一株摩西球囊霉及其在促進植物磷吸收中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及一株摩西球囊霉及其在促進植物憐吸收中的應用。
【背景技術】
[0002] 叢枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal F^ingLAM)是自然界±壤中普遍存在的 一類有益微生物,約占±壤微生物總量的5-36%,是生物量最大的一類±壤真菌,它能夠與 80%W上的陸生植物形成良好的互利共生體(也稱為菌根,mycorrhizae)。運種真菌屬于球 囊口真菌,能夠在植物根系皮層細胞內形成叢枝,部分形成泡囊結構,因此該類真菌被稱為 叢枝菌根真菌。
[0003] 叢枝菌根真菌可W促進并提高作物養分的吸收與利用效率,特別是植物憐養分的 吸收利用方面。通過接種叢枝菌根真菌,其根外菌絲的生長可W增加植物根系和±壤的接 觸范圍,即擴大根際范圍,增加吸收表面積,提高±壤憐空間有效性,改善根際環境,從緊實 的±壤中吸收憐養分,此外叢枝菌根真菌侵染增加了根系吸收能力。因此,叢枝菌根真菌真 菌作為一種生物肥料具有極大的潛力應用于實際農業生產中。那么研究并篩選叢枝菌根真 菌中高效吸收養分并能促進作物生長的菌種,對于生物肥料的開發與發展方面有著很重要 的意義。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一株摩西球囊霉及其在促進植物憐吸收中的應用。
[0005] 本發明提供的摩西球囊霉(Glomus mosseae)200705M,已于2015年12月03日保藏 于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、(簡稱CGMCC,地址為:北京市朝陽區北 辰西路1號院3號,中國科學院微生物研究所),保藏登記號為CGMCC NO. 11662。摩西球囊霉 (Glomus mosseae)200705M CGMCC NO. 11662,簡稱摩西球囊霉200705M。
[0006] 本發明還保護摩西球囊霉200705M在促進植物憐吸收中的應用。所述植物可為禾 本科植物,具體可為玉米,例如玉米品種"京科懦2000"。
[0007] 本發明還保護摩西球囊霉200705M在促進植物生長中的應用。所述植物可為禾本 科植物,具體可為玉米,例如玉米品種"京科懦2000"。所述促進植物生長具體可體現為促使 植物的重量增加。所述重量具體為干重,更具體為地上部分干重和/或地下部分根系干重。 [000引本發明還提供了一種菌劑,其活性成分為摩西球囊霉200705M。所述菌劑的制備方 法包括如下步驟,將摩西球囊霉200705M與植物在同一培養基質中共培養,收獲培養基質, 即為所述菌劑。所述植物可為禾本科植物,具體可為高梁,具體可為高梁品種"教雜1號'。所 述培養基質可為等體積混合的河沙與沸石的混合物。所述共培養的時間可為Ξ個月。所述 共培養的條件可為:20-27°C,每天光照14小時,黑暗10小時。所述菌劑中含有摩西球囊霉 200705M抱子、被侵染根段及根外菌絲。所述菌劑的制備方法具體可為:挑取摩西球囊霉 200705M單個抱子,接種于lOOOg滅菌后的等體積混合的河沙與沸石的混合物中,并播種20 粒高梁種子,培養Ξ個月后(培養條件:溫度20-27°C,每天光照14小時,黑暗10小時),收獲 沸石河沙混合物(其中含有抱子、被侵染根段及根外菌絲),即為菌劑。
[0009] 本發明還保護一種菌劑的制備方法,將摩西球囊霉200705M與植物在同一培養基 質中共培養,收獲培養基質,即為所述菌劑。所述植物可為禾本科植物,具體可為高梁,具體 可為高梁品種"教雜1號"。所述培養基質可為等體積混合的河沙與沸石的混合物。所述共培 養的時間可為Ξ個月。所述共培養的條件可為:20-27°C,每天光照14小時,黑暗10小時。所 述菌劑中含有摩西球囊霉200705M抱子、被侵染根段及根外菌絲。所述菌劑的制備方法具體 可為:挑取摩西球囊霉200705M單個抱子,接種于lOOOg滅菌后的等體積混合的河沙與沸石 的混合物中,并播種20粒高梁種子,培養Ξ個月后(培養條件:溫度20-27°C,每天光照14小 時,黑暗10小時),收獲沸石河沙混合物(其中含有抱子、被侵染根段及根外菌絲),即為菌 劑。
[0010] 本發明還保護W上任一所述菌劑在促進植物憐吸收中的應用。所述植物可為禾本 科植物,具體可為玉米,例如玉米品種"京科懦2000"。
[0011] 本發明還保護W上任一所述菌劑在促進植物生長中的應用。所述植物可為禾本科 植物,具體可為玉米,例如玉米品種"京科懦2000"。所述促進植物生長具體可體現為促使植 物的重量增加。所述重量具體為干重,更具體為地上部分干重和/或地下部分根系干重。
[0012] 本發明通過盆栽試驗的方法研究了摩西球囊霉200705M侵染植物玉米形成菌根后 對±壤中憐養分的吸收W及對玉米生長的影響。試驗結果表明叢枝菌根真菌菌株摩西球囊 霉200705M能夠顯著增強玉米根系對憐養分的吸收能力,促進玉米植株的生長。本發明對于 農業生產具有重大價值。
【附圖說明】
[oou]圖1為抱子照片。
