一種禽類微生態制劑及其制備方法與應用
【技術領域】
[0001] 本發明設及一種禽類微生態制劑及其制備方法，本發明設及一種禽類微生態制劑 及其制備方法與應用。
【背景技術】
[0002] 20世紀W來，抗生素、哇乙醇、哇諾酬等藥物的相繼問世，動物養殖業得到迅速發 展，運些藥物在防治疾病、促進動物生長等方面作用十分明顯。但運些藥物的不合理使用 乃至濫用，導致了大量耐藥菌株的產生，使得藥物療效大大降低或者沒有效果，藥物添加劑 引發的病原菌耐藥性、藥物毒性、藥物殘留等弊端也暴露出來，嚴重危害食品安全及人類健 康。
[0003] 為解決W上問題，世界各國，尤其是歐洲、美國、日本等發達國家紛紛對藥物飼料 添加劑的種類、使用方法、劑量和配伍等方面嚴加限制，同時積極鼓勵和倡導綠色安全飼料 添加劑的研究和推廣。歐盟從2006年全面禁止使用抗生素，世界衛生組織（WT0)提出了"在 食用動物中減少抗生素使用的全球原則"，我國已啟動"飼料安全工程"，并禁用了一批毒性 和殘留較大的藥物。在此形勢下，用益生菌來制作的微生態制劑，因其無毒副作用、無耐藥 性、無殘留、成本低、效果顯著、不污染環境及能長期保存的特性，在畜牧業生產上具有廣闊 的應用前景。
[0004] 目前，國內大多微生態制劑生產采用固體發酵等粗放工藝，生產的產品往往目的 菌群和污染的雜菌共同存在，嚴重的影響了產品的使用效果。市場上的微生態制劑存在活 菌含量低、水分含量偏高、不耐抗生素、對胃酸和膽鹽不穩定等問題影響了其在動物上的應 用效果，限制了微生態制劑的廣泛應用。因此，具有克服W上缺點的微生態制劑具有很大的 研究及應用價值。
【發明內容】
[0005] 為了克服現有技術的缺點與不足，本發明的首要目的在于提供一種禽類微生態制 劑。該禽類微生態制劑具有增強免疫力、促進生長W及防治腸道疾病的特點。
[0006] 本發明的另一目的在于提供上述禽類微生態制劑的制備方法。
[0007] 本發明的再一目的在于提供上述禽類微生態制劑的應用。
[0008] 本發明的目的通過下述技術方案實現：
[0009] -種禽類微生態制劑，該制劑是一種粉劑，包括唾液乳桿菌化actobaci1lus saliva;rius)Scgz-ll菌粉、唾液乳桿菌（Xactobacillussaliva;rius)SCL87 菌粉、 LactobacillusingluvieiSCGZ-9 菌粉；
[0010] 所述的唾液乳桿菌Scgz-11菌粉、唾液乳桿菌SCL87菌粉和Lactobaci1lus ingluvieiSCGZ-9菌粉分別是經保護劑包被后制得；
[0011] 所述的保護劑的配方優選為脫脂奶20~30旨/1，玉米淀粉15~25旨/1，可溶性淀 粉90~llOg/L;其中，溶劑為水。
[0012] 所述的唾液乳桿菌Scgz-11菌粉、唾液乳桿菌SCL87菌粉和Lactobaci1lus ingluvieiSCGZ-9菌粉按質量比1: (1~2) : (1~1. 5)混合；
[0013] 所述的禽類微生態制劑還可進一步包含載體，所述的載體優選為麥教、稻慷、石粉 中的至少一種，最終可制成活菌數不小于1X109C化/g的含有載體的禽類微生態制劑。優 選制成活菌數為1X1〇9~1X10i°c化/g的含有載體的禽類微生態制劑。
[0014] 所述的唾液乳桿菌Scgz-11菌粉的制備方法，包括如下步驟：
[0015] 將唾液乳桿菌Scgz-11接種于MRS肉湯培養基，培養得到菌液；然后加入保護劑， 繼續培養得到菌液和保護劑的混合物；將混合物預凍，并凍干成固體，最后制成粉末狀，得 到唾液乳桿菌Scgz-11菌粉。
[0016] 所述的MRS肉湯培養基的配方為（g/L):蛋白腺10.0,牛肉浸粉8.0,酵母浸粉 4. 0,葡萄糖20. 0,憐酸氨二鐘2. 0,巧樣酸氨二錠2. 0,乙酸鋼5. 0,硫酸儀0. 2,硫酸儘 0. 04,吐溫801. 0,抑值5. 7 + 0. 2 ;MRS固體培養基是在MRS肉湯培養基內添加瓊脂14. 0~ 20g/L，并調節抑值6. 5 + 0. 2。
[0017] 所述的培養的條件優選為37±rC，160±30r/min，培養16 +化；
[0018] 所述的保護劑的配方優選為脫脂奶20~30g/l，玉米淀粉15~25g/l，可溶性淀 粉90~llOg/L;其中，溶劑為水。
[0019] 所述的保護劑與菌液的體積比優選為1:(1~1. 5);
