线一区 国产成人综合在线观看网站 久久免费高清视频 欧美在线导航 午夜精品久久久久久99热7777 欧美久久综合网 国产小视频精品 国产尤物在线观看 亚洲国产精品综合一区在线 欧美一区二区三区不卡视频 欧美黑人欧美精品刺激 日本福利在线观看 久久国产偷 国产手机精品一区二区 国产热re99久久6国产精品 国产高清啪啪 欧美亚洲国产成人高清在线 国产在线第三页 亚洲综合一区二区三区 99r在线视频 99精品久久久久久久婷婷 国产精品乱码免费一区二区 国产在线精品福利91香蕉 国产尤物视频在线 五月婷婷亚洲 中文字幕久久综合伊人 亚洲精品一级毛片 99国产精品电影 在线视频第一页 久久99国产精品成人欧美 国产白白视频在线观看2 成人精品一区二区www 亚洲成人网在线观看 麻豆91在线视频 色综合合久久天天综合绕视看 久久精品国产免费高清 国产不卡一区二区三区免费视 欧美国产中文 99精品欧美 九九在线精品 国产中文字幕在线免费观看 国产一区中文字幕在线观看 国产成人一级 国产精品一区二区制服丝袜 国产一起色一起爱 亚洲精品成人在线 亚洲欧美精品在线 国产欧美自拍视频 99精品久久久久久久婷婷 久99视频 国产热re99久久6国产精品 视频一区亚洲 国产精品视频分类 国产精品成在线观看 99re6久精品国产首页 亚洲在成人网在线看 亚洲国产日韩在线一区 久久国产三级 日韩国产欧美 欧美在线一区二区三区 国产精品美女一级在线观看 成人午夜免费福利视频 亚洲天堂精品在线 91精品国产手机 欧美日韩视频在线播放 狠狠综合久久综合鬼色 九一色视频 青青视频国产 亚洲欧美自拍一区 中文字幕天天躁日日躁狠狠躁97 日韩免费大片 996热视频 伊人成综合网 亚洲天堂欧美 日韩精品亚洲人成在线观看 久久综合给会久久狠狠狠 日韩精品亚洲人成在线观看 日韩国产欧美 亚洲成aⅴ人片在线影院八 亚洲精品1区 99久久精品免费 国产精品高清在线观看 国产精品久久久免费视频 在线亚洲欧美日韩 91在线看视频 国产精品96久久久久久久 欧美日韩国产成人精品 91在线亚洲 热久久亚洲 国产精品美女免费视频观看 日韩在线毛片 亚洲永久免费视频 九九免费在线视频 亚洲一区网站 日本高清二区视频久二区 精品国产美女福利在线 伊人久久艹 国产精品久久久久三级 欧美成人精品第一区二区三区 99久久精品国产自免费 在线观看日韩一区 国产中文字幕一区 成人免费午夜视频 欧美日韩另类在线 久久99国产精品成人欧美 色婷婷中文网 久久天天躁夜夜躁狠狠躁2020 欧美成人伊人久久综合网 国产精品福利资源在线 国产伦精品一区二区三区高清 国产精品亚洲综合色区韩国 亚洲一区欧美日韩 色综合视频 国语自产精品视频在线区 国产高清a 成人国内精品久久久久影 国产在线精品香蕉综合网一区 国产不卡在线看 国产成人精品精品欧美 国产欧美日韩综合精品一区二区三区 韩国电影一区二区 国产在线视频www色 91中文字幕在线一区 国产人成午夜免视频网站 亚洲综合一区二区三区 色综合视频一区二区观看 久久五月网 九九热精品在线观看 国产一区二区三区国产精品 99久热re在线精品996热视频 亚洲国产网 在线视频亚洲一区 日韩字幕一中文在线综合 国产高清一级毛片在线不卡 精品国产色在线 国产高清视频一区二区 精品日本久久久久久久久久 亚洲国产午夜精品乱码 