一種杞龍sod營養口服液的加工工藝及配方的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于保健品領域，尤其涉及一種杞龍S0D營養口服液的加工工藝及配方。
【背景技術】
[0002] S0D是SuperOxideDismutase縮寫，中文名稱超氧化物歧化酶，是生物體內重要 的抗氧化酶，在生物界的分布極廣，幾乎從動物到植物，甚至從人到單細胞生物，都有它的 存在。S0D具有特殊的生理活性，是生物體內清除自由基的首要物質。S0D在生物體內的水 平高低意味著衰老與死亡的直觀指標；現已證實，由氧自由基引發的疾病多達60多種。它 可對抗與阻斷因氧自由基對細胞造成的損害，并及時修復受損細胞，復原因自由基造成的 對細胞傷害。由于現代生活壓力，環境污染，各種輻射和超量運動都會造成氧自由基大量形 成；因此，生物抗氧化機制中S0D的地位越來越重要。
[0003] 超氧化物歧化酶按其所含金屬輔基不同可分為三種，第一種是含銅（Cu)鋅（Zn) 金屬輔基的稱（Cu、ZnSOD)，最為常見的一種酶，呈綠色，主要存在于機體細胞漿中；第二種 是是含錳（Μη)金屬輔基的稱（Mn、S0D)，呈紫色，存在于真核細胞的線粒體和原核細胞內； 第三種是含鐵（Fe)金屬輔基的稱（Fe、S0D)，呈黃褐色，存在于原核細胞中。
[0004]目前，我國一般從牛、馬、豬、雞狗等動物血中提取S0D豐富，消耗的成本比較高，T 通過檢索發現，目前還沒有從地龍中提取S0D制成保健口服液的案例。
【發明內容】
[0005] 本發明針對上述技術問題，提供了一種從地龍中提取S0D制成保健口服液的杞龍 S0D營養口服液的加工工藝及配方。
[0006] 本發明所采用的技術方案為：
[0007] -種杞龍S0D營養口服液的加工工藝，其特征在于：包括如下步驟：
[0008] 一、地龍S0D的提取
[0009] (1)養殖：以蔬菜、秸桿、菌棒、蔗渣、薯渣經特殊工藝處理后做飼料養殖蚯蚓；
[0010] ⑵除污：將所述步驟⑴中所得的養殖活蚯蚓洗凈，置于新鮮水中或含量 <0.3% (以重量計）的有機酸鈉鹽中清洗消毒，直至其消化道內的污物被徹底清除，然后 再除去其表面軀體上的所有污物；
[0011] (3)蚓汁制備：將所述步驟（2)中所得的除污后活蚯蚓進行濕磨，得到的蚓汁 在-60°C~-10°C的溫度下冷凍后儲存；
[0012] (4)粗酶液的提取：將所述步驟（3)中所得的新鮮蚓汁或其冷凍物在PH值 7. 4-7. 8、20-30mmol/LTris-Gly緩沖液中勻漿至l-3L/kg，攪拌1~2小時，然后在 10000-20000r/min下離心15-45分鐘，棄沉淀物得清液；
[0013] (5)熱變性、丙酮沉淀：將所述步驟（4)中所得的清液在60_70°C加熱5~25分 鐘，然后冷卻至2-6°C，過濾后的濾液中加入1-2倍體積的丙酮，收集沉淀，沉淀物用少量的 PH值7. 4-7. 8、20-30mmol/LTris-Gly緩沖液溶解，棄沉淀物得上清液；
[0014] (6)粗提純：將所述步驟（5)中所得的上清液在攪拌下加入內含5-15molMg2+、 5-15molCu2+、5-15molZn2+的化合物，使上清液的飽和度達40-50%，繼續攪拌10-20分鐘，然 后在1500-2500r/min下離心20-40分鐘，棄去沉淀，向上清液中繼續加入硫酸銨溶液，使其 飽和度達60-70 %，離心收集沉淀；
[0015] (7)柱層析：將所述步驟（6)中所得的沉淀溶解在PH值7. 4-7. 8、20-30mmol/L緩 沖液中，接著透析至無so24為止，透析液最后上DEAE-SephadexA-50層析柱，收集洗脫液， 濃縮、冷卻、干燥，即得藍綠色的Cu、ZnSOD。
[0016] 二、濃縮液的制備
[0017] (i)精選處理：人工挑選干凈、無雜質、無污染的輔藥；
[0018] (ii)加水煎煮、濃縮：將所述步驟（i)中選出的輔藥用砂鍋或搪瓷鍋加水煎煮， 加水量以浸沒藥材2~3cm為宜，沸后改用文火慢煎40-60分鐘，煎藥時要攪拌藥料2-3次， 每劑一般煎二次，得到煎煮混合物；
