一種提高養殖水體透明度的復合微生態制劑及其應用
【技術領域】
[0001]本發明屬于微生態技術領域，涉及一種復合微生態制劑，具體涉及一種提高養殖水體透明度的復合微生態制劑及其應用。
【背景技術】
[0002]“養魚先養水”，水色和透明度是池塘養殖的重要指標。透明度能夠影響整個水體的穩定性以及水的肥力，對于整個水體的穩定、魚蝦健康成長、病害的防治有著積極的作用。隨著水產養殖密度增加，投餌量的增加，代謝產物，糞便、殘餌等有機物會大量堆積，水體會出現渾濁水、黃泥巴水、黑水等透明度較低的惡化水質。
[0003]微生物作為一種生態調節劑能夠增加溶氧、降低氨氮與亞硝酸鹽氮、抑制有害微生物的繁殖并迅速降解有機物、維持水生生態平衡。目前應用的凈水微生物主要種類有光合細菌、芽孢桿菌、硝化細菌、酵母菌等。在高密度的水產養殖過程中，適時加入芽孢桿菌等微生物制劑等，能加快水體的物質循環，降低養殖水體中氨氮、亞硝酸鹽等，經常使用有助于水體保持穩定，水既不太“肥”也不易變“清”，水環境長時間處于良好水平。
【發明內容】
[0004]針對降解有機物、降低氨氮，改善養殖水體環境，本發明提供了一種提高養殖水體透明度的復合微生態制劑及其應用，本發明將兩種芽孢桿菌與乳酸菌復配使用，可顯著提高水體透明度，凈化水質。
[0005]為實現上述發明目的，本發明通過下述技術方案予以實現:
一種提高養殖水體透明度的復合微生態制劑，所述復合微生態制劑包括菌含量不低于5 X 19 CFU/g的解淀粉芽孢桿菌、菌含量不低于IX 101° CFU/g的簡單芽孢桿菌和菌含量不低于2 X 19 CFU/g的植物乳桿菌和載體。
[0006]所述簡單芽孢桿菌選用保藏編號為=CGMCC N0.10051的簡單芽孢桿菌K。
[0007]所述解淀粉芽孢桿菌選用保藏編號為:CGMCC N0.10011的解淀粉芽孢桿菌HFJ-7。
[0008]所述的載體為滑石粉，60目篩上物為O。
[0009]本發明提供了所述的復合微生態制劑在提高養殖水體透明度中的應用。
[0010]所述復合微生態制劑兌水全池潑灑，用量為200?250g/畝，10?15天潑灑一次。
[0011]所述養殖水體包括對蝦、草魚、鰱魚、鯉魚和泥鰍的養殖水體。
[0012]與現有技術相比，本發明具有以下優點和技術效果:本發明選用的簡單芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌、植物乳桿菌對養殖后期的有機物、氨氮、亞硝酸等具有顯著的降解效果，降低有機耗氧量，間接增氧，維持藻相、菌相平衡，降低水體pH，凈化改善水質，促進養殖動物良好生長。將本發明所述復合微生物制劑施加于水體，可以提高養殖水體的透明度，具有廣泛的市場應用前景。
【附圖說明】
[0013]圖1為所述復合微生態制劑對水體透明度的影響；
圖2為所述復合微生態制劑對水體氨氮的影響。
【具體實施方式】
[0014]本發明結合以下具體實例對本發明作進一步詳細的說明。
[0015]實施例1、菌株的篩選
一、簡單芽孢桿菌f5的分離篩選
2014年7月，從膠南沿海多處采集對蝦養殖區域的水樣、底泥為樣品篩選芽孢菌。底泥通過常規倍比稀釋取上清為樣品；水樣可直接作為樣品；樣品液保溫于75V 20min后，涂布于營養瓊脂平板進行菌株的分離、純化，得到4株芽孢桿菌。
[0016]已純化的單菌株進行氨氮降解測定。將單菌株接種于LB種子培養基中，37°C 180rpm培養約20h至菌體濃度為10s CFU/mL。按1%接種量(體積比)轉接至氨氮培養基中(葡萄糖 5g, MgSO4.7Η20 0.25g, K2HPO4 0.5g，(NH4)2SO4 0.lg，水 lL，pH 7.2 ?7.4，20。。150rpm培養)，定時取樣測定氨氮濃度，該菌(編號f5)對氨氮降解效果最好，36h時降解率為99%。
[0017]經生理生化方法初步鑒定，菌株f5為芽孢桿菌屬，其生物學特性:革蘭氏陽性、好氧桿狀菌，生長溫度15 °C?40 °C。菌落圓形，邊緣整齊，乳白色，菌落光滑平整，較濕潤。
[0018]以菌株f5的DNA為模板，16S rRNA通用引物為引物進行擴增，擴增片段進行序列測定。測序結果用Blast軟件與GenBank中相關屬種的16S rRNA序列進行比對，顯示該菌株16S rRNA序列與GenBank基因庫中芽抱桿菌屬中的的16s rRNA序列同源度最高，同源率達到99%。通過DNAMAN6.0對Genbank中已有的芽孢桿菌屬的16S rRNA序列進行遺傳進化分析，結果顯示，菌株f5 16S rWA與Bacillus si尊同源性最高，判定該菌株為芽孢桿菌屬的簡單芽孢桿菌。
[0019]將篩選到的菌株f5進行菌種保藏，保藏單位:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC);地址:北京市朝陽區北辰西路I號院3號，中國科學院微生物研究所；保藏日期:2014年11月25日；簡單芽孢桿菌也CiWys si尊的保藏編號為CGMCCN0.10051。
[0020]二、解淀粉芽孢桿菌HFJ-7的分離篩選
2012年I月至2012年3月，從山東省濰坊市壽光市上口鎮10家辣椒蔬菜大棚取30個辣椒根際土樣本。土樣分別充分研磨，于75°C水浴內加熱處理20min，然后用無菌生理鹽水中1000倍稀釋，于營養瓊脂NA平板上稀釋涂布，挑取單菌落劃線純化，共篩選出68株純菌，經鏡檢均為芽孢桿菌，其中包括菌株HFJ-7。
[0021]經細菌生理生化方法初步鑒定，菌株HFJ-7為芽孢桿菌屬，其生物學特性:革蘭氏染色陽性，在營養瓊脂平板上形成的菌落直徑約3-3.5_，邊緣不整齊，中間褶皺，淡黃色。菌體形態呈桿狀，芽孢橢圓形，端生，尺寸為0.84 X 0.52 μ m。
[0022]采用分子遺傳學方法對菌株芽孢桿菌HFJ-7進一步分類鑒定。首先提取菌株HFJ-7的DNA，以該DNA為模板，16S rRNA通用引物為引物，對16S rRNA片段進行擴增，擴增片段進行序列測定。測序結果用Blast軟件與GenBank中相關屬種的16S rRNA序列進行比對，結果顯示該菌株16S rRNA序列與GenBank基因庫中芽孢桿菌屬