仔豬飼用微生態發酵劑及其制備方法和活性固態發酵飼料的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及仔豬飼用微生態發酵劑及其制備方法和活性固態發酵飼料，屬于飼料 微生物技術領域。
【背景技術】
[0002] 中國是世界上最大的養殖生產國之一，對飼料原料的需求量與日倶增。近年來，隨 著人們對動物營養研究的深入，對飼料的要求也越來越高，人民更加注重質量而不僅僅是 對產量的追求。然而，資源逐漸匱乏，蛋白源短缺尤為嚴重，蛋白質的供需矛盾日益尖銳。其 中微生物發酵飼料日益受到重視。
[0003] 微生物發酵飼料是指在人為可控制的條件下，以農副產品為主要原料，通過微生 物的代謝作用，將植物性、動物性和礦物性物質中的抗營養因子分解、合成，產生更能被畜、 禽采食、消化、吸收養分和無毒害作用的生物飼料或飼料原料。微生態飼料添加劑又稱微生 態制劑、益生素、活菌制劑等，添加到飼料中進行適當的發酵即為微生態發酵飼料。具有直 接通過增強動物對腸內有害微生物的抑制作用或通過增強非特異性免疫功能來預防疾病， 從而促進動物生長或提高飼料轉化率的一類藥物或飼料添加劑。
[0004] 微生態制劑安全、有效、不污染環境、無耐藥性，作為抗生素的替代品將在飼料工 業中發揮重要作用。隨著社會的發展，人們對食品安全越來越重視，抗生素飼料添加劑的廣 泛應用所引起的臨床畜禽耐藥問題越來越嚴重，造成的藥物殘留問題不但影響了動物產品 質量，也危害人們的身體健康，其他如導致動物體內菌群失調、產生抗藥性、畜產品適口性 差等問題，尤其是食物鏈的藥物殘留也引起普遍關注。因此，開發和研制新型無污染、無殘 留綠色微生態飼料添加劑，是生產綠色畜禽產品的需要，已受到人們的重視和認可。
[0005] 活性發酵型微生態飼料因具有改善飼料適口性、提高飼料營養價值、生產成本較 低和充分利用多種飼料資源等顯著特點，研究開發潛力極大，是現在和未來安全飼料發展 的重要方向。已成為國內外研究的熱點領域。
[0006] 微生態飼料在發酵菌種上主要表現在由傳統的單一菌種（株）向具有一定功能組 合效應的多菌種（株）發展。目前我國用于飼料強化混合發酵的微生物菌種（菌劑）主要 是與具體的發酵工藝相配套使用的微生物菌種，如CN1024468C中的"粗淀粉料混菌固體發 酵菌體蛋白飼料的方法"，CN1857099A中的"動物發酵濃縮飼料和配合飼料及其制作方法和 設備"。上述微生物發酵制劑菌種過于單一，發酵不全面，發酵效果差，影響仔豬的生長。
【發明內容】
[0007] 本發明的目的是提供一種仔豬飼用微生態發酵劑及其制備方法和活性固態發酵 飼料，通過對具有顯著協同作用的多個菌株的篩選和組合，解決現有技術微生物發酵制劑 存在的過于單一、發酵不全面和發酵效果差的問題，以達到提高產品質量和降低生產成本 的目的。針對仔豬生長階段的營養需求，選取具有強力分解淀粉纖維素，糖化作用較強，高 產蛋白酶的幾株菌株與酵母菌配合使用，提高營養飼料的營養效價和利用率。應用本發明 的飼料飼養仔豬，具有促進生長和增強抗病能力效果顯著、飼料利用效率高以及減輕養殖 環境污染等特點；飼養而得的產品，無抗生素、激素等藥物殘留，營養豐富且口味純正天然。
[0008] 本發明的技術方案：
[0009] -種仔豬飼用微生態發酵劑，其特征在于，按照重量份數計由如下原料配制而 成：
[0010] A:泡盛曲霉（Aspergillus awamori) 1 ~3 汾； B:黑曲霉（Aspergillus rdger) .1 ~3份； C:熱帶假遂酵母 CiCandicia'topiealis.) 2 ~4 汾； D: ΓI (Gcoirichuni candidum) 2 ~4份； E:扣囊復膜孢酵母(Saecharomyces cerevisiae) 1 ~3 份； P;宇佐美曲霉(Aspergillus _amii ) 2~4份； G: ^ [!!!-!!/(Aspcrgilius oryzac} 2~4份
[0011] 上述仔豬飼用微生態發酵劑的制備方法，具體步驟如下：
[0012] 1、一級培養
[0013] (1)配制PDA固體培養基