成人免费国产gav视频在线 日韩欧美一区二区在线观看 欧美曰批人成在线观看 韩国电影一区二区 99re这里只有精品6 日韩精品一区二区三区视频 99re6久精品国产首页 亚洲欧美一区二区三区导航 欧美色图一区二区三区 午夜精品视频在线观看 欧美激情在线观看一区二区三区 亚洲热在线 成人国产精品一区二区网站 亚洲一级毛片在线播放 亚洲一区小说区中文字幕 亚洲午夜久久久久影院 国产自产v一区二区三区c 国产精品视频免费 久久调教视频 国产成人91激情在线播放 国产精品欧美亚洲韩国日本久久 久久亚洲日本不卡一区二区 91中文字幕网 成人国产在线视频 国产视频91在线 欧美成人精品第一区二区三区 国产精品福利在线 久久综合九色综合精品 欧美一区二区三区精品 久久国产综合尤物免费观看 久久99青青久久99久久 日韩精品免费 久久国产精品999 91亚洲视频在线观看 国产精品igao视频 色综合区 在线亚洲欧国产精品专区 国产一区二区三区在线观看视频 亚洲精品成人在线 一区二区国产在线播放 中文在线亚洲 亚洲精品第一国产综合野 国产一区二区精品久久 一区二区三区四区精品视频 99热精品久久 中文字幕视频二区 国产成人精品男人的天堂538 99精品影视 美女福利视频一区二区 久久午夜夜伦伦鲁鲁片 综合久久久久久久综合网 国产精品国产欧美综合一区 国产99视频在线观看 国产亚洲女在线精品 婷婷影院在线综合免费视频 国产亚洲3p一区二区三区 91成人爽a毛片一区二区 亚洲一区二区高清 国产欧美亚洲精品第二区首页 欧美日韩导航 亚洲高清二区 欧美激情观看一区二区久久 日韩毛片在线播放 亚洲欧美日韩高清中文在线 亚洲日本在线播放 国产精品一区二区制服丝袜 精品国产一区二区三区不卡 国产不卡在线看 国产欧美网站 四虎永久在线观看视频精品 国产黄色片在线观看 夜夜综合 一本色道久久综合狠狠躁篇 欧美亚洲综合另类在线观看 国产91在线看 伊人久久国产 欧美一区二区在线观看免费网站 国产精品久久久久三级 久久福利 日韩中文字幕a 亚洲午夜久久久久影院 91在线高清视频 国产亚洲一区二区三区啪 久久人精品 国产精品亚洲午夜一区二区三区 综合久久久久久 久久伊人一区二区三区四区 国产综合久久久久久 日韩一区精品视频在线看 国产精品日韩欧美制服 日本精品1在线区 99re视频 无码av免费一区二区三区试看 国产视频1区 日韩欧美中文字幕一区 日本高清中文字幕一区二区三区a 亚洲国产欧美无圣光一区 国产在线视频一区二区三区 欧美国产第一页 在线亚洲欧美日韩 日韩中文字幕第一页 在线不卡一区二区 伊人久久青青 国产精品一区二区在线播放 www.五月婷婷 麻豆久久婷婷国产综合五月 亚洲精品区 久久国产欧美另类久久久 99在线视频免费 伊人久久中文字幕久久cm 久久精品成人免费看 久久这里只有精品首页 88国产精品视频一区二区三区 中文字幕日本在线mv视频精品 国产在线精品成人一区二区三区 伊人精品线视天天综合 亚洲一区二区黄色 国产尤物视频在线 亚洲精品99久久久久中文字幕 国产一区二区三区免费观看 伊人久久大香线蕉综合电影网 国产成人精品区在线观看 日本精品一区二区三区视频 日韩高清在线二区 久久免费播放视频 一区二区成人国产精品 国产精品免费精品自在线观看 亚洲精品视频二区 麻豆国产精品有码在线观看 