一種姬松茸多糖及其提取方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種生物醫藥技術領域，尤其涉及一種姬松茸多糖的提取方法。
【背景技術】
[0002]姬松茸又名巴西蘑菇，原產于巴西等南美國家。1992年引入我國。姬松茸具有抗輻射性能、提高人體免疫機能、能讓免疫系統長期保持在最佳狀態。所以姬松茸對一些因免疫系統失調而引發的疾病(如風濕性關節炎、哮喘、紅斑狼瘡等)都能發揮功效。
[0003]姬松茸多糖具有螺旋狀的三維立體結構，是一種β型的葡萄糖。此類多糖進入人體后不會被消化系統消化、分解。而是直接作用于細胞膜上的受體，使其發生藥理作用。其藥效顯著并多樣，而且許多效果是其他真菌多糖所不具備的。
[0004]近年來姬松茸多糖已被醫學界證實為具有顯著的藥理效果，美國賓州大學教授辛登博士與藍伯研究所的藍伯博士，發表關于抗癌作用等藥效的研究報告后，姬松茸多糖便實時瘋摩全球，知名度頓時提高，各國企業及醫療機構紛紛研制相應的膠囊、粉劑。
[0005]目前關于姬松茸多糖的提取方法比較多，公開號CN1647695A提出了一種先用乙醇除小分子雜質，然后用水提取姬松茸多糖，然后將水溶液濃縮。該方法雖然除去了部分雜質，但是對于蛋白質的干擾不能不排除，而且提取純度很低；公開號為CN1663965A，采用超臨界萃取，然后水提取，但這種方法對設備要求高，提取率也不高，設備要求高也不合適工業化大生產。公開號為CN101768614A的專利提供一種由酶除蛋白，然后水提取，接下來樹脂純化的一種獲取姬松茸多糖的方法，但是該方法的問題就是提取率低，而且提取后的純度也低，達不到目前醫藥市場對姬松茸多糖的品質要求。
【發明內容】
[0006]針對上述技術問題，本發明提供了一種提取率高、提取純度高的姬松茸多糖的提取方法。
[0007]本發明還提供了一種純度高的姬松茸多糖。
[0008]本發明提供的技術方案為:
[0009]—種姬松茸多糖的提取方法，包括以下步驟:
[0010]步驟(1)將姬松茸菌絲體置于質量濃度為1%?4%的草酸銨溶液中，在50?80°C下提取1?3h，然后加入活性炭，處理得到姬松茸菌絲體提取液；
[0011]步驟(2)采用DEAE-纖維素-A52弱陰離子交換柱對步驟(1)所得的姬松茸菌絲體提取液進行凝膠過濾層析，收集洗脫液；
[0012]步驟(3)用0.5?0.8μπι的無機陶瓷微濾膜對所述洗脫液進行濃縮，壓力為0.50?
0.90MPa，流速為10?20L/h，得到姬松茸多糖溶液；
[0013]步驟(4)采用乙醇沉淀法處理所述姬松茸多糖溶液，得到姬松茸多糖。
[0014]優選的是，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步驟(1)中，在加入活性炭之前，保持溫度，加入活性炭后，保溫攪拌30?60min，活性炭相對于草酸銨溶液的質量比為5 %?8%0
[0015]優選的是，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步驟(1)中，在保溫攪拌之后，板框壓濾得到姬松茸菌絲體提取液。
[0016]優選的是，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步驟(2)中，采用0.lmol/L NaCl溶液進行洗脫，流速為10.ο?30.0L/h。
[0017]優選的是，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步驟(4)中，將所述姬松茸多糖溶液濃縮至原體積的1 /5，向濃縮液中加入乙醇使乙醇在濃縮液中的終濃度達到70?80 %，
靜置5?8h。
[0018]優選的是，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步驟(4)中，靜置之后，在2000rpm下離心，取沉淀物，在40°C下真空干燥，得到姬松茸多糖。