[0014] AU取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml ;80°C浸泡lh，用紗布過濾，然后補 足失水至1000ml ;IOOPa滅菌20min，即得20%馬鈴薯浸汁，貯存備用；
[0015] A2、按每100mL馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖，加熱煮沸后按每100mL馬鈴薯浸汁加 入2g瓊脂，繼續加熱融化并補足失水；
[0016] A3、分裝、加塞、包扎；
[0017] A4、高壓蒸汽滅菌，IOOPa滅菌20min ;
[0018] A5、臥斜，待冷卻后30°C恒溫培養24h，排除冷凝水，觀察試管培養基表面光滑無 菌則可以進行接菌；
[0019] ⑵斜面接種
[0020] 將各菌種分別斜面接種，30°C恒溫培養24~72h ;
[0021] 2、二級培養
[0022] (1)三角瓶的制作工藝
[0023] B1、裝料：按照重量比，麩皮：水=1:1的比例將兩者進行拌料，每千克混合料加入 2ml濃硫酸；
[0024] B2、裝入三角瓶內高度為20~25cm，裝料為50g/瓶；
[0025] B3、棉塞堵塞封口，再用16層無菌紗布封口；
[0026] B4、高壓蒸汽滅菌，IOOPa滅菌20min。自然冷卻；
[0027] B5、接菌，接菌量每Ig斜面接種20~25g物料；
[0028] B6、28~32°C恒溫培養，培養過程中每兩個小時搖三角瓶一次，攤平；至24小時后 扣瓶，培養6小時后扣瓶，全程36小時，得到種曲，粉碎后過40~60目篩，并測定樣品酶活 力；
[0029] 其中，按照國標方法酶活力定義如下：
[0030] 木聚糖酶活力：在37°C和PH5. 5條件下，每分鐘從濃度為5mg/ml的木聚糖溶液中 降解釋放1 μ mol還原糖所需要的酶量為1個酶活單位u ;
[0031] 果膠酶活力：在37°C和pH5. 5條件下，每分鐘從濃度為4mg/ml的聚半乳糖醛酸溶 液中降解釋放1 μ mol還原糖所需要的酶量為1個酶活單位u ;
[0032] 纖維素酶活力：在37°C和pH5. 5條件下，每分鐘從濃度為4mg/ml的羧甲基纖維素 鈉溶液中降解釋放1 μ mol還原糖所需要的酶量為1個酶活單位u ;
[0033] 淀粉酶活力：在37°C、ρΗ6· 8的條件下，每分鐘水解淀粉生成Img還原糖所需的酶 量；
[0034] 所得二級發酵產物要求細菌總數彡10scfu/g，總酶活彡500u/g，低于此標準不在 用于進行三級接種培養；
[0035] 3、三級培養
[0036] (1)筐式培養基的制作
[0037] B1、裝料：按照重量比將麩皮：水=5:3的比例進行拌料，每公斤混合料加入2ml濃 硫酸、1 %硫酸銨；
[0038] B2、高壓滅菌lOOPa，20min，自然冷卻；
[0039] B3、裝入筐中高度2~3cm的培養基；
[0040] B5、按筐式培養基物料重量的10%進行接菌；
[0041] ⑵培養
[0042] B1、室溫培養，控制室內相對濕度50~85%，培養過程中，堆積培養，每6小時翻 拌一次，至18小時，待其連餅后將其劃碎，36小時候扣筐繼續培養至72小時，得固態發酵 產物，將其粉碎后過40~60目篩，并測定樣品酶活力；所得三級發酵產物要求細菌總數 彡10 scfu/g，總酶活彡500u/g，低于此標準不再在用于進行四級接種培養；
[0043] 4、四級培養
[0044] 將三級培養的各菌株用石膏粉作為載體按照重量比三級培養產物：石膏粉= 1:10混合，進行四級培養，四級培養培養基按重量組成為麩皮：玉米面=1:1，加入和硫 酸，水占麩皮玉米面混合物料總重量的50 %~70%，硫酸占麩皮玉米面混合物料總重量的 1%〇
[0045] 利用上述仔豬飼用微生態發酵劑制備的活性固態發酵飼料，該發酵飼料由如下重 量百分比的原料制備而成：
[0046] 玉米 60~70% 麥麩 5~15% 豆粕 15~20%: 仔豬濃縮料 3:~5% 本發明微生態發酵劑 1:%。
[0047] 本發明的有益效果：