-9)，2.42(lH，m，H-13)，2.17(3H，s，H-20)，1.59(3H，s，H-17)，1.54 (3H，s，H-18),1.42(lH，m，H-14),1.33(lH，m，H-14)，l.00(3H，d，J=6.細z，H-16)，0.86(3H， t，J = 7.2Hz，H-15). 1化醒 R( 150MHz，CDCl3)Scl93.3(C-6)，185.2(C-8)，170.4(C0CH3)， 148.8.148.1.146.6.145.5.144.0. 143.0.140.1.131.7.127.9.127.9.125.7.125.7， 115.8.115.0. 110.6.105.1，84.8(C-7)，35.2(C-13),30.1(C-14)，23.1(018)，20.3(C- 16)，20.2(C0Ol3)，12.5(C-17)，12.1(C-15).ESIMSm/z 511.05/513.06[M+H]7[M+H+2] + (3 :1) ,533.06/535.02[M+Na]V[M+Na+2] + (3:l).皿 ESIMS m/z 511.1625[M+H] + (calcd for 〔27出8〇6化(：1，511.1630).
[0056] 19:1h 醒 R(600MHz，CDC13)Sh7.91( lH，s，H-l)，6.97( lH，s，H-4) ,6.89( lH，d，J = 15.6Hz，H-10)，6.16aH，dJ=15.6Hz，H-9)，5.69(lH，d，J = 9.6Hz，H-12)，3.98aH，m，H- 21)，2.49(lH，m，H-13)，2.17(3H，s，H-20)，1.97-2.04(4H，m)，1.87(3H，s，H-17)，1.66(2H， m)，1.55(3H，s，H-18)，1.32-1.48(4H，m)，1.26(2H，m)，1.03(3H，d，J=6.6Hz，H-16),0.90 (3H，t，J = 7.2Hz，H-15).i3c NMR( 150MHz，CDCl3)Scl94.1 (C-6)，184.5(C-8)，170.2(C0CH3)， 148.6，147.6，145.0，144.5，136.9，131.6，115.1，112.8，112.8，102.2,84.9(C-7)，61.2， 35.1 (C-13)，33.3，33.1，30.1(C-14) ,25.8,25.0,23.4(018)，20.4(C-16)，20.3(C0CH3)， 12.7,12.7(C-17)，12.1(C-15).ESIMS m/z 472.14/474.18[M+H]7[M+H+2]+(3:1),494.10/ 496.10 [M+Na]7[M+Na+2Γ(3:1)，964.96/966.94[ 2M +化]7[ 2M+Na+2 ] +. HRESIMS m/z 472.2250[M+H] + (calcd for C27出504NC1,472.2249).
[0057] 20:1h 醒 R(600MHz，CDC13)Sh7.75( lH，s，H-l)，7.02( lH，s，H-4) ,6.96( lH，d，J = 15.6Hz，H-10)，6.15aH，dJ=15.6Hz，H-9)，5.71(lH，d，J = 9.6Hz，H-12)，3.84(2H，m，H- 21)，2.49(lH，m，H-13)，2.17(3H，s，H-20)，1.86(3H，s，H-17)，1.76(2H，m)，1.55(3H，s，H- 18)，1.26-1.48(8H，overlapped)，1.03(3H，d，J=6.6Hz，H-16)，0.88-0.91(6H， overlappecO.Uc NMR( 150MHz，CDCl3)Scl94.0(C-6)，184.4(08)，170.2(C0CH3)，148.1， 147.9，145.0，144.7，141.1，131.7，114.8，114.7，111.7，102.2,84.9(C-7)，54.4,35.1(C- 13)，31.2,30.3,30.1(C-14)，26.0,23.3(C-18)，22.5,20.4(C-16)，20.3(C0CH3)，14.0， 12.7(C-17)，12.1(C-15).ESIMS m/z 474.15/476.15[Μ+Η]7[Μ+Η+2Γ(3: 1),496.09/ 498.06[M+Na]V[M+Na+2] + (3:1),968.91[2M+Na] + .皿ESIMS m/z 474.2397[M+H] + (calcd for C2訊37O4NCI ,474.2406).
