一種適于水煎提取青蒿素的方法
【技術領域】
[0001]本發明公開了一種適于水煎提取青蒿素的方法，屬于青蒿素制備技術領域。
【背景技術】
[0002]青蒿素是一種無色針狀晶體，分子式為C15H2205(31976年通過化學反應、光譜數據和X射線單晶衍射方法證明其為一種含有過氧基的新型倍半萜內酯。由于其具有特殊的過氧基團，它對熱不穩定，易受濕、熱和還原物質的影響而分解。青蒿素是從復合花序植物黃花蒿草中提取得到，入藥最早見于馬王堆三號漢墓出土 (公元前168年左右)的帛書《五十二病方》，后在《神農本草經》、《本草綱目》等書中均有記載。1972年我國科學家在整理民間驗方及實踐的基礎上從青蒿中分離出這種活性物質，是我國特有的植物資源黃花蒿研制成功的一種全新的抗瘧有效單體，它的發現成為世界抗瘧藥史上繼奎寧之后的又一個重要里程碑。由于其結構獨特，抗瘧機理特別，對抗氯喹的惡性瘧和腦性瘧有特效，且有高效低毒的特點，而被WHO稱為“世界上目前唯一有效的瘧疾治療藥物”。
[0003]青蒿素的制備方法主要包括化學合成、生物合成、植物組織培養合成青蒿素和從黃花蒿植物中提取青蒿素。目前，天然提取仍然是應用最廣泛的青蒿素制備方法。天然提取的方法主要包括有機溶劑提取、超臨界CO2萃取、微波萃取等方法。
[0004](I)目前國內黃花蒿中提取青蒿素的工藝主要是傳統的有機溶媒提取分離法，SP采用有機溶劑如乙醇，丙酮、乙醚等對黃花蒿進行提取得到提取液浸膏后，再經過大孔樹脂或硅膠柱分離結晶得到青蒿素純品，該技術工藝簡單成熟，國內絕大多數青蒿素生產企業都沿用這種經典的提取方法；
(2)超臨界二氧化碳萃取法也稱綠色提取法，該法廣泛地用于香料的提取，具有環境良好、操作安全、不存在有害物殘留、產品品質高且能保持固有氣味等特點；
(3)微波萃取是利用電磁場的作用使固體或半固體物質中的某些有機物成分與基體有效的分離，并能保持分析對象的原本化合物狀態的一種分離方法。微波是指頻率在300兆赫至300千兆赫的電磁波。
[0005]傳統的有機溶劑提取法，提取率低，時間長，且有機溶劑使用量大，雜質較多;超臨界CO2萃取技術也有其缺點，即適用于親脂性、分子量較小物質的萃取;對極性大，分子量太大的物質的分離提取時要加夾帶劑，并在很高的壓力下進行，給工業化帶來一定的難度并且成本較高;微波提取可以節省大量的溶劑，時間短，但其存在的缺點是需要極性溶劑、設備較為昂貴。
[0006]因此，尋找一種提取效率高、青蒿素含量高、溶劑使用量低、藥效保持性好、利于工業應用的青蒿素提取方法，是本領域一直以來致力解決的問題。
【發明內容】
[0007]本發明主要解決的技術問題:針對目前傳統方法在提取青蒿素的過程中，往往采用有機溶劑如乙醚、丙酮提取，不僅能源消耗大、提取率低，而且在不破壞藥性、不破壞結構的情況下，只能夠在低溫的條件下進行，導致提取時間長的現狀，提供了一種將黃花蒿種子通過浸泡后，利用乙醚從青蒿中提取得到的青蒿素溶液對其進行淋洗，使其發芽，隨后將發芽后的青蒿素種子植入土壤中，用乙醇從青蒿中提取得到的青蒿素溶液對其進行澆灌，使其長葉，成幼苗，接下來再用微波提取從青蒿中得到的青蒿素溶液對幼苗進行噴霧，使其成熟，最后通過將成熟的黃花蒿幼苗轉移到沙漠中生長，并摘取葉子進行煎煮，從而得到適于水煎提取青蒿素的方法。該方法獨特新穎，原料天然易得，不僅在操作過程中避免了有機溶劑的加入，天然安全，而且周期短，操作溫度接近常溫，青蒿素不會發生裂解等化學變化，使得最終得到的青蒿素收率高達85%以上，純度達到95%以上，有很好的工業應用前景，適合大規模推廣應用。
[0008]為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是:
(1)稱取80?10g黃花蒿草種子，置于盛有清水的容器中，不斷攪拌，浸泡45?55min，待浸泡結束，去除漂浮在水面的種子，濾出剩余種子，用清水反復沖洗后，放入裝有30?35°C溫水的燒杯中，浸泡4?5h，待浸泡結束，將浸泡后的黃花蒿草種子取出，均勻平鋪在墊有消毒后紗布的培養皿中；
(2)將通過乙醚從青蒿中提取得到的青蒿素溶液放入淋洗罐中，調節pH值為5.5?6.2后，每隔一天對上述培養皿中的黃花蒿草種子進行淋洗，淋洗5?1天，使得黃花蒿草種子胚芽長達2?3cm，隨后再次調節淋洗液pH值為5.8?6.3，每隔5h對已長芽的黃花蒿種子進行淋洗，使其繼續發芽，待黃花蒿種子完全發芽，胚芽長達5?6cm時，停止淋洗，用清水噴灑發芽種子表面，每隔I?2天噴灑一次，總共噴灑2?4次；
