銀杏內酯k晶k型及制備方法和其組合物與用圖
【技術領域】
[0001] 本發明涉及發現了銀杏內酯Κ在固體狀態下存在的晶Κ型狀態形式;涉及發明了晶 Κ型的制備方法;涉及發明了含有銀杏內酯Κ晶Κ型及含任意非零比例晶Κ型的混合晶型的藥 物組合物;本發明還涉及銀杏內酯Κ晶Κ型作為藥物有效成分，在制備各種心腦血管疾病、糖 尿病、免疫系統疾病及神經系統疾病防治藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 銀杏內酯Κ屬于銀杏二萜內酯，其結構式如下所示，該化合物為天然PAF受體拮抗 劑。其對中樞神經系統、缺血損傷具有保護作用，可用于治療缺血性腦血管疾病及相關疾 病。
[0004] 銀杏內酯Κ的分子結構式
[0005] 在中國專利CN101824041(公開號）[1]中，記載了廣東省中藥研究院發明的"一種銀 杏內酯Κ的制備方法"，其中涉及了利用銀杏內酯Β加酸脫水濃縮后使用乙醇或甲醇溶液進 行重結晶，制得銀杏內酯Κ。
[0006] 在中國專利CN102002052(公開號）[2]中，記載了江蘇康緣藥業股份有限公司發明 的"銀杏內酯K及其復合物及其制備方法與用途"，其中涉及了銀杏內酯B的溶解，轉化，加酸 沉淀或濃縮析晶及將沉淀物或結晶進行重結晶的步驟。其中將沉淀物或結晶用乙醇、甲醇、 丙酮或正丁醇溶液重結晶可制得銀杏內酯K。
[0007] 在中國專利CN101747338(公開號）[3]中，記載了廣州艾格生物科技有限公司發明 的"一種銀杏內酯類化合物制備方法"，其中涉及了銀杏內酯K的提取、柱層析、濃縮及重結 晶步驟。其中使用95%甲醇溶液重結晶可制得銀杏內酯K。
[0008] 在中國專利CN1424315(公開號）[4]中，記載了江蘇康緣藥業股份有限公司發明的 "銀杏內酯化合物及其制備方法和含有該化合物的藥物組合物"，其中涉及了分離純化銀杏 內酯K的方法。將銀杏內酯粗品經乙酸乙酯或丙酮溶液進行回流提取，經柱層析純化，用石 油醚-乙酸乙酯洗脫后合并濃縮洗脫液，放置出現沉淀，將沉淀用丙酮溶解以制備型高效液 相純化，可得銀杏內酯K。
[0009] 文獻《銀杏萜內酯的分離、純化和結構鑒定》[5]中用采用銀杏葉的乙酸乙酯回流 液，柱層析純化后，用CH 2Cl2-MeOH洗脫，收集銀杏內酯粗品洗脫液，重結晶后經過制備型RP- HPLC純化，制得銀杏內酯K純品。
[0010] 《Determination of the derivative from ginkgolide Β》等文獻中[6-7]涉及了 將銀杏內酯B用甲醇溶液溶解后使用RP-HPLC/UV法在半制備色譜柱上進行分離，流動相為 甲醇-水，檢測波長為216nm，得到了一種銀杏內酯B的衍生物即為銀杏內酯K。
[0011]《銀杏內酯提取物中微量成分的LC/DAD/ESI/MS分析及結構鑒定》中使用70%丙酮 溶液將銀杏內酯提取物完全溶解，后經過制備分離方法得到銀杏內酯K純品[8]。
[0012] 上述專利與文獻公開的銀杏內酯K固體樣品，經試驗證實均為銀杏內酯K的不同溶 劑合物。經國內外專利與文獻檢索，未發現有關銀杏內酯K的其它晶型專利或文獻報道。
[0013] 本發明發現了與上述專利或文獻研究報道內容不同的一種新的銀杏內酯K固體物 質存在狀態，即銀杏內酯K的晶K型，其含有一分子結晶水，發現了該晶K型的制備方法，以及 其安全性與穩定性方面的優勢特征。
[0014] 本發明的研究目的是從銀杏內酯K的晶型固體物質存在狀態研究入手，通過晶型 篩選技術、晶型生物活性評價技術，在藥物的有效成分原料層面上尋找、發現晶型固體物質 存在種類與狀態特征，將晶型物質與藥效學研究相結合，為尋找、發現、開發具有最佳臨床 療效的銀杏內酯K的優勢藥用晶型固體物質提供基礎科學數據；同時，也為從銀杏內酯K固 體藥物原料物質基礎上申請國家或國際的知識產權發明專利保護提供科學依據
