伊貝母中的異甾體類生物堿化合物及其制備方法和用圖
【技術領域】
[0001] 本發明為植物化學領域，具體為中藥有效成分的提取、分離與制備工藝領域，尤其 設及從伊貝母藥材中提取、分離具有藥理活性的五個新的異醬體類生物堿化合物。
【背景技術】
[0002] 伊貝母是百合科植物伊貝母(Fritillaria pallidiflora Schrenk)或新疆貝母 (化itilIania wall!jewii Regel)的干燥鱗莖，其植物主產地為新疆，前者分布在新疆西北 部伊寧、緩定、霍城一帶，后者分布在新疆天山地區。古代維吾爾醫用當地貝母治療疾病，18 世紀后期，在維吾爾醫藥中有臨床使用歷史。伊貝母已收載于《中國藥典》(2000年版)一部， 《維吾爾藥志》上冊，伊貝母具有清熱潤肺，化疲止咳等功效。伊貝母產量高、生物堿含量在 同類貝母中相對較高，抗病力強和藥材價格低廉，特別是其平喘、桂疲、鎮咳等生理活性較 強，近年來，對伊貝母的研究倍受關注。
[0003] 目前國內外有關伊貝母化學成分的提取分離和結構鑒定及其相關的藥理學研究 尚處于初始階段。因此對伊貝母中具有生物活性的化學成分進行提取分離研究很有必要， 對伊貝母平喘作用的探究具有很大的學術價值。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于，提供伊貝母藥材中的異醬體類生物堿化合物及其制備方法和 應用，該化合物W伊貝母藥材為原料，用溶劑提取，酸溶堿沉后，溶劑萃取，通過硅膠柱層析 法、聚酷胺柱層析法、反相柱層析法或葡聚糖凝膠LH-20柱層析法中的S種或四種方式進行 分離，采取薄層層析法檢測分析，得到5個新的異醬體類生物堿化合物。所述的5個新的異醬 體類生物堿化合物在制備治療平喘藥物中的用途。
[0005] 本發明所述的一種伊貝母藥材中的異醬體類生物堿化合物，該化合物的結構式 為：
[0006]
[0007]
[000引其中結構式（虹）中：Ri釋基或葡萄糖巧基，R2氨，R3氨、甲基或徑基，R沖基或徑基， Rs氨，Rs氨或甲基，化氨或甲基;所設及的5個化合物為：
[0009] 化合物1的化學名稱為22,26-亞氨基-17,23-酸-5a-介襲蘆胺-6-酬-30，140-二徑 基-1化，13a-環氧；
[0010] 化合物2的化學名稱為20S，22S，25S，5a-襲蘆胺-14，15，16，17-脫四氨-30，230-二 徑基-6-酬；
[0011] 化合物3為Ri徑基，R2氨(0)，R3甲基，1?4徑基，Rs氨(0)，Rs甲基，R?氨，化合物名稱為 22R，25R-5a-瑟燒-30，200-二徑基-6-酬；
[001 ^ 化合物4為Ri葡萄糖巧基，R2氨(0 )，基，R沖基，Rs氨(0 )，Rs氨，R?甲基，化合物 名稱為22R，25S-5a-瑟燒-20a-徑基-6-酬-30-D-葡萄糖巧；
[001引化合物5為R淹基，R2氨(a)，R3氨，R4徑基，Rs氨，Rf5甲基，R?氨，化合物名稱為25R-5 口-瑟燒-30,200-二徑基-6-酬。
[0014] 所述伊貝母中的異醬體類生物堿化合物的制備方法，按下列步驟進行：
[0015] a、W伊貝母藥材為原料，粉碎后，在室溫或溫度45°C，用體積濃度為75-95%的乙 醇或甲醇水溶液滲漉提取或用5倍量的氯仿進行回流提取，然后真空濃縮得到濃縮液；
[0016] b、將步驟a得到的濃縮液依次用體積濃度為5%鹽酸和氨水進行處理，再用氯仿萃 取3-5次，真空蒸干溶劑，得到萃取物浸膏；
[0017] C、將步驟b得到的萃取物浸膏經硅膠柱層析法、聚酷胺柱層析法、反相柱層析法或 葡聚糖凝膠LH-20柱層析法的S種方式進行分離，即得到5個異醬體類生物堿化合物1為22， 26-亞氨基-17,23-酸-5a-介襲蘆胺-6-酬-30,1處-二徑基-1化，13a-環氧;化合物2為20S， 22S，25S，5a-襲蘆胺-14，15，16，17-脫四氨-30，230-二徑基-6-酬;化合物3為R泥基，R2氨-0，R3甲基，1?4徑基，Rs氨-0，Rs甲基，R?氨的22R，25R-5a-瑟燒-30，200-二徑基-6-酬;化合物4 為Ri葡萄糖巧基，R2氨-e，R3^基，R沖基，Rs氨-e，Re氨，R7甲基的22R，25S-5a-瑟燒-20曰-徑 基-6-酬-30-D-葡萄糖巧;化合物5為化徑基，R2氨-a，R3氨，1?4徑基，化氨，Rs甲基，R?氨的25R-5a-瑟燒-30，200-二徑基-6-酬。
[0018] 步驟C中硅膠柱層析法為常壓或加壓柱層析，填料為硅膠，洗脫劑為=氯甲燒和甲 醇的混合物，采用等度洗脫或梯度洗脫。
[0019] 步驟C中聚酷胺柱層析法為常壓或加壓柱層析，洗脫劑為甲醇、水或兩者的混合 物，采用等度洗脫或梯度洗脫。
[0020] 步驟C中反向柱層析法為常壓或加壓柱層析，洗脫劑為體積濃度10-90%甲醇水溶 液和12%乙臘酸水溶液，或體積濃度45%甲醇=乙胺水溶液和53%甲醇=乙胺水溶液，采 取等度洗脫或梯度洗脫。
[0021] 步驟C中葡聚糖凝膠LH-20柱層析法的洗脫劑為甲醇、S氯甲燒、體積比1:1的甲 醇氯甲燒，采用等度洗脫。
[0022] 所述伊貝母中的異醬體類生物堿化合物在制備治療平喘的藥物中的用途。
[0023] 本發明所述的伊貝母中的異醬體類生物堿化合物及其制備方法和用途，所得的5 個異醬體類生物堿化合物采用薄層層析法檢測分析進行結構確定。
[0024] 本發明所述的伊貝母中的異醬體類生物堿化合物及其制備方法和用途，其中：
[0025] 化合物1，為淡黃色粉末狀固體，薄層板噴W改良艦化祕鐘顯色劑溶液，顯橘黃色， HR-T0F-MS(m/z)給出的準分子離子峰[M+H]+460.3062( cal. 460.3063)，確定分子式為 C細4iN〇5 ;
[0026] Ih NMR和13c NMR數據見表1和表4;
[0027] 根據Ih NMR和1化醒R及二維譜數據確定化合物1的結構為22,26-亞氨基-17,23-酸-5a-介襲蘆胺-6-酬-30，1處-二徑基-1化，13a-環氧；
[00%]化合物2,為白色粉末狀固體，薄層板噴W改良艦化祕鐘顯色劑溶液，顯橘黃色， HRTOF-MS(m/z)給出的準分子離子峰[M+HT426.3000 (cal. 426.3008 )，確定分子式為 C27H43NO2 ；
[0029] Ih NMR和"C NMR數據見表2和表4;
[0030] 根據Ih醒R和I3C醒R及二維譜數據確定化合物2的結構為205,225,255,5〇-襲蘆 胺-14，15，16，17-脫四氨-30，230-二徑基-6-酬；
[0031] 化合物3,為白色粉末狀固體，薄層板噴W改良艦化祕鐘顯色劑溶液，顯橘黃色， HRT0F-MS(m/z)給出的準分子離子峰[M+H]+430.3318(cal. 430.3321)，確定分子式為 C27H43NO3 ；
[0032] Ih NMR和"C NMR數據見表2和表4;
[0033] 根據Ih醒R和1化醒R及二維譜數據確定化合物3的結構為22R，25R-5a-瑟燒-30， 200-二徑基-6-酬；
[0034] 化合物4,為白色粉末狀固體，薄層板噴W改良艦化祕鐘顯色劑溶液，顯橘黃色， HRT0F-MS(m/z)給出的準分子離子峰[M+H]+592.3852(cal. 592.3849)，確定分子式為 C33H53NO8；
[0035] Ih NMR和"C NMR數據見表3和表4;
[0036] 根據Ih NMR和1化NMR及二維譜數據確定化合物4的結構為22R，25S-5a-瑟燒-20a- 徑基-6-酬-30-D-葡萄糖巧；
[0037]化合物5,為白色粉末狀固體，薄層板噴W改良艦化祕鐘顯色劑溶液，顯橘黃色， HRT0F-MS(m/z)給出的準分子離子峰[M+H]+414.3379(cal. 414.3372)，確定分子式為 C27H43NO2 ；
[003引 Ih NMR和I3C NMR數據見表3和表4;
[0039] 根據Ih NMR和1化NMR及二維譜數據確定化合物5的結構為25R-5a-瑟燒-30,200-二徑基-6-酬。
[0040] 5個新的化合物結構鑒定實驗：
[0041 ]表 1.化合物 1 的Ih NMR數據[600MHz，S(ppm)(J = Hz)]
[0042]
[0043] a気代氯仿;b気代二甲亞諷
[0044] 表2.化合物2和3的Ih NMR數據[600MHz,S(PPm)(J = Hz)]
[0045]
[0046] a気代氯仿
[0047] 表3.化合物4和5的Ih NMR數據[4:400MHz;5:600MHz，S(ppm)(J = Hz)]
[004引
[OC... ……'乂，…，、，AT
[0化0]表4.化合物 1-5的 1化 NMR數據[l-3,5:150MHz;4:100MHz，S(ppm)] 「nnc；i 1
[0052] a気代氯仿;b気代二甲亞諷;e気代化晚;d気代甲醇。
【附圖說明】
[0053] 圖1為本發明