一種單端孢菌毒素凈化柱及其凈化方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種霉菌毒素多功能凈化柱，以及利用該霉菌毒素多功能凈化柱對樣品中，對單端孢菌毒素類毒素進行富集凈化的方法。
【背景技術】
[0002]霉菌毒素對糧食、飼料的污染已是一個全球性熱點問題。目前已知的霉菌毒素高達幾百種，而食品、飼料、飲料、藥材行業中危害較大的主要是以黃曲霉毒素(Aflatoxm)，赫曲霉毒素A (Ochratoxin A)，單端抱菌毒素(Trichothecenes)，玉米赤霉稀酬(Zearalenone)，煙曲霉毒素(Fumonisin)和串珠謙刀菌素(Moniliformin)發生較多，由于霉菌毒素種類繁多、結構復雜多樣，對食品飼料的污染越來越廣泛，長期以來對霉菌毒素的定量檢測成為困擾我們的重要難題之一，尤其是時下那快速高效的凈化處理顯得尤為重要。
[0003]為了確保后續準確分析食品、飼料中污染和殘留的霉菌毒素，就需要對萃取液進行凈化濃縮，目前各種固相萃取柱和免疫親和柱進行凈化處理存在操作繁瑣、污染大、定量差、耗時長；尤其是免疫親和柱凈化成本太高造成企業和國家質檢機構的檢測成本居高不下，直接造成這些凈化方法的。在處理時間長，應用范圍有限，成本較高，凈化效果并不理想等缺點。
【發明內容】
[0004]本發明的目的在于提供一種單端孢菌毒素凈化柱和單端孢菌毒素用復合基質填料，以及一種單端孢菌毒素的樣品凈化處理方法，價格低廉、能夠同時凈化多種毒素，且樣品處理簡單，操作簡便易行、快速準確、回收率高，能夠針對不同樣品進行富集凈化處理。
[0005]本發明采用如下技術方案實現:
[0006]一種單端孢菌毒素凈化柱，包括一個柱體，所述柱體的下端設置有復合基質填料，在所述復合基質填料下方設置有一個單向閥，在所述單向閥的下方設置有一個儲液管，所述儲液管中設置有萃取液。
[0007]一種單端孢菌毒素用復合基質填料，其特征在于，所述復合基質填料包括:納米石墨化碳黑、氧化鋁、硅鋁酸鹽類吸附劑和硅膠，填料粒度為5?100 μπι之間，質量組成比例為:納米石墨化碳黑5?50%、氧化鋁5?90%、硅鋁酸鹽類吸附劑5?90%。硅膠5?90%。
[0008]一種納米石墨化碳黑的硝酸氧化處理方法，其特征在于，該方法包括如下步驟:
[0009](I)取10g納米石墨化碳黑和500mL硝酸
[0010](2)將混合液在回流裝置中加熱滾沸持續8h，得到懸浮溶液；
[0011](3)將此懸浮液于室溫下靜止放置直至溶液分層，吸取上層清液得到沉淀層；
[0012](4)在沉淀層中加入與上層清液等量的水，加熱沸騰lh，不要太劇烈，得到懸浮液，靜止放置直至溶液分層；
[0013](5)反復重復步驟(3)、(4)，得到多次洗滌后的沉淀層和上層清液的分層溶液；
[0014](6)對該分層溶液在離心機中進行洗滌分離，直至上層清液的pH值保持不變；
[0015](7)將步驟6中得到的分層溶液進行過濾，過濾后得到的納米石墨化碳黑在烘箱中進行干燥，得到最終硝酸氧化處理后的納米石墨化碳黑。
[0016]進一步的，在步驟⑴中硝酸的質量份數為40%。
[0017]一種單端孢菌毒素的樣品凈化處理方法，其特征在于，該方法的步驟是:以一定比例的有機溶液為萃取液對含有霉菌毒素樣品進行萃取處理，過濾后將濾液通過單端孢菌毒素凈化柱進行凈化，分離出霉菌毒素。
[0018]進一步的，所述有機溶液為甲醇或乙腈。