精品日本一区二区 亚洲欧洲久久 久久中文字幕综合婷婷 中文字幕视频在线 国产成人精品综合在线观看 91精品国产91久久久久福利 精液呈暗黄色 香蕉国产综合久久猫咪 国产专区精品 亚洲精品无码不卡 国产永久视频 亚洲成a人片在线播放观看国产 一区二区国产在线播放 亚洲一区二区黄色 欧美日韩在线观看视频 亚洲精品另类 久久国产综合尤物免费观看 国产一区二区三区国产精品 高清视频一区 国产精品igao视频 国产精品资源在线 久久综合精品国产一区二区三区 www.五月婷婷 精品色综合 99热国产免费 麻豆福利影院 亚洲伊人久久大香线蕉苏妲己 久久电影院久久国产 久久精品伊人 在线日韩理论午夜中文电影 亚洲国产欧洲综合997久久 伊人国产精品 久草国产精品 欧美一区精品二区三区 亚洲成人高清在线 91免费国产精品 日韩精品福利在线 国产一线在线观看 国产不卡在线看 久久99青青久久99久久 亚洲精品亚洲人成在线播放 99久久免费看国产精品 国产日本在线观看 青草国产在线视频 麻豆久久婷婷国产综合五月 国产中文字幕一区 91久久精品国产性色也91久久 国产一区a 国产欧美日韩成人 国产亚洲女在线精品 一区二区美女 中文字幕在线2021一区 在线小视频国产 久久这里只有精品首页 国产在线第三页 欧美日韩中文字幕 在线亚洲+欧美+日本专区 精品国产一区二区三区不卡 久久这里精品 欧美在线va在线播放 精液呈暗黄色 91精品国产手机 91在线免费播放 欧美视频亚洲色图 欧美国产日韩精品 日韩高清不卡在线 精品视频免费观看 欧美日韩一区二区三区四区 国产欧美亚洲精品第二区首页 亚洲韩精品欧美一区二区三区 国产精品视频免费 在线精品小视频 久久午夜夜伦伦鲁鲁片 国产无套在线播放 久热这里只精品99re8久 欧美久久久久 久久香蕉国产线看观看精品蕉 国产成人精品男人的天堂538 亚洲人成网站色7799在线观看 日韩在线第二页 一本色道久久综合狠狠躁篇 国产一区二区三区不卡在线观看 亚洲乱码在线 在线观看欧美国产 久久福利青草精品资源站免费 国产玖玖在线观看 在线亚洲精品 亚洲成aⅴ人在线观看 精品91在线 欧美一区二三区 日韩中文字幕视频在线 日本成人一区二区 日韩免费专区 国内精品在线观看视频 久久国产综合尤物免费观看 国产精品系列在线观看 一本一道久久a久久精品综合 亚洲免费播放 久久精品国产免费 久久人精品 亚洲毛片网站 亚洲成a人一区二区三区 韩国福利一区二区三区高清视频 亚洲精品天堂在线 一区二区三区中文字幕 亚洲国产色婷婷精品综合在线观看 亚洲国产成人久久笫一页 999国产视频 国产精品香港三级在线电影 欧美日韩一区二区三区四区 日韩国产欧美 国产精品99一区二区三区 午夜国产精品理论片久久影院 亚洲精品中文字幕麻豆 亚洲国产高清视频 久久免费手机视频 日韩a在线观看 五月婷婷亚洲 亚洲精品中文字幕麻豆 中文字幕丝袜 www国产精品 亚洲天堂精品在线 亚洲乱码一区 国产日韩欧美三级 久久999精品 伊人热人久久中文字幕 久热国产在线视频 国产欧美日韩在线观看一区二区三区 国产一二三区在线 日韩国产欧美 91精品国产91久久久久 亚洲一区小说区中文字幕 精品一区二区免费视频 国产精品视频免费 国产精品亚洲综合色区韩国 亚洲国产精品成人午夜在线观看 欧美国产日韩精品 中文字幕精品一区二区精品