[0014]圖 2 為Gm-PO 組、Gm-P50 組、CK-P0 組和 CK-P50 組的照片。
[0015]圖 3 為Ga-PO 組、Ga-P50 組、CK-P0 組和 CK-P50 組的照片。
[0016] 圖 4 為Geb-PO 組、Geb-P50 組、CK-P0 組和 CK-P50 組的照片。
[0017] 圖 5 為Ds-PO 組、DS-P50 組、CK-P0 組和 CK-P50 組的照片。
【具體實施方式】
[0018] W下的實施例便于更好地理解本發明,但并不限定本發明。下述實施例中的實驗 方法,如無特殊說明,均為常規方法。下述實施例中所用的試驗材料,如無特殊說明,均為自 常規生化試劑商店購買得到的。W下實施例中的定量試驗,均設置Ξ次重復實驗,結果取平 均值。河沙與沸石均為商購獲得,粒徑均為l-2mm。實施例中采用白色塑料花盆,規格為 260mmX200mm。實施例中的高梁種子為高梁品種"教雜1號"。實施例中的玉米種子為玉米品 種"京科懦2000"。
[0019] 聚叢球囊霉(Glomus aggregatum)BGC XJ0抓用Ga表示,象牙白球囊霉(Glomus eburneunOBGC XJ0她用Geb表示,沾屑多樣抱囊霉(Diversispora spur州m)BGC XJ06E用Ds 表示,上述Ξ個菌株均獲自北京市農林科學院植物營養與資源研究所"叢枝菌根真菌種質 資源庫"。
[0020] 實施例1、菌株的分離、鑒定和保藏
[0021] -、菌株的分離
[0022] 1、2007年9月,從新疆昌吉采集駱駝刺根際±壤。
[0023] 2、稱取100克步驟1得到的±壤,放入裝有1000ml水的大燒杯中,攬拌,靜置10秒后 過Ξ層分樣篩(上篩20目,中篩60目,下篩300目),用水收集300目篩子上的殘留物于培養皿 中,在體式顯微鏡下挑取單個抱子,接種于等體積混合的河沙與沸石的混合物中,并種植高 梁,培養Ξ個月后,收獲含有抱子、被侵染根段及根外菌絲的沸石河沙混合物。
[0024] 3、稱取20克步驟2得到的沸石河沙混合物,放入裝有1000ml水的大燒杯中,攬拌, 靜置10秒后過Ξ層分樣篩(上篩20目,中篩60目,下篩300目),用水收集300目篩子上的殘留 物于培養皿中,在體式顯微鏡下挑取抱子,置于載玻片上,在生物顯微鏡下,觀察抱子形態。 [00巧]得到一株菌,將其命名為200705M。
[00%] 二、菌株的鑒定
[0027] 形態鑒定結果:
[0028] 抱子在盆栽培養物中單生,或1-2極少3個叢生在抱子果中;抱子果多為不規則球 形,直徑260-360μπι,黃棟-淺褐色,內含1-2個抱子,由松散的網狀菌絲形成抱被,抱被厚大 約12-23μπι;抱子淡黃-黃棟色,球形或近球形,很少不規則,大小為115-160-225WI1;
[0029] 抱壁3層:外壁L1無色透明,易脫落,厚約1.7-2.1皿,16山6丘'3試劑中呈淺粉紅色 至深粉紅色;L2無色透明,0.8-1.3μπι;內壁L3淺黃-黃褐色,層狀壁,厚1.0-2.5WI1;
[0030] 抱子內含物為大小不等的油滴或顆粒;連抱菌絲漏斗形,連點寬10-20(-28)μπι,連 點處菌絲壁稍增厚;連抱菌絲底部有一厚凹隔。
[0031] 抱子照片(放大倍數為30)見圖1。
[0032] 分子鑒定結果:18S ribosomal RNA的編碼序列如序列表的序列1所示。
[0033] 上述鑒定結果表明,200705M為叢枝菌根真菌中的摩西球囊霉(Glomus mosseae)。
[0034] Ξ、菌株的保藏
[OO%] 摩西球囊霉(Glomus mosseae)200705M,已于2015年12月03日保藏于中國微生物 菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、(簡稱CGMCC,地址為:北京市朝陽區北辰西路1號院3 號,中國科學院微生物研究所),保藏登記號為CGMCC NO. 11662。摩西球囊霉(Glomus mosseae)200705M CGMCC ^.11662,簡稱摩西球囊霉2007051,用6111表示。
[0036] 實施例2、菌株的應用
[0037] -、相關材料的準備
[0038] 1、制備培養基質
[0039] ±壤采自北京市大興區長子營鎮林間沙地,基礎養分含量見表1。
[0040] 表1供試±壤基本理化性狀
[0041]
[0042] ±壤風干后過2mm網篩,然后105°C下濕熱間歇滅菌2次,驚干后每千克混入如下成 分:200mg的N(由NH4NO3提供)、150mg的K(由K2SO4提供)、lOOmg的Mg(由MgS〇4 · 7此0提供)、 5mg的Zn(由aiS〇4 · 7出ο提供)、5mg的Μη(由MnS〇4提供)、5mg的Cu(由CuSO巧出ο提供),充分混 勻,得到無憐培養基質。
[0043] ±壤風干后過2mm網篩,然后105°C下濕熱間歇滅菌2次,驚干后每千克混入如下成 分:200mg的N(由NH4NO3提供)、150mg的K(由K2SO4提供)、lOOmg的Mg(由MgS〇4 · 7此0提供)、 5mg的Zn (由 aiS〇4 · 7出0提供)、5mg的Μη (由MnS〇4提供)、