【發明內容】
[0015] 本發明目的之一:提供銀杏內酯K晶K型的存在狀態和描述方式。
[0016]本發明目的之二:提供銀杏內酯K晶K型的制備方法。
[0017]本發明目的之三:提供含有銀杏內酯K晶K型純品、或含有任意非零比例晶K型的混 合晶型的固體藥物及其組合物。
[0018]本發明目的之四：提供使用銀杏內酯K晶K型作為藥物活性成分的藥物組合物，其 每日用藥劑量在50yg~100mg范圍內。
[0019]本發明目的之五:提供使用銀杏內酯K晶K型作為藥物活性成分原料而制備開發出 供臨床使用的片劑、膠囊、丸劑、針劑、緩釋或控釋制劑藥物。
[0020] 本發明目的之六:提供銀杏內酯K晶K型在安全性及穩定性方面的優勢特征。
[0021] 本發明目的之七:提供使用銀杏內酯K晶K型作為活性成分，在制備各種心腦血管 疾病、糖尿病、免疫系統疾病及神經系統疾病防治藥物中的應用。
[0022] 本發明提供了銀杏內酯K在固體狀態下的晶K型形式，晶K型樣品的制備方法;發現 使用銀杏內酯K的晶K型作為活性成分制備開發出的藥物及其組合物用于制備各種心腦血 管疾病、糖尿病、免疫系統疾病及神經系統疾病防治藥物中的應用。
[0023] 技術特征
[0024] 1.銀杏內酯K晶A型固體物質形態特征：
[0025] 1.1本發明涉及的銀杏內酯K晶K型，其特征在于，含有一分子結晶水，當使用粉末X 射線衍射分析采用CuKa輻射實驗條件時，表現為衍射峰位置:2-Theta值(°)或d值（A)和衍 射峰相對強度：峰高值(H e i g h t % )或峰面積值(A r e a % )具有如下特征峰值時的固體物質 (表1，圖1):
[0026] 表1銀杏內酯K晶K型的粉末X射線衍射峰值
[0029] 1.2本發明涉及的銀杏內酯K晶K型，其特征在于，使用衰減全反射傅立葉紅外光譜 法進行分析時，在 3565，3509，3143，2970，2951，2918，2867，1790，1762，1709，1629，1508， 1471，1442,1407,1379,1371，1360,1345,1311，1286,1264,1243,1235,1219,1189,1179， 1154，1129，1115，1081，1067，1043，1025，999，961，939，928，901，892,833，798,754,730， 721，696,655cm- 1處存在紅外光譜特征峰，其中紅外光譜特征峰的允許偏差為± 2cm-1(圖 2)〇
[0030] 1.3本發明涉及的銀杏內酯K晶K型，其特征在于，使用差示掃描量熱技術分析時， 表現為在30~300°C范圍內，當升溫速率為每分鐘10°C的DSC圖譜中，分別在133°C±5°C及 293°C ±5°C溫度處存在2個吸熱峰（圖3)。
[0031] 1.4本發明涉及的銀杏內酯K晶K型，其特征在于，使用熱重技術分析時，表現為在 30~200°C溫度范圍內，升溫速率為每分鐘10°C的TG圖譜中，在80~200°C溫度范圍內存在1 個溶劑成分失重臺階，失重比例為4% ±1% (圖4)。
[0032] 2.銀杏內酯K晶K型固體物質的制備方法特征：
[0033] 2.1本發明涉及的銀杏內酯K晶K型的制備方法，其特征在于，使用甲醇、乙醇、丙 酮、或四氫呋喃的單一溶劑，或由甲醇、乙醇、水、丙酮及四氫呋喃中任意兩種或多種經不同 配比組合制成的混合溶劑，在20°C~60°C溫度下將銀杏內酯K樣品完全溶解，經環境溫度10 °〇~301，放置1至10天獲得。
[0034] 2.2本發明涉及的的銀杏內酯K晶K型的制備方法，其特征在于，使用銀杏內酯K溶 劑合物，經環境溫度l〇°C~30°C、環境相對濕度50%~95%、放置1至10天獲得。
