一種新型藥物手性拆分納米色譜柱及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于分析技術領域，涉及一種藥物手性拆分納米色譜柱的制備。
【背景技術】
[0002] 在分析化學領域，手性藥物的分析是一個重要的研宄課題。手性分離的方法有多 種，如手性超臨界流體色譜法，已成為制藥行業的首選技術分析，因為其速度快，效率高。逆 流色譜法也是一種新型的、高效拆分手性藥物的方法，它的高效是基于連續液-液色譜技 術。但高效液相色譜仍是一種傳統的手性分離方法，負載能力很高，人們常用，可需要一個 高效的手性色譜柱。
[0003] 1-甲基-3-苯基丙胺和2-羥基-3-甲氧基-3, 3-二苯基丙酸手性化合物，前者主 要用于合成柳胺芐心定鹽酸鹽中間體，柳胺芐心定鹽酸鹽是一種治療原發性高血壓、繼發 性高血壓、妊娠期高血壓和其他類型的高血壓的緊急理想抗高血壓藥物；后者主要用于達 盧生坦和安倍生坦重要中間體的合成，達盧生坦和安倍生坦是內皮素受體拮抗劑，用于治 療高血壓和頑固性高血壓，如心力衰竭。據報道，在達盧生坦和安倍生坦結構中因為其手性 中心的存在是有治療效果的主要原因。所以建立高效拆分手性藥物的色譜柱非常必要。
【發明內容】
[0004] 為了解決液相色譜法拆分手性藥物的技術問題，本發明提供了一種藥物手性拆分 納米色譜柱及其制備方法，采用該法制備的納米色譜柱，能有效地拆分1-甲基-3-苯基丙 胺和2-羥基-3-甲氧基-3, 3-二苯基丙酸手性化合物，該方法制備的納米色譜柱具有操作 簡單、重現性好、靈敏度高和準確度的優點。
[0005] 本發明的目的可以通過以下技術方案實現：
[0006] 一種新型藥物手性拆分納米色譜柱，該納米色譜柱包括裝入色譜柱的修飾納米二 氧化娃填料，所述的修飾納米二氧化娃填料由下述步驟制得：
[0007] ①稱取一定量納米二氧化硅，依次用NaOH、去離子水、HC1、去離子水沖洗，取出沖 洗后的納米二氧化硅干燥；
[0008] ②向干燥后的納米二氧化硅中加入硅烷化試劑，電磁攪拌，再加入乙二醛甲醇溶 液，電磁攪拌，過濾，用去離子水沖洗后干燥，待用；
[0009] ③（1R，3S)樟腦酸的修飾：稱取一定量（1R，3S)樟腦酸和醋酸酐，常溫電磁攪拌回 流，冷卻過濾，再用無水甲醇沖洗，真空干燥，得到純樟腦酸酐，待用；
[0010] ④稱取一定量上述③中得到的樟腦酸酐溶解于干燥的二氯甲烷中，待用；
[0011] ⑤稱取一定量3-(氨甲基）吡啶溶解在另一份干燥的二氯甲烷中，待用；
[0012] ⑥將④與⑤混合，電磁攪拌回流，冷卻過濾，再用去離子水沖洗，真空干燥，得到純 中間體I ;
[0013] ⑦稱取一定量純中間體I溶解于甲醇中，依次滴加二氯草酸和二甲基甲酰胺，電 磁攪拌回流，冷卻過濾，再用去離水沖洗，真空干燥，得到純中間體II ;
[0014] ⑧將一定量純中間體II溶解于甲醇中，加入上述步驟②中所獲得的物質，電磁攪 拌回流，冷卻過濾，再用去離水沖洗，真空干燥，得到修飾好的純納米二氧化硅。
[0015] 優選地，步驟①中所述的納米二氧化娃粒徑為40-60nm ;所述的納米二氧化娃依 次用1.0 mol/L NaOH沖洗20分鐘，去離子水沖洗20分鐘，1.0 mol/L HCl沖洗40分鐘，去離 子水沖洗20分鐘，取出沖洗后的納米二氧化硅在110°C下干燥10小時。