[0020] 所述的繼續培養的條件優選為37 ±rC，160 ± 30r/min，繼續培養3~化；
[0021] 所述的預凍的條件優選為-80°C預凍8~12小時；
[0022] 所述的凍干的條件優選為采用真空冷凍的方法，-40°C，50~80化進行凍干；
[0023] 所述的唾液乳桿菌SCL87菌粉參照唾液乳桿菌Scgz-11菌粉的制備方法進行制 備。
[0024] 所述的Lactobacillus ingluvieiSCGZ-9菌粉的制備方法，包括如下步驟：
[0025] 將Lactobacillus ingluviei SCGZ-9接種于MRS肉湯培養基，培養得到菌液；然 后加入保護劑，繼續培養得到菌液和保護劑的混合物；將混合物預凍，并凍干成固體，最后 制成粉末狀，得到Lactobacillus ingluviei SCGZ-9菌粉。
[0026] 所述的MRS肉湯培養基的配方為（g/L):蛋白腺10.0,牛肉浸粉8.0,酵母浸粉 4. 0,葡萄糖20. 0,憐酸氨二鐘2. 0,巧樣酸氨二錠2. 0,乙酸鋼5. 0,硫酸儀0. 2,硫酸儘 0. 04,吐溫801. 0,抑值5. 7 + 0. 2 ;MRS固體培養基是在MRS肉湯培養基內添加瓊脂14. 0~ 20g/L，并調節抑值6. 5 + 0. 2。
[0027] 所述的培養的條件優選為37±rC，160±30r/min，培養20 +化；
[0028] 所述的保護劑的配方優選為脫脂奶20~30g/l，玉米淀粉20~25g/l，可溶性淀 粉90~llOg/L;其中，溶劑為水。
[0029] 所述的保護劑與菌液的體積比優選為1:(1~1. 5);
[0030] 所述的繼續培養的條件優選為37 +rC，160±30r/min，繼續培養4~化；
[0031] 所述的預凍的條件優選為-80°C預凍8~12小時；
[0032]所述的凍干的條件優選為采用真空冷凍的方法，-40°C，50~80化進行凍干。
[0033] 所述的禽類微生態制劑的制備方法，包括如下步驟：
[0034] (1)按上述制備方法分別制備唾液乳桿菌Scgz-11菌粉、唾液乳桿菌SCL87菌粉和 LactobacillusingluvieiSCGZ-9 菌粉；
[0035] (2)將步驟（1)制備得到的唾液乳桿菌Scgz-11菌粉、唾液乳桿菌SCL87菌粉和 LactobacillusingluvieiSCGZ-9菌粉進行混合，得到禽類微生態制劑。
[0036]本發明所用的唾液乳桿菌Scgz-11(LactobacillussalivariusScgz-11)為申請 人從廣東養殖場的健康雞群中分離得到的優勢菌株，經過生理生化及16sRNA分析鑒定，表 明該菌屬于唾液乳桿菌，該菌株具有較好的耐酸、耐膽鹽能力，并對對禽源致病性空腸彎曲 桿菌具有高效抑制作用。2014年3月12日保藏于中國典型培養物保藏中屯、（CCTCC)，保藏 地址：中國.武漢.武漢大學，保藏編號：CCTCCN0:M2014080。
[0037] 本發明所用的唾液乳桿菌SCL87(LactobacillussalivariusSCL87)為申請人從 廣東養殖場的健康母雞中分離得到的優勢菌株，該菌株具有耐酸、耐膽鹽、耐膜蛋白酶及良 好的黏附能力，競爭性抑制沙口氏菌的生長，預防及治療禽致病性沙口氏菌病，促進禽類生 長的作用。2015年5月28日保藏于中國典型培養物保藏中屯、（CCTCC)，保藏地址：中國.武 漢.武漢大學，保藏編號：CCTCCN0:M2015338。
[0038] 本發明所用的LactobacillusingluvieiSCGZ-9為申請人從廣東養殖場的健康 雞群中分離得到的優勢菌株，該菌株具有耐酸、耐膽鹽及良好的黏附能力，競爭性抑制禽致 病性大腸桿菌的生長，預防及治療禽致病性大腸桿菌病的作用，2015年5月28日保藏于中 國典型培養物保藏中屯、（CCTCC)，保藏地址：中國.武漢.武漢大學，保藏編號：CCTCCN0:M 2015337ο
[0039] 本發明的禽類微生態制劑在制備防治禽類空腸彎曲桿菌病的產品中的應用。
[0040] 本發明的禽類微生態制劑在制備防治禽類沙口氏菌病的產品中的應用。
[0041] 本發明的禽類微生態制劑在制備防治禽類大腸桿菌病的產品中的應用。
[0042] 本發明的禽類微生態制劑在制備改善腸道菌群生態平衡，增強免疫功能，促進生 長并防治腹瀉疾病產品中的應用。
[0043] 本發明的禽類微生態制劑在制備