[0035] 3.銀杏內酯K的晶型成分、給藥劑量及藥物制劑組合物特征：
[0036] 3.1本發明涉及的銀杏內酯K的混合晶型固體物質，其特征在于，含有任意非零比 例的銀杏內酯K晶K型。
[0037] 3.2本發明涉及的藥物組合物，其特征在于，含有銀杏內酯K晶K型，或含有銀杏內 酯K的混晶固體物質和藥學上可接受的載體。
[0038] 3.3本發明涉及的藥物組合物，銀杏內酯K的每日用藥劑量在50yg~100mg范圍內。
[0039] 3.4本發明涉及的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物是片劑、膠囊、丸 劑、針劑、緩釋制劑或控釋制劑。
[0040] 3.5本發明涉及的銀杏內酯K晶K型，或銀杏內酯K的混合晶型固體物質，或藥物組 合物在制備各種心腦血管疾病、糖尿病、免疫系統疾病及神經系統疾病防治藥物中的應用。 [0041 ] 4.銀杏內酯K無溶劑合物成分口服給藥的優勢吸收和血藥濃度特征：
[0042] 4.1銀杏內酯K晶K型在高溫（60°C)，高濕（25°C，RH90 % ± 5 % )，光照（45001x 土 5001x)的條件下放置10天，均不發生轉晶現象，表現出良好的穩定性。
[0043] 4.2銀杏內酯K晶K型不含任何結晶溶劑，具有良好的安全性。
【附圖說明】
[0044] 圖1銀杏內酯K晶K型的粉末X射線衍射圖譜
[0045] 圖2銀杏內酯K晶K型的紅外吸收光譜圖 [0046]圖3銀杏內酯K晶K型的差示掃描量熱圖譜 [0047]圖4銀杏內酯K晶K型的熱重圖譜
【具體實施方式】
[0048]為更好說明本發明的技術方案，特給出以下實施例，但本發明并不僅限于此。
[0049] 實施例1
[0050] 銀杏內酯K晶K型的制備方法1:
[0051] 使用四氫呋喃溶劑在20°C下將銀杏內酯K樣品完全溶解，經環境溫度20°C，放置2 天，重結晶獲得銀杏內酯K固體物質。對其進行粉末X射線衍射分析，其衍射圖譜與圖1 一致， 表明所得樣品為銀杏內酯K晶K型。
[0052] 銀杏內酯K晶K型的制備方法2:
[0053]使用丙酮溶劑在20°C下將銀杏內酯K樣品完全溶解，經環境溫度20°C，放置5天，重 結晶獲得銀杏內酯K固體物質。對其進行粉末X射線衍射分析，其衍射圖譜與圖1 一致，表明 所得樣品為銀杏內酯K晶K型。
[0054] 銀杏內酯K晶K型的制備方法3:
[0055] 使用乙醇溶劑在45°C下將銀杏內酯K樣品完全溶解，經環境溫度10°C，放置6天，重 結晶獲得銀杏內酯K固體物質。對其進行粉末X射線衍射分析，其衍射圖譜與圖1 一致，表明 所得樣品為銀杏內酯K晶K型。
[0056] 銀杏內酯K晶K型的制備方法4:
[0057]使用甲醇溶劑在40°C下將銀杏內酯K樣品完全溶解，經環境溫度10°C，放置8天，重 結晶獲得銀杏內酯K固體物質。對其進行粉末X射線衍射分析，其衍射圖譜與圖1 一致，表明 所得樣品為銀杏內酯K晶K型。
[0058]銀杏內酯K晶K型的制備方法5:
[0059] 使用甲醇-水(v/v = 2:1)混合溶劑在50°C下將銀杏內酯K樣品完全溶解，經環境溫 度l〇°C，放置10天，重結晶獲得銀杏內酯K固體物質。對其進行粉末X射線衍射分析，其衍射 圖譜與圖1 一致，表明所得樣品為銀杏內酯K晶K型。
[0060] 銀杏內酯K晶K型的制備方法6:
[0061] 使用甲醇-乙醇(v/v=l:l)混合溶劑在50°C下將銀杏內酯K樣品完全溶解，經環境 溫度l〇°C，放置8天，重結晶獲得銀杏內酯K固體物質。對其進行粉末X射線衍射分析，其衍射 圖譜與圖1 一致，表明所得樣品為銀杏內酯K晶K型。
[0062] 銀杏內酯K晶K型的制備方法7: