γ-聚谷氨酸的制備方法及護手霜和護手霜的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及化妝品的技術領域，具體說是一種γ-聚谷氨酸的制備方法及護手霜和護手霜的制備方法。
【背景技術】
[0002]人們的手在日常生活中會經常接觸一些堿性物質，如洗潔精、洗衣粉等。容易變得粗糙。尤其在冬天氣候寒冷的時候，對手部的傷害更加嚴重。需要經常涂抹護手霜來進行保護，另外，使用護手霜的同時最好能配合其他保護手段，如在家做家務或其他勞動時最好戴上外層橡膠、內層棉質的手套，以保護雙手不受腐蝕。上班的白領族，經常在空調寫字樓里對著電腦進行工作，由于空調房間里濕度低，再加上電腦輻射，手部比較干燥，需要長效保濕滋養。但是市面上的護手霜一般吸收的都很快，抹完不久就會干掉，不容易持久滋潤。還有部分添加了香精，不僅對皮膚有刺激，而且味道很重。有些則是很濃稠，不好涂勻，要涂很長時間。還有些則是比較油膩，涂完以后手上打滑，需要晾很久才能干爽，甚至還需要烤一烤才能徹底干掉。因此，需要一種能夠高效滋養，迅速吸收，保濕鎖水，而且持久長效的護手霜。
[0003]聚谷氨酸則具有極強的保濕性，是一種生物可降解的環保型高分子物質。可以在肌膚上形成一層鎖水層來防止肌膚水分的蒸發，它可以滲透到肌膚深層，修復肌膚的自我保濕系統。因為隨著人的年齡增長，皮膚的自我修復和保濕能力會逐漸減弱，甚至消失。而添加了聚谷氨酸的護手霜能夠修復手部肌膚的自潤功能。起到很好的美容保護效果。
【發明內容】
[0004]本發明要解決的技術問題是提供一種γ-聚谷氨酸的制備方法及護手霜和護手霜的制備方法。
[0005]本發明為解決公知技術中存在的技術問題所采取的技術方案是:
本發明的γ -聚谷氨酸的制備方法，采用菌株為地衣芽孢桿菌Baci IlusIicheniformiS，該菌株已于2009年10月14日保藏于北京市朝陽區大屯路中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC N0.3336；
具體包括以下步驟:
(1)菌種活化:將地衣芽孢桿菌CGMCCN0.3336原始菌株接種在斜面培養基上，于37°C培養16小時，如此活化2-3次，制備成熟的斜面種子；
(2)種子液的制備:將活化后的斜面種子接種于裝有50ml液體培養基的500ml三角瓶中，37°C，220rpm培養16小時至對數生長期；
所述種子培養基組成為:葡萄糖30 g/L，酵母膏7 g/L，胰蛋白胨10 g/L, K2HPO4 0.5g/L,MgSO4.7H20 0.5 g/L，pH7.2，其余為水;
(3)發酵罐發酵:將步驟(2)中的種子液以5%的接種量接種于發酵罐，30L發酵罐發酵培養基裝液量為15L，初始發酵溫度38-400C，罐壓0.01-0.05Mpa通風量0.5-1.0vvm，轉速400-600rpm;當發酵液OD66q在0.550-0.600時，并控制發酵溫度30_35°C，調節轉速至200-350rpm，通風量1.5-2.0vvm，控制pH在7.2-7.5至發酵結束前2_6小時；
所述發酵培養基組分為:葡萄糖80 g/L，氯化鈉10g/L，MgS04.7H20 lg/L，無水氯化I丐I g/L, FeSO4.7H20 0.02g/L，KCl 0.5g/L，精氨酸 0.8g/L，組氨酸 0.5g/L，蘇氨酸 0.5g/L，甲硫氨酸0.4g/L，谷氨酰胺0.5g/L，膽堿0.31g/L，吡哆醇0.001g/L，其余為水；