[0019]—種由所述方法制備得到的姬松茸多糖。
[0020]本發明所述的姬松茸多糖的提取方法有以下有益效果:
[0021]采用草酸銨溶液提取姬松茸多糖，對子實體和菌絲體的多糖提取都能提高產率，提取時間短，而且條件溫和。本工藝采用活性炭在水中脫色，吸附，使水中的有機物和不溶物被活性炭吸附，同時也舍棄了Sevag法除蛋白這個方法，放棄使用氯仿、正丁醇等大量有機溶解，是一種綠色環境友好型工藝。采用陶瓷微濾膜分離純化姬松茸多糖，定向準確地分離出了姬松茸多糖。采用本發明的方法，姬松茸多糖的提取率不低于9.0%，所制得姬松茸多糖純度不低于96 %。
【附圖說明】
[0022]圖1為本發明的一個實施例中姬松茸多糖的提取方法的流程圖。
【具體實施方式】
[0023]下面結合附圖對本發明做進一步的詳細說明，以令本領域技術人員參照說明書文字能夠據以實施。
[0024]如圖1所示，本發明提供一種姬松茸多糖的提取方法，包括以下步驟:
[0025]步驟(1)將姬松茸菌絲體置于質量濃度為1%?4%的草酸銨溶液中，在50?80°C下提取1?3h，然后加入活性炭，處理得到姬松茸菌絲體提取液；
[0026]步驟(2)采用DEAE-纖維素-A52弱陰離子交換柱對步驟(1)所得的姬松茸菌絲體提取液進行凝膠過濾層析，收集洗脫液；
[0027]步驟(3)用0.5?0.8μπι的無機陶瓷微濾膜對所述洗脫液進行濃縮，壓力為0.50?
0.90MPa，流速為10?20L/h，得到姬松茸多糖溶液；
[0028]步驟(4)采用乙醇沉淀法處理所述姬松茸多糖溶液，得到姬松茸多糖。
[0029]本發明的特點是采用草酸銨提取、超濾分離、乙醇沉淀精制等工藝從菌絲體中提取姬松茸多糖，提取方法操作簡單，是一種可實現連續大生產要求的穩定工藝。
[0030]本發明中，采用草酸銨溶液提取姬松茸多糖，對子實體和菌絲體的多糖提取都能提高產率，提取時間短，而且條件溫和。
[0031]本發明采用活性炭在水中脫色，吸附，使水中的有機物和不溶物被活性炭吸附，同時也舍棄了用Sevag法除蛋白這個步驟，放棄了氯仿、正丁醇等大量有機溶解，是一種綠色環境友好型工藝。
[0032]本發明采用無機陶瓷微濾膜分離純化姬松茸多糖，定向準確地分離出了姬松茸多糖，而將其他雜質分離出去，從而保證對姬松茸多糖提取的純度。目前廣泛使用的有機微濾膜，都存在化學穩定性差、易老化、使用壽命短以及耐高溫、酸、堿及有機溶劑性能差等缺點。與有機膜相比，無機陶瓷膜具有耐高溫、耐酸堿、機械強度高、使用壽命長、運行穩定性好、污染后易清洗等優點。
[0033]利用本發明的方法，對姬松茸多糖的提取率不低于9.0%，姬松茸多糖純度不低于96%。
[0034]進一步地，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步驟(1)中，在加入活性炭之前，保持溫度，加入活性炭后，保溫攪拌30?60min，，活性炭相對于草酸銨溶液的質量比為5%?8%。活性炭可以充分吸附除去蛋白質等雜質，保證最終產品的純度，并且同時減少雜質對后續凝膠過濾層析的干擾。
[0035]進一步地，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步驟(1)中，在保溫攪拌之后，板框壓濾得到姬松茸菌絲體提取液。
[0036]進一步地，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步驟(2)中，采用0.lmol/L NaCl溶液進行洗脫，流速為10.0?30.0L/h。合適的流速可以保證將提取液中的有效成分充分地提取出來。
[0037]進一步地，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步驟(4)中，將所述姬松茸多糖溶液濃縮至原體積的1 /5，向濃縮液中加入乙醇使乙醇在濃縮液中的終濃度達到70?80 %，靜置5?8h。
[0038]進一步地，所述的姬松茸多糖的提取方法中，所述步