[0058] 21:1h 醒 R(500MHz，CDC13)Sh7.75( lH，s，H-l)，7.03( lH，s，H-4) ,6.97( lH，d，J = 15.6Hz，H-10)，6.12aH，dJ=15.6Hz，H-9)，5.71(lH，d，J = 9.6Hz，H-12)，3.81(2H，m，H- 21)，2.49(lH，m，H-13)，2.17(3H，s，H-20)，1.85(3H，s，H-17)，1.80(2H，m，H-22)，1.55(3H， s，H-18),1.45(lH，m，H-14),1.35(lH，m，H-14)，1.03(細，overlapped)，0.89(3H，t，J= 7.2Hz，H-15). 1化 NMR(150MHz，CDCl3)Scl94.0,184.4,170.2,148.1,147.9,145.0,144.7， 141.2,131.7,114.7,114.7,111.7,102.2,84.9,55.9,35.1,30.1,23.7,23.3,20.4,20.3， 12.7,12.1，10.9.ESIMS m/z 432.10/434.06[M+H]+/[M+H+2] + (3:1),454.07/456.06[M+Na ]V[M+Na+2] + (3:1),884.82/886.81[2M+化]+/[2M+Na+2] + .HRESIMS m/z 432.1934[M+H] + (calcd for C24出1O4NCI ,432.1936).
[0059] 22:1h 醒 R(600MHz，CDC13)Sh7.76( lH，s，H-l)，7.02( lH，s，H-4) ,6.94( lH，d，J = 15.6Hz，H-10)，6.13(lH，d，J=15.6Hz，H-9)，5.93(lH，m，H-22)，5.70(lH，d，J = 9.細z，H- 12)，5.42(lH，d J= 10.8Hz，H-23) ,5.25(lH，dJ= 17.4Hz，H-23)，4.48(2H，dJ = 4.細z，H- 21)，2.48(lH，m，H-13)，2.17(3H，s，H-20)，1.82(3H，s，H-17)，1.55(3H，s，H-18)，1.45(lH， m，H-14) ,1.:34( lH，m，H-14)，l. 02(3H，d，J = 6.細 z，H-16)，0.89(3H，t，J = 7.2Hz，H-15).Uc NMR( 150MHz，CDCl3)Scl93.9(C-6)，184.5(C-8)，170.2(C0CH3) ,148.3,148.1,145.1,144.5， 141.3,131.8,131.0,120.0(0-22)a 14.9,114.9 ail.4,102.6,84.9(C-7),56.2(C-21), 35.1(C-13)，30.1(014)，23.3(018)，20.4(016)，20.3(C0Ol3)，12.6(C-17)，12.1(C- 15).ESIMS m/z 430.08/432.04[M+扣7[M+H+2] + (3: 1),452.05/454.02[M+化]7[M+Na+2] + (3:1),880.78/882.83[2M+化]7[2M+Na+2] + .HRESIMS m/z 430.1774[M+H] + (calcd for C24出9O4NCI ,430.1780).
[0060] 實施例4
[0061] 取式I化合物2mg溶解在裝有1000化甲醇、乙醇、四氨巧喃或丙酬中任一種或幾種的 小瓶中，于30°C下靜置7天后，緩慢結晶即得式I化合物的晶體。上述晶體的Cu祀X-射線晶體衍射 數據連間群為P2(l)2(l)2(l)，晶胞參數為a= 6.2646(8) A，b = 14.7728(18) A，C = 25.133(3) A， e = 90(0)°C，V = 2326.0(5) A3，Z = 4，Dc = 1.233g/cm3，F(000) = 920，y = 0.193mm-i。
[0062] 實施例5
[0063] 本發明的式I化合物對藤壺Balanus am地itrite幼蟲附著活性試驗按照如下文獻 方法測試：Thiyagarajan，V. ;Harde;r，T. ;Qiu，J.W. ;Qian，P.Y.Ma;r.Biol. (Be;rlin)2003， 143,543-554。
[0064]
[0066]本發明的式I化合物及其晶體藤壺B.ampM trite幼蟲附著具有極強的抑制活性， 結果見上表。上述活性遠遠強于美國海軍規定的潛在的防污損化合物ECso值2化g/mL的標 準。運表明式I化合物或其藥學上可接受的鹽可用于制備高效低毒的海洋防污劑，并且海洋 來源真菌化nicilliumsp.(TA33-l)可進行大規模發酵生產，保證了式I化合物的來源，具有 廣闊的應用前景。