(4)聚谷氨酸的提取:發酵結束后離心去菌體，然后用5倍上清液體積的乙醇，醇沉析出聚谷氨酸，然后在復溶于上清液體積的蒸餾水，利用噴霧干燥方法制備出干粉聚谷氨酸。同時將上清液用流動相稀釋數倍至γ -聚谷氨酸的含量在l_3g/L，通過高效液相對其分子量進行檢測，分子量在20萬到200萬道爾頓。
[0006]本發明的護手霜，包括下列重量份數的原料:蒸餾水20-30份、γ-聚谷氨酸5-20份，普魯蘭多糖1-5份，維生素E 0.05-0.5份，珍珠粉10-20份，羥苯甲酯1-3份，山梨醇1-5份，維生素C0.05-0.5份，膠原蛋白0.05-5份。
[0007]本發明的護手霜的制備方法，包括以下步驟:
Α、將γ -聚谷氨酸和普魯蘭多糖先溶解于蒸餾水中，并攪拌均勻，使其成為粘稠狀的液體；
B、將珍珠粉用余量的水混勻后加入上述液體中，混合均勻，再依次加入膠原蛋白，維生素E，維生素C，羥苯甲酯，山梨醇;在室溫下攪拌混勻，得到混合液；
C、將混合液灌裝于瓶內，密封即可得到添加了高分子聚谷氨酸的保濕護手霜。
[0008]本發明具有的優點和積極效果是:
本發明的γ -聚谷氨酸的制備方法中，采用地衣芽孢桿菌CGMCC N0.3336，經菌種活化、種子液制備、發酵罐發酵和聚谷氨酸提取后獲得Y-聚谷氨酸，制備聚谷氨酸的工藝流程簡單，能夠大幅度的減少生產成本，同時也能減少聚谷氨酸的損失率，使得聚谷氨酸的產率提高；另外，該方法能夠獲得高分子量的聚谷氨酸，對于后續制作的護手霜更為有利。本發明的護手霜和護手霜制備方法中，在護手霜制備過程中添加γ -聚谷氨酸生物高分子材料，聚谷氨酸降解后無毒，可生物降解，適用于所有的皮膚狀況，并提供優于透明質酸的保濕效果。本發明的護手霜能夠快速形成保水膜，且因其形成的膜透明度高，不影響護手霜的顏色。膠原蛋白能夠達到深度鎖水和高度滋養的效果，使得肌膚水潤透白，緊致細膩，富有彈性，而且添加的維生素類成分能夠滋養皮膚，清除自由基和抗氧化。
【具體實施方式】
[0009]以下通過具體實施例對本發明中的技術方案進行詳細說明。
[0010]本發明的γ-聚谷氨酸的制備方法，采用菌株為地衣芽孢桿菌BacillusIicheniformis，該菌株已于2009年10月14日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC N0.3336；
具體包括以下步驟:
(1)菌種活化:將地衣芽孢桿菌CGMCCN0.3336原始菌株接種在斜面培養基上，于37°C培養16小時，如此活化2-3次，制備成熟的斜面種子；
(2)種子液的制備:將活化后的斜面種子接種于裝有50ml液體培養基的500ml三角瓶中，37°C，220rpm培養16小時至對數生長期； 所述種子培養基組成為:葡萄糖30 g/L，酵母膏7 g/L，胰蛋白胨10 g/L, K2HPO4 0.5g/L,MgSO4.7H20 0.5 g/L，pH7.2，其余為水;