[0016] 優選地，步驟②中所述的硅烷化試劑由體積比為1 :1的3-氨丙基三乙氧基硅烷與 甲醇配制而成，加入硅烷化試劑后，恒溫55°C，以300轉/分鐘轉速電磁攪拌24小時；所述 的乙二醛甲醇溶液由體積比為1 :1的乙二醛與甲醇配制而成，加入乙二醛甲醇溶液后，恒 溫60°C下，以300轉/分鐘轉速電磁攪拌24小時；干燥條件為：在100°C下干燥2小時。
[0017] 優選地，步驟③中所述的電磁攪拌回流2小時，轉速200轉/分鐘，冷卻到0°C，過 濾。
[0018] 優選地，步驟⑥中所述的電磁攪拌條件為：恒溫55°C，轉速200轉/分鐘，回流8小 時，冷卻到室溫。
[0019] 優選地，步驟⑦中所述的電磁攪拌條件為：常溫，轉速200轉/分鐘，回流2小時， 冷卻到0°C。
[0020] 優選地，步驟⑧中所述的電磁攪拌條件為：恒溫70°C，轉速300轉/分鐘，回流6小 時，冷卻到室溫。
[0021] 本發明還提供了一種新型藥物手性拆分納米色譜柱的制備方法，包括下述順序的 步驟：
[0022] ①稱取一定量納米二氧化硅依次用1.0 mol/L NaOH沖洗20分鐘，用去離子水沖洗 20分鐘，用1.0 mol/L HCl沖洗40分鐘，用去離子水沖洗20分鐘，取出干凈的納米二氧化 硅，在110°C下干燥10小時；
[0023] ②向干燥后的納米二氧化硅加入硅烷化試劑，恒溫55°C，電磁攪拌24小時，再加 入乙二醛甲醇溶液，恒溫60°C，電磁攪拌24小時，過濾，用去離子水沖洗，在100°C下干燥2 小時；
[0024] ③（1R，3S)樟腦酸的修飾：稱取一定量（1R，3S)樟腦酸和醋酸酐，常溫電磁攪拌回 流2小時，冷卻到0°C，過濾，用無水甲醇沖洗，真空干燥，得到純樟腦酸酐；
[0025] ④稱取一定量樟腦酸酐溶解于干燥的二氯甲烷中；
[0026] ⑤稱取一定量3_(氨甲基）吡啶溶解在40.0 mL干燥的二氯甲烷中；
[0027] ⑥將④與⑤混合，恒溫55°C，電磁攪拌回流8小時，冷卻到室溫，過濾，再用去離子 水沖洗，真空干燥，得到純中間體I ;
[0028] ⑦稱取純中間體I溶解于甲醇中，滴加二氯草酸和二甲基甲酰胺，常溫電磁攪拌 回流2小時，冷卻到0°C，過濾，再用去離水沖洗，真空干燥，得到純中間體II ;
[0029] ⑧將純中間體II溶解于甲醇中，加入步驟②所獲得的物質，恒溫70°C，電磁攪拌回 流6小時，冷卻到室溫，過濾，再用去離水沖洗，真空干燥，得到修飾好的純納米二氧化硅；
[0030] ⑨將制備好的修飾納米二氧化硅填料，用色譜柱填裝泵裝入準備好的色譜柱即 可。
[0031] 本發明的有益效果：
[0032] 本發明制備的納米色譜柱具有操作簡單、重現性好、靈敏度高和準確度的優點；
[0033] 本發明方法制備的修飾納米二氧化硅填料性能優越，可有效地拆分1-甲基-3-苯 基丙胺和2-羥基-3-甲氧基-3, 3-二苯基丙酸手性化合物。
【具體實施方式】
[0034] 下面結合具體實施例對本發明作進一步詳細描述。
[0035] 為了檢驗本發明制備的納米二氧化硅色譜柱的可行性和優越性，我們拆分了 1-甲基-3-苯基丙胺和2-羥基-3-甲氧基-3, 3-二苯基丙酸手性化合物，根據檢測結果， 對該方法制備的納米色譜柱可行性和優越性進行了評價。
[0036] 實施例1