【主權項】
1. 一種Sclerotiorin衍生物，其特征在于具有式I的結構：或其藥學上可接受的鹽，其中R夫 或2. 權利要求1所述的式I化合物的制備方法，其特征在于先在菌種培養基中對真菌 Penicillium SP. (TA33-1)進行菌種培養，再在發酵培養基中對該真菌進行發酵培養，將所得菌 絲體用氯仿-甲醇混合液(1:1)浸提3次減壓濃縮后，用乙酸乙醋萃取3次得粗浸膏;乙酸乙醋相 粗浸膏分別進行正相硅膠柱層析、Sephadex LH-20凝膠柱層析后，再經HPLC高效液相制備色譜， 將戶/1得洗脫液濃縮，得黃色粉末，即為W-Sclerotiorin;在溶有W-Sclerotiorin的二氯甲燒 溶液中，加入有機伯胺和碳酸鐘，反應后得到式I氯代聚酬化合物;其中所述菌種培養基中含 有葡萄糖、酵母膏、蛋白腺、瓊脂、粗海鹽、水;所述的發酵培養基中含有大米、粗海鹽、水;所述的 色譜分離為正相硅膠柱色譜分離、凝膠柱層析分離和高效液相色譜分離;所述的有機伯胺為3. 如權利要求2所述的制備方法，其特征在于所述菌種培養基優選含有葡萄糖0.1 % -5.0%、酵母膏0.01%-1%、蛋白腺0.01%-1%、瓊脂0.1%-3.0%、氯化鋼0.05%-5%，其余 為水，上述百分含量均為重量百分比，培養溫度優選為0-30°C，培養時間優選為3-15天。4. 如權利要求2-3所述的制備方法，其特征在于所述發酵培養基優選含有大米1.0 % - 80.0 % 、 氯化鋼 0.05 % -5 % ， 其余為水 ，上述百分含量均為重量百分比 ，培養溫度優選為 0-30°C，培養時間優選為10-60天。5. 如權利要求2-4任一項所述的制備方法，其特征在于所述的正相硅膠柱層析采用的 固定相為200-300目硅膠，流動相為體積比為15 %-60 %的乙酸乙醋-石油酸混合溶劑;所述 S邱hadex LH-20凝膠柱層析采用的流動相為體積比為石油酸:氯仿：甲醇=2:1:1的混合溶 劑;所述HPLC高效液相制備色譜中采用的色譜柱為Kromasil 10 X 250mm，5皿，流速為1.0- 5. OmL/min，流動相為體積比50 % -80 %的甲醇-水混合溶劑。6. 權利要求1所述的式I化合物為晶體，其特征在于該晶體的空間群為P2(l)2(l)2(l)， 晶胞參數為a = 6.2646腳A，b= 14.7728リリA，c = 25.133(3)A，e = 9 0(0)。， V = 23%.0(5) A3，Z = 4,Dc = 1.233g/cm3,F(OOO) = 920山=0.193臟-1。7. 權利要求6所述晶體的制備方法，其特征在于將式I化合物溶于甲醇、乙醇、水、四氨 巧喃或丙酬中的任一種或幾種，靜置緩慢結晶即可得到式I化合物的晶體。8. 如權利要求7所述的制備方法，其特征在于靜置緩慢結晶的條件為在0-3(TC下，靜置 1-30 天。9. 一種海洋生物防污劑，其特征在于其含有權利要求1所述的式I化合物或其藥學上可 接受的鹽作為有效成分。10. -種海洋生物防污劑，其特征在于其含有權利要求6所述的晶體作為有效成分。11. 權利要求1所述的式I化合物或其藥學上可接受的鹽在制備海洋防污劑中的應用。12. 權利要求6所述的晶體在制備海洋防污劑中的應用。
【專利摘要】一種Sclerotiorin衍生物及其制備方法與作為海洋防污劑的應用，制備時先對真菌Penicillium？sp.(TA33-1)進行菌種培養，再對該真菌進行發酵培養，將所得菌絲體用氯仿-甲醇混合液(1∶1)浸提3次減壓濃縮后，用乙酸乙酯萃取3次得粗浸膏；依次進行正相硅膠柱層析、Sephadex？LH-20凝膠柱層析、HPLC高效液相色譜，得黃色粉末，即為(+)-Sclerotiorin；在溶有(+)-Sclerotiorin的二氯甲烷溶液中，加入有機伯胺和碳酸鉀，反應后得到式I化合物。本發明提供一種海洋生物防污劑，其特征在于以本發明的式I化合物或其藥學上可接受的鹽，用于防治海洋生物附著引起的海洋污損。CGMCC No.899420140403
【IPC分類】C07D401/04, C07D417/04, C12P17/12, C09D5/16, C07D401/06, C07D217/04, C12R1/80, C12P17/16
【公開號】CN105586373
【申請號】CN201510368649
【發明人】邵長倫, 王長云, 魏美燕, 邢倩, 王開玲
【申請人】中國海洋大學
【公開日】2016年5月18日
【申請日】2015年6月24日