一種腦膠質瘤細胞及其用圖
【技術領域】
[0001] 本發明涉及細胞生物技術領域，具體地，涉及一種腦膠質瘤細胞以及該腦膠質瘤 細胞的用途。
【背景技術】
[0002] 膠質母細胞瘤是星形細胞腫瘤中惡性程度最高的膠質瘤。該腫瘤位于皮質下，多 數生長于幕上大腦半球的各處。呈浸潤性生長，常侵犯幾個腦葉，并侵犯深部結構，還可經 胼胝體波及對側大腦半球。發生部位以額葉最多見，其他依次為顳葉、頂葉，少數可見于枕 葉/丘腦和基底節等。
[0003]膠質母細胞瘤生長速度快、病程短，70-80 %患者病程在3-6個月，病程超過1年者 僅10%。個別病例因腫瘤出血，可呈卒中樣發病，由于腫瘤生長迅速，腦水腫廣泛顱內壓增 高癥狀明顯，幾乎全部患者都有頭痛、嘔吐、視盤水腫有頭痛、精神改變、肢體無力、嘔吐、意 識障礙與言語障礙。腫瘤浸潤性破壞腦組織，造成一系列的局灶癥狀，患者有不同程度的偏 癱、偏身感覺障礙失語和偏盲等。神經系統檢查可發現偏癱、腦神經損害、偏身感覺障礙與 偏盲。約33 %的患者有癲癇發作，約20 %的患者表現淡漠、癡呆、智力減退等精神癥狀。
[0004] 膠質母細胞瘤可分為由低級別星形細胞瘤發展而來的繼發性膠質母細胞瘤 (secondary glioblastoma)和不表現低度病變惡性前期的原發性膠質母細胞瘤(primary glioblastoma)兩類，而在組織學上很難區分繼發性膠質母細胞瘤和原發性膠質母細胞瘤。 目前，已經發現異梓檬酸脫氫酶（Isocitrate Dehydrogenase，IDH)的突變只在繼發性膠質 母細胞瘤中，但仍然有一部分繼發性膠質母細胞瘤中并不發生異檸檬酸脫氫酶的突變。
[0005] 原發性膠質母細胞瘤是從第一次臨床診斷即為四級膠質母細胞瘤，其最明顯的分 子特征是EGFR擴增，突變或過表達(40 % )，P53突變(30 % )，CDKN2A/B缺失(30-40 % )，RB1突 變或缺失，10號染色體丟失(70% )，以及PTEN突變(30% )等。繼發性膠質母細胞瘤是由低級 另|J(II級或III級)進展而來的四級膠質母細胞瘤。它的臨床第一次診斷即為低級別膠質瘤， 一般經過手術或者放化療之后腫瘤再次出現，而級別進展到四級膠質母細胞瘤。研究發現， 繼發性膠質母細胞瘤的分子標志物及基因細胞通路與原發性膠質母細胞瘤不同。目前研究 最熱的是異檸檬酸脫氫酶1突變(70%)，另外還包括P53突變(65%)，H)GFA和TOGFRA過表達 (60 % )，19號染色體長臂的缺失(50 % )，以及RB1的突變或者缺失(25 % )。
[0006] 這些分子標志物的發現為膠質母細胞瘤的靶向治療提供了重要靶點。然而，針對 這些分子標志物的靶向藥物已經很多，但都未真正進入臨床應用階段，歸根結底是靶向關 系的特異性較低，由此導致療效較低且副作用較大，不適于臨床應用。
[0007] 本發明的發明人在之前的研究中發現，在腦膠質瘤中，有一個類群的患者特異性 地表達一種融合蛋白，表達該融合蛋白的患者類群屬于腦膠質瘤的一個新的亞型，表現出 與其它腦膠質瘤患者不同的預后和藥物敏感性。但是由于缺少合適的細胞模型，目前對該 腦膠質瘤的藥物開發存在篩選困難的問題。
【發明內容】
[0008] 為了克服缺少合適的細胞模型的缺陷，本發明提供了一種腦膠質瘤細胞，該腦膠 質瘤細胞特別適合用于上述腦膠質瘤亞型的藥物篩選。
[0009] 本發明的發明人從腦膠質瘤組織中進行原代細胞培養和傳代細胞培養，篩選得到 了一株穩定連續傳代的腦膠質瘤細胞，該腦膠質瘤細胞穩定表達上述融合蛋白，且表現出 特異的藥物敏感性，由此得到了本發明。
[0010] 本發明提供了一種腦膠質瘤細胞，其中，該腦膠質瘤細胞的保藏編號為CGMCC N0.11100。