[0019] (iii)過濾：將所述步驟（ii)中所得到的煎煮混合物進行過濾，除去藥漁，得到 煎煮藥液；
[0020] 三、口服營養液的制備
[0021] (a)混合：將所述步驟（7)中所得的Cu、ZnS0D加入所述步驟（iii)中所得的煎煮 藥液中，攪拌均勻，得到混合營養液；
[0022] (b)滅菌、過濾：將全玻璃過濾器的過濾器和微孔濾膜在121°C度下滅菌30分鐘， 在無菌超凈工作臺上取出后安裝到位，然后再對所述步驟（a)中所得的混合營養液進行抽 濾過濾，檢驗合格，得到無菌營養液；
[0023] (c)灌裝：將所述步驟（b)中所得的無菌營養液經電子計量灌裝，得到灌裝營養 液；
[0024] (d)質檢：對所述步驟（c)中所得的灌裝營養液進行質檢，質檢合格，即得成品。
[0025] 所述步驟一中的最優地龍S0D的提取步驟為：
[0026] (1)養殖：以蔬菜、秸桿、菌棒、蔗渣、薯渣經特殊工藝處理后做飼料養殖蚯蚓；
[0027] (2)除污：將所述步驟⑴中所得的養殖活蚯蚓洗凈，置于新鮮水中或含量 <0.3% (以重量計）的有機酸鈉鹽中清洗消毒，直至其消化道內的污物被徹底清除，然后 再除去其表面軀體上的所有污物；
[0028]⑶蝴汁制備：將所述步驟⑵中所得的除污后活蚯蚓進行濕磨，得到的蚓汁 在-60°C~-10°C的溫度下冷凍后儲存；
[0029] (4)粗酶液的提取：將所述步驟（3)中所得的新鮮蚓汁或其冷凍物在PH值7. 6、 25mmol/LTris_Gly緩沖液中勻楽至2L/kg，攪拌1~2小時，然后在15000r/min下離心30 分鐘，棄沉淀物得清液；
[0030] (5)熱變性、丙酮沉淀：將所述步驟（4)中所得的清液在65°C加熱10~20分鐘， 然后冷卻至4°C，過濾后的濾液中加入1. 25倍體積的丙酮，收集沉淀，沉淀物用少量的PH值 7. 6、25mm〇l/LTris-Gly緩沖液溶解，棄沉淀物得上清液；
[0031](6)粗提純：將所述步驟（5)中所得的上清液在攪拌下加入內含lOmolMg' 10m〇lCu2+、10m〇lZn2+的化合物，使上清液的飽和度達45 %，繼續攪拌15分鐘，然后在 2000r/min下離心30分鐘，棄去沉淀，向上清液中繼續加入硫酸銨溶液，使其飽和度達 65%，離心收集沉淀；
[0032] (7)柱層析：將所述步驟（6)中所得的沉淀溶解在PH值7. 6、25mm〇l/LTris-Gly緩 沖液中，接著透析至無SO24為止，透析液最后上DEAE-SephadexA-50層析柱（柱床體積為 2. 5X50cm)，收集洗脫液，濃縮、冷卻、干燥，即得藍綠色的Cu、ZnSOD。
[0033] 所述步驟（1)中的地龍為養殖的鮮活赤子愛勝蚓。
[0034] -種杞龍S0D營養口服液的配方，其特征在于：包括地龍S0D與輔藥。
[0035] 所述輔藥為茯苓、大棗、枸杞子、阿膠、桑椹、銀耳，杞龍S0D營養口服液中各成分 及其質量份數組成為：地龍S0D100-140份、茯苓45-85份、大棗20-60份、枸杞子60-100份、 阿膠40-80份、桑椹25-65份、銀耳60-100份。
[0036] 杞龍S0D營養口服液中各成分及其最優質量分數組成為：地龍S0D120份、茯苓65 份、大棗40份、枸杞子80份、阿膠60份、桑椹45份、銀耳80份。
[0037] 所述輔藥為砂仁、肉桂、丁香，杞龍S0D營養口服液中各成分及其質量分數組成 為：地龍S0D160-200份、砂仁90-130份、肉桂110-150份、丁香100-140份。
[0038] 杞龍S0D營養口服液中各成分及其最優質量分數組成為：地龍S0D180份、砂仁 110份、肉桂130份、丁香120份。
[0039] 所述輔藥為山楂、蘆薈、決明子、荷葉、沙棘，杞龍S0D營養口服液中各成分及其質 量分數組成為：地龍S0D120-160份、山楂60-100份、蘆薈100-140份、決明子65-105份、荷 葉50-90份、沙棘100-140份。
[0040] 杞龍S