(3)待上述噴灑結束，將已長出胚芽的黃花蒿種子采用地膜覆蓋栽培，均勻移入苗棚中，每顆種子之間間隔為30?35cm，移植完成后，在苗棚上加蓋一層遮光率為75%的遮陽網，控制苗棚室內溫度為25?28 °C，保持土壤濕度為75?85%，并用通過乙醇從青蒿中提取得到的青蒿素溶液澆灌黃花蒿種子胚芽，每天早上8點澆灌一次，下午5點再對其澆灌一次；
(4)待上述黃花蒿種子胚芽長出青嫩葉子，成為幼苗時，停止澆灌，自然生長3?5天后，使用通過微波提取從青蒿中得到的青蒿素溶液對幼苗進行噴霧，每日噴霧I次，連續噴霧10?15天，使得黃花蒿幼苗復壯，長出碧綠的成熟葉子；
(5)以上述已成熟的黃花蒿株苗為中心，挖取一個半徑為10?15cm，深為15?20cm的圓形溝槽，將黃花蒿株苗連根帶泥挖起，隨后移入沙漠中，根部用泥土壓實，并用清水澆灌，持續澆灌5?8天后停止澆灌，使其自然生長；
(6)待沙漠中的黃花蒿長至高達100?150cm、基部直徑達到3?4cm時，可摘取黃花蒿葉子，放入煮鍋中，并向其中加入清水，使其完全浸泡黃花蒿葉子，在80?90°C下煎煮I?3h，即可在水煎的條件下得到青蒿素。
[0009]本發明的應用方法是:將本發明制得的青蒿素放入烘箱中，在溫度100?105°C下烘干至恒重，得青蒿素粉末，隨后將得到的青蒿素粉末通過膠囊機制成青蒿素膠囊，其中每個膠囊中含有0.1?0.3g青蒿素，服用時，配以200?250mL溫水，每天早晚飯后服用一次，每次服用I?3粒，堅持服用7?14天，能迅速消滅人體內瘧原蟲，對惡性瘧疾有很好的治療效果O
[0010]本發明的有益效果是:
(I)本發明操作簡便，制備過程中避免有機溶劑的加入，安全衛生，是環保綠色生產工-H-
乙；
(2)本發明操作周期短，操作溫度接近常溫，青蒿素不會發生裂解等化學變化，保持了原有的藥效，且無任何雜質；
(3)本發明最終使得青蒿素收率高達85%以上，純度達到95%以上，有很好的工業應用前景，適合大規模推廣應用。
【具體實施方式】
[0011]首先稱取80?10g黃花蒿草種子，置于盛有清水的容器中，不斷攪拌，浸泡45?55min，待浸泡結束，去除漂浮在水面的種子，濾出剩余種子，用清水反復沖洗后，放入裝有30?35°C溫水的燒杯中，浸泡4?5h，待浸泡結束，將浸泡后的黃花蒿草種子取出，均勻平鋪在墊有消毒后紗布的培養皿中；然后將通過乙醚從青蒿中提取得到的青蒿素溶液放入淋洗罐中，調節pH值為5.5?6.2后，每隔一天對上述培養皿中的黃花蒿草種子進行淋洗，淋洗5?10天，使得黃花蒿草種子胚芽長達2?3cm，隨后再次調節淋洗液pH值為5.8?6.3，每隔5h對已長芽的黃花蒿種子進行淋洗，使其繼續發芽，待黃花蒿種子完全發芽，胚芽長達5?6cm時，停止淋洗，用清水噴灑發芽種子表面，每隔I?2天噴灑一次，總共噴灑2?4次;待上述噴灑結束，將已長出胚芽的黃花蒿種子采用地膜覆蓋栽培，均勻移入苗棚中，每顆種子之間間隔為30?35cm，移植完成后，在苗棚上加蓋一層遮光率為75 %的遮陽網，控制苗棚室內溫度為25?28°C，保持土壤濕度為75?85%，并用通過乙醇從青蒿中提取得到的青蒿素溶液澆灌黃花蒿種子胚芽，每天早上8點澆灌一次，下午5點再對其澆灌一次;待上述黃花蒿種子胚芽長出青嫩葉子，成為幼苗時，停止澆灌，自然生長3?5天后，使用通過微波提取從青蒿中得到的青蒿素溶液對幼苗進行噴霧，每日噴霧I次，連續噴霧10?15天，使得黃花蒿幼苗復壯，長出碧綠的成熟葉子;接下來以上述已成熟的黃花蒿株苗為中心，挖取一個半徑為10?15cm，深為15?20cm的圓形溝槽，將黃花蒿株苗連根帶泥挖起，隨后移入沙漠中，根部用泥土壓實，并用清水澆灌，持續澆灌5?8天后停止澆灌，使其自然生長;最后待沙漠中的黃花蒿長至高達100?150cm、基部直徑達到3?4cm時，可摘取黃花蒿葉子，放入煮鍋中，并向其中加入清水，使其完全浸泡黃花蒿葉子，在80?90°C下煎煮I?3h，即可在水煎的條件下得到青蒿素。
[0012]實例I
首先稱取SOg黃花蒿草種子，置于盛有清水的容器中，不斷攪拌，浸泡45min，待浸泡結束，去除漂浮在水面的種子，濾出剩余種子，用清水反復沖洗后，放入裝有30°C溫水的燒杯中，浸泡4h，待浸泡結束，將浸泡后的黃花蒿草種子取出，均勻平鋪在墊有消毒后紗布的培養皿中；然后將通過乙醚從青蒿中提取得到的青蒿素溶液放入淋洗罐中，調節PH值為5.5后，每隔一天對上述培養皿中的黃花蒿草種子進行淋洗，淋洗5天，使得黃花蒿草種子胚芽長達2cm，隨后再次調節淋洗液pH值為5.8，每隔5h對