[0037] 1)修飾納米二氧化硅色譜柱的制備
[0038] ①稱取5g納米二氧化硅（40-60nm)放入玻璃沙芯漏斗中，用1.0 mol/L NaOH沖洗 20分鐘，再用去離子水沖洗20分鐘，然后用1.0 mol/L HCl沖洗40分鐘，最后用去離子水沖 洗20分鐘，取出干凈的納米二氧化硅，放入干凈、干燥的燒杯中，在IKTC下干燥10小時。
[0039] ②向1中加入硅烷化試劑3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTS)甲醇溶液（1 :1，V/ V) 21mL，電磁攪拌（轉速300轉/分鐘）恒溫55°C，24小時。然后，加入IOmL乙二醛甲醇 溶液（1 :1，V/V)，電磁攪拌（轉速300轉/分鐘）恒溫60°C，24小時，過濾，用去離子水沖 洗，在100°C下干燥2小時。
[0040] ③（1R，3S)樟腦酸的修飾：稱取5. 0g(lR，3S)樟腦酸和3. OmL醋酸酐放入150mL 園底蒸餾燒瓶中，常溫電磁攪拌（轉速200轉/分鐘）回流2小時，冷卻到0°C，過濾，再用 無水甲醇沖洗，真空干燥，得到純樟腦酸酐。
[0041] ④稱取2. 7g樟腦酸酐溶解于25. OmL干燥的二氯甲烷中。
[0042] ⑤稱取I. 6g 3-(氨甲基）吡啶溶解在20.0 mL干燥的二氯甲烷。
[0043] ⑥將④與⑤混合，恒溫55°C，電磁攪拌（轉速200轉/分鐘）回流8小時，然后冷 卻到室溫，過濾，再用去離子水沖洗，真空干燥，得到純中間體。
[0044] ⑦稱取⑥純中間體3. 2g使其溶解于25. OmL甲醇中，然后滴加5. OmL二氯草酸和 1滴二甲基甲酰胺，常溫電磁攪拌（轉速200轉/分鐘）回流2小時，冷卻到0°C，過濾，再 用去離水沖洗，真空干燥，得到純中間體。
[0045] ⑧將⑦得到的中間體3. 5g溶解于25. OmL甲醇中，然后加入6. Og②所獲得的物 質，恒溫70°C，電磁攪拌（轉速300轉/分鐘）回流6小時，冷卻到室溫，過濾，再用去離水 沖洗，真空干燥，得到修飾好的純納米二氧化硅。
[0046] ⑨將制備好的修飾納米二氧化硅填料，用色譜柱填裝泵裝入準備好的色譜柱即 可。
[0047] 2)對上述制備的修飾納米二氧化硅色譜柱進行評價
[0048] 將1-甲基-3-苯基丙胺㈧和2-羥基-3-甲氧基-3, 3-二苯基丙酸⑶溶液分 別進行測定。所得測定結果見下表。從表中可以看出，相對標準偏差小于0.44%。
[0049]
[0050] 實施例2
[0051] 1)修飾納米二氧化硅色譜柱的制備
[0052] ①稱取IOg納米二氧化硅（40-60nm)放入玻璃沙芯漏斗中，用1.0 mol/L NaOH沖 洗20分鐘，再用去離子水沖洗20分鐘，然后用1.0 mol/L HCl沖洗40分鐘，最后用去離子 水沖洗20分鐘，取出干凈的納米二氧化硅，放入干凈、干燥的燒杯中，在IKTC下干燥10小 時。
[0053] ②向1中加入硅烷化試劑3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTS)甲醇溶液（1 :1，V/ V)42mL，電磁攪拌（轉速300轉/分鐘）恒溫55°C，24小時。然后，加入IOmL乙二醛甲醇 溶液（1 :1，V/V)，電磁攪拌（轉速300轉/分鐘）恒溫60°C，24