一種從金銀花露殘液中提取和分離綠原酸與木犀草苷的方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于醫藥化工技術領域，涉及生物活性成分的提取分離工藝，特別提供了一種利用大孔樹脂同時提取和分離金銀花露生產殘液中綠原酸與木犀草苷的方法。
【背景技術】
[0002]金銀花(Flοs1nicerae)為忍冬科(CaprifoIiaceae)忍冬屬(Lonicera)植物忍冬(Lonicera japonica thunb)及同屬多種植物的干燥花蕾，是一種“藥食同源”的綠色天然產物，為中醫常用藥，具有清熱解毒、涼風散熱、抗病毒、保肝利膽的功能。
[0003]金銀花中主要含揮發油類、綠原酸類、黃酮類、三萜皂苷類、環烯醚萜類及無機元素。其中黃酮類化合物包括木犀草素-3-0-a-D-葡萄糖苷、木犀草素-7-0-13_D-半乳糖苷、槲皮素-7_0-13-D-葡萄糖苷、金絲桃苷、忍冬苷、5-羥基-3' ,47，7_三甲氧基黃酮和紫堇黃酮等。早期研究認為綠原酸是金銀花的主要活性成分之一，其含量被作為評價金銀花藥材品質優劣的指標。隨著研究的深入，發現黃酮類化合物也是金銀花有效成分之一，其含量也應成為金銀花質量的評價指標。
[0004]綠原酸被認為是眾多藥材和中成藥抗菌解毒、消炎利膽的主要有效成分，通常被作為定性甚至定量的指標。據報道，綠原酸具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利膽、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基和興奮中樞神經系統等主要生物活性，是保健食品、藥品、化妝品等工業的重要原料，20%綠原酸含量金銀花提取物價格連續幾年都在每噸15萬元左右。金銀花黃酮與抗菌活性有關，不僅能止咳祛痰、抗炎、抗菌、抗病毒，還具有優良的抗氧化、增強機體免疫力、降血糖血脂、自由基清除功能以及調節心血管系統的作用，具有廣闊的應用前景。
[0005]目前，分別針對金銀花中綠原酸和黃酮類化合物的提取分離研究很多。關于如何從金銀花露生產殘液中同時提取主要成分綠原酸和黃酮化合物的報道幾乎沒有，這在很大程度上制約了金銀花綜合利用和深加工產業的進一步發展。
[0006]劉磊等人(中國現代中藥，2008，10(5):24-25)采用水提醇沉和大孔樹脂純化金銀花中的綠原酸，綠原酸的含量能達20%以上。
[0007]范遠景等人(安徽農業科學，2010，38(24): 13052-13053，13057)利用大孔樹脂Dl OI純化金銀花綠原酸，純度達到58.3%。
[0008]王雪梅等人(重慶理工大學學報(自然科學)，2011，35 (3): 47-50)通過正交試驗確定了水提法提取金銀花綠原酸的最佳條件，綠原酸提取率達90%。
[0009]丁利君等人(食品科學，2002，23(2):62-66)證實超聲波法提取金銀花黃酮效果最好，60倍40%乙醇浸泡20h，超聲提取45min，黃酮浸出量16.91 %。
[0010]李榮等人(安徽醫科大學學報，2006，41(4):410-412)通過正交設計研究表明金銀花總黃酮最佳提取工藝為12倍90%乙醇提取3次，每次Ih，總黃酮得率12.26%。
[0011]徐清萍等人(食品工程，2008，4:35-37)采用常溫乙醇浸提法提取金銀花黃酮，生藥總黃酮提取率達到13.88%，利用大孔樹脂分離純化得到總黃酮含量最高為70g/100g。
[0012]劉澤峰(化學工程與裝備，2009，8: 23-25)采用響應面法表明金銀花黃酮提取工藝的最佳條件為:74%乙醇，提取2h，液料比14.6(mL/g)，提取3次，黃酮含量9.32%。
[0013]陳福明等于2005年在公開號CN1746149A，名稱為“一種由金銀花粗提物制備高純度綠原酸的方法”中以金銀花粗提物為原料，采用醇沉、逆流萃取、濃縮、柱析、結晶干燥得到綠原酸含量50?92%的產品。