[0019]采用本發明的多功能凈化柱，洗脫分離，能夠快速地對食品和飼料的提取液進行凈化分離，整個操作過程不超過20分鐘；本發明采用不同的填料配置適用于不同基質的樣品、不同種類的霉菌毒素(樣品為玉米粉、花生醬、稻谷時:硅膠較少，氧化鋁增加)，適用范圍廣，凈化效果好，滿足對不同種類的樣品、不同種類的霉菌毒素的分析要求；本發明使用的填料為常見化學物質，性質穩定，易于制造和保存，使用方便快捷；本發明的填料經過特殊工藝處理，結構改造后對毒素樣品的選擇性凈化有很好的作用.復合填料的功效對目標物的純化起到了更加優化的作用。
【附圖說明】
[0020]圖1是凈化柱色譜填料分層結構的示意圖。
[0021]圖2是糧食類樣品凈化前后溶液圖譜。
[0022]圖3是樣品溶液經本專利凈化柱處理后再進樣色譜分析的圖譜。
【具體實施方式】
[0023]通過下面對實施例的描述，將更加有助于公眾理解本發明，但不能也不應當將申請人所給出的具體的實施例視為對本發明技術方案的限制，任何對部件或技術特征的定義進行改變和/或對整體結構作形式的而非實質的變換都應視為本發明的技術方案所限定的保護范圍。
[0024]如圖1至圖3所示，單端孢菌毒素凈化柱，包括一個柱體1，柱體I的下部為凈化液儲存部2，柱體I的下端設置有復合基質填料3，在復合基質填料3下方設置有一個單向閥5，在單向閥5的下方設置有一個儲液管6，在本實施例中儲液管6是無熒光儲液管，在該無熒光儲液管中設置有萃取液。
[0025]一種單端孢菌毒素用復合基質填料，復合基質填料包括:納米石墨化碳黑、氧化鋁、硅鋁酸鹽類吸附劑和硅膠，填料粒度為5?10ym之間，質量組成比例為:納米石墨化碳黑5?50%、氧化鋁5?90%、硅鋁酸鹽類吸附劑5?90%。硅膠5?90%。
[0026]一種納米石墨化碳黑的硝酸氧化處理方法，該方法包括如下步驟:
[0027](I)取10g納米石墨化碳黑和500mL硝酸
[0028](2)將混合液在回流裝置中加熱滾沸持續8h，得到懸浮溶液；
[0029](3)將此懸浮液于室溫下靜止放置直至溶液分層，吸取上層清液得到沉淀層；
[0030](4)在沉淀層中加入與上層清液等量的水，加熱沸騰lh，(說明書:不要太劇烈)，得到懸浮液，靜止放置直至溶液分層；
[0031](5)反復重復步驟(3)、(4)，得到多次洗滌后的沉淀層和上層清液的分層溶液；
[0032](6)對該分層溶液在離心機中進行洗滌分離，直至上層清液的pH值保持不變；
[0033](7)將步驟6中得到的分層溶液進行過濾，過濾后得到的納米石墨化碳黑在烘箱中進行干燥，得到最終硝酸氧化處理后的納米石墨化碳黑。
[0034]在另一實施例中，在步驟(I)中硝酸的質量份數為40%。
[0035]又一實施例中的硅膠處理方法:用檸檬酸鈉還原氯金酸法得到10_15nm直徑的金納米粒子，另取50um全多孔硅膠加入到反應器中，再依次加入二甲苯30ml、巰基硅烷試劑20ml、吡啶15ml加熱回流反應24小時后降溫，以甲苯、二氯甲烷、甲醇、丙酮洗滌產物后烘干，加入另一反應器中，加入起初制備的金納米粒子，再加入過量的正十八硫醇，加熱回流反應48小時，產物過濾并以甲醇、丙酮洗后烘干，即得。
[0036]一種單端孢菌毒素的樣品凈化處理方法，該方法的步驟是:以一定比例的有機溶液為萃取液對含有霉菌毒素樣品進行萃取處理，過濾后將濾液通過單端孢菌毒素凈化柱進行凈化，分離出霉菌毒素。
[0037]在又一實施例中，有機溶液為甲醇或乙腈。
[0038]應用實施例1:
[0039]玉米中嘔吐毒素、雪腐鐮刀菌烯檢測(200柱凈化)
[0040]填料配置情況:所述填料分層裝填包括納米石墨化碳黑、超細微氧化鋁、硅鋁酸鹽類吸附劑、硅膠，填料粒度為5?500 μ m之間。
[0041]糧食玉米中嘔吐毒素等的檢測:
[0042]待