[0011] 本發明還提供了如上所述的腦膠質瘤細胞在篩選藥物中的用途。
[0012] 通過上述技術方案，本發明能夠簡化和加快對上述腦膠質瘤細胞亞型的藥物篩 選。
[0013] 本發明的其他特征和優點將在隨后的【具體實施方式】部分予以詳細說明。
[0014] 生物材料保藏
[0015] 本發明的腦膠質瘤細胞是本發明的發明人從腦膠質瘤組織中進行原代細胞培養 和傳代細胞培養，篩選得到了 一株穩定連續傳代的腦膠質瘤細胞，其保藏編號為CGMCC No. 11100,保藏日期為2015年8月31日，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微 生物中心，地址位于北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，分類命名 為人屬腦膠質瘤細胞系。
【附圖說明】
[0016] 附圖是用來提供對本發明的進一步理解，并且構成說明書的一部分，與下面的具 體實施方式一起用于解釋本發明，但并不構成對本發明的限制。在附圖中：
[0017]圖1是保藏編號為CGMCC No. 11100的本發明的細胞的照片。
【具體實施方式】
[0018] 以下對本發明的【具體實施方式】進行詳細說明。應當理解的是，此處所描述的具體 實施方式僅用于說明和解釋本發明，并不用于限制本發明。
[0019] 本發明提供了一種腦膠質瘤細胞，其中，該腦膠質瘤細胞的保藏編號為CGMCC NO.lllOOo
[0020] 本發明還提供了如上所述的腦膠質瘤細胞在篩選藥物中的用途。
[0021] 其中，如上所述的腦膠質瘤細胞可以用于多種藥物的篩選，優選地，所述藥物可以 為治療腫瘤的藥物;更優選地，所述腫瘤為膠質母細胞瘤。
[0022] 其中，根據本發明特別優選的一種實施方式，所述膠質母細胞瘤為表達融合蛋白 的膠質母細胞瘤亞型，所述融合蛋白在N末端至C末端方向上由第一蛋白片段和第二蛋白片 段連接而成，所述第一蛋白片段如SEQ ID N0:l、2、3或4所示，所述第二蛋白片段如SEQ ID NO: 5或6所示。
[0023] 其中，SEQ ID N0:1的序列是來自人PTPRZ1基因 （NCBI Gene ID為5803)的第一外 顯子和內含子序列編碼的蛋白序列。
[0024] 其中，SEQ ID N0:2的序列是來自人PTPRZ1基因的第二外顯子和內含子序列編碼 的蛋白序列。
[0025] 其中，SEQ ID N0:3的序列是來自人PTPRZ1基因的第三外顯子和內含子序列編碼 的蛋白序列。
[0026] 其中，SEQ ID N0:4的序列是來自人PTPRZ1基因的第八外顯子和內含子序列編碼 的蛋白序列。
[0027] 其中，SEQ ID N0:5的序列是來自人MET基因 （NCBI Gene ID為4233)編碼的同源異 構體1蛋白序列的片段。
[0028]其中，SEQ ID N0:6的序列是來自人MET基因編碼的同源異構體2蛋白序列的片段。
[0029] 本發明中，上述融合蛋白可以由融合核酸編碼，其中，編碼如上所述的融合蛋白的 融合核酸的序列可以根據氨基酸密碼子對照表解碼得到，由于密碼子簡并性的存在，編碼 同一氨基酸序列的融合蛋白的多個融合核酸的序列可以彼此不同。
[0030] 優選地，所述膠質母細胞瘤亞型為還轉錄有融合mRNA的膠質母細胞瘤亞型，所述 融合mRNA的cDNA在5'至3'方向上由第一核酸片段和第二核酸片段連接而成，所述第一核酸 片段如SEQIDN0 :7、8、9或10所示，所述第二核酸片段如SEQIDN0:11或12所示。
[0031] 其中，SEQ ID N0:7的序列來自人PTPRZ1基因的第一外顯子和內含子序列，編碼如 SEQ ID N0:1所示的蛋白。<