(4)發酵罐發酵:將步驟(2)中的種子液以5%的接種量接種于發酵罐，30L發酵罐發酵培養基裝液量為15L，初始發酵溫度38-400C，罐壓0.01-0.05Mpa通風量0.5-1.0vvm，轉速400-600rpm;當發酵液OD66q在0.550-0.600時，并控制發酵溫度30_35°C，調節轉速至200-350rpm，通風量1.5-2.0vvm，控制pH在7.2-7.5至發酵結束前2_6小時；
所述發酵培養基組分為:葡萄糖80 g/L，氯化鈉10g/L，MgS04.7H20 lg/L，無水氯化I丐I g/L, FeSO4.7H20 0.02g/L，KCl 0.5g/L，精氨酸 0.8g/L，組氨酸 0.5g/L，蘇氨酸 0.5g/L，甲硫氨酸0.4g/L，谷氨酰胺0.5g/L，膽堿0.31g/L，吡哆醇0.0Olg/L，其余為水；
(4)聚谷氨酸的提取:發酵結束后離心去菌體，然后用5倍上清液體積的乙醇，醇沉析出聚谷氨酸，然后在復溶于上清液體積的蒸餾水，利用噴霧干燥方法制備出干粉聚谷氨酸。同時將上清液用流動相稀釋數倍至γ -聚谷氨酸的含量在l_3g/L，通過高效液相對其分子量進行檢測，分子量在20萬到200萬道爾頓。
[0011]本發明的護手霜，包括下列重量份數的原料:蒸餾水20-30份、γ-聚谷氨酸5-20份，普魯蘭多糖1-5份，維生素E 0.05-0.5份，珍珠粉10-20份，羥苯甲酯1-3份，山梨醇1-5份，維生素C0.05-0.5份，膠原蛋白0.05-5份。
[0012]本發明的護手霜的制備方法，包括以下步驟:
Α、將γ -聚谷氨酸和普魯蘭多糖先溶解于蒸餾水中，并攪拌均勻，使其成為粘稠狀的液體；
B、將珍珠粉用余量的水混勻后加入上述液體中，混合均勻，再依次加入膠原蛋白，維生素E，維生素C，羥苯甲酯，山梨醇;在室溫下攪拌混勻，得到混合液；
C、將混合液灌裝于瓶內，密封即可得到添加了高分子聚谷氨酸的保濕護手霜。
[0013]實施例1:
高分子γ -聚谷氨酸的制備方法如下:
(1)菌種活化:將地衣芽孢桿菌CGMCCN0.3336原始菌株接種在斜面培養基上，于37°C培養16小時，如此活化2次，制備成熟的斜面種子；
(2)種子液的制備:將活化后的斜面種子接種于裝有50ml液體培養基的500ml三角瓶中，37°C，220rpm培養16小時至對數生長期；
所述種子培養基組成為:葡萄糖30 g/L，酵母膏7 g/L，胰蛋白胨10 g/L, K2HPO4 0.5g/L,MgSO4.7H20 0.5 g/L，pH7.2，其余為水;
(5)發酵罐發酵:將步驟(2)中的種子液以5%的接種量接種于發酵罐，30L發酵罐發酵培養基裝液量為15L，初始發酵溫度38 0C，罐壓0.0 IMpa通風量0.5vvm，轉速400rpm;當發酵液OD66Q在0.550時，并控制發酵溫度30°C，調節轉速至200rpm，通風量1.5vvm，控制pH在7.2至發酵結束前2小時；
所述發酵培養基組分為:葡萄糖80 g/L，氯化鈉10g/L，MgS04.7H20 lg/L，無水氯化I丐I g/L, FeSO4.7H20 0.02g/L，KCl 0.5g/L，精氨酸 0.8g/L，組氨酸 0.5g/L，蘇氨酸 0.5g/L，甲硫氨酸0.4g/L，谷氨酰胺0.5g/L，膽堿0.31g/L，吡哆醇0.001g/L，其余為水；
(4)聚谷氨酸的提取:發酵結束后離心去菌體，然后用5倍上清液體積的乙醇，醇沉析出聚谷氨酸，然后在復溶于上清液體積的蒸餾水，利用噴霧干燥方法制備出干粉聚谷氨酸。同時將上清液用流動相稀釋數倍