[0014]陳旭良于2005年在公開號CN 1687009A，名稱為“一種高效提取金銀花有效成分的新方法”中采用乙醇和微波作用巧妙結合提高金銀花有效成分收率。
[0015]張現濤等于2005年在公開號CN 1730015A，名稱為“金銀花提取物及其制備方法和應用”中采用水提、大孔樹脂吸附、洗脫、乙酸乙酯萃取等步驟得到金銀花提取物中綠原酸的重量百分含量25%以上。
[0016]李雄輝等于2009年在公開號CN 101602668A，名稱為“一種綠原酸提取的方法”中將大孔樹脂富集、乙酸乙酯萃取、混合溶劑分相法相結合得到純度較高的綠原酸產品。
[0017]張彤等于2009年在公開號CN 101837039A，名稱為“一種不含綠原酸的金銀花提取物及制備方法”中采用醇浸泡、大孔樹脂吸附、洗脫等步驟去除金銀花中綠原酸，得到木犀草苷含量達40.0%以上。
[0018]張彤等于2009年在公開號CN 101838200A，名稱為“一種從金銀花中提取分離綠原酸的方法”中通過醇提、打孔樹脂富集、萃取和重結晶得到純度98%以上的綠原酸產品。
[0019]羅亞東等于2010年在公開號CN 102001947A，名稱為“一種金銀花綠原酸的制備方法”中以金銀花及其枝葉為原料，采用三相萃取方法，選擇性地直接富集和分離純化得到綠原酸初產品，后經過脫色、結晶和干燥得到質量分數為95%綠原酸產品。
[0020]趙勇彪等于2011年在公開號CN102285885A，名稱為“從金銀花中快速高效提取綠原酸的方法”中采用取液壓濾、吸附洗脫、納濾濃縮等步驟有效提高綠原酸提取效率和純度。
[0021]這些研究均只限于從金銀花中提取綠原酸或者黃酮化合物，沒有對從金銀花資源進行合理科學的綜合開發和利用;這些技術或采用大量有機溶劑，或采用萃取等技術，也使得生產工藝更為復雜，生產成本高，不利于產業化。
[0022]現階段，人們開始關注金銀花資源的綜合利用和深加工開發高附加值產品，但仍存在頗多不足之處。
[0023]張樹軍等于2010年在公開號CN 101985421A，名稱為“一種從金銀花中同時制備綠原酸和木犀草苷的方法”中通過DlOl型大孔樹脂富集、硅膠柱、聚酰胺柱分離純化和重結晶得到純度大于95 %的綠原酸和木犀草苷;該方法工藝復雜，操作繁瑣，工業化成本高。
[0024]楊俊等于2010年在公開號CN 101941908A，名稱為“一種從金銀花露加工殘液中制備及半合成綠原酸的方法”中采用大孔樹脂分離、酸水解、離子交換柱分離、半合成和重結晶等步驟得到純度大于99%的綠原酸，充分利用了咖啡酰奎尼酸類物質，但在金銀花有效成分的充分利用方面還不足，同時操作繁瑣，生產成本高。
[0025]李錦宇等于2011年在公開號CN 102327312A，名稱為“一種從金銀花葉莖藤中提取有效成份的方法”中采用熱水超聲提取，經減壓濃縮、水復溶、乙醇沉淀、淋洗、濃縮、真空干燥工序得粗多糖;采用乙醇超聲提取，用石油醚脫色，乙酸乙酯萃取，大孔樹脂吸附，濃縮和干燥得綠原酸粗品，再經乙酸乙酯萃取，分相劑分相、低溫放置、真空干燥工序得綠原酸產品；采用乙酸乙酯萃取得到粗黃酮，再經濃縮、上柱吸附、乙醇洗脫、濃縮、干燥工序得黃酮產品。該法工藝復雜，引入大量有機溶劑脫色萃取，不利于商業化生產。
[0026]金銀花露屬其他劑型藥品，是暑濕類非醫保非處方藥品，可以清熱，消暑，解毒，多用于緩解暑溫口渴，小兒痱毒，熱毒瘡癤等癥狀。金銀花露的生產采用水蒸汽蒸餾法收集餾分而得到，而蒸餾剩下的殘液目前或丟棄，或廉價售出，殘液中含量較為豐富的綠原酸和黃酮類化合物等生物活性物質未能得到充分的開發和利用，造成了資源浪費。
[0027]所以，研究設計出一種能夠簡單的大量提取分離金銀花露生產殘液中綠原酸和黃酮的工藝十分重要，可以有效的利用植物資源，提高金銀花的藥用價值，促進金銀花的綜合利用和深加工產業的發展，具有顯著的經