阿樸菲類生物堿及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及藥物合成化學，屬于有機合成化學領域，具體的講，本發明涉及一種阿 樸菲類生物堿及其制備方法。
【背景技術】
[0002] 異紫堇堿是一種典型的阿樸菲類生物堿，天然產物化學成分研究表明禿瘡花中 主要含有阿撲菲類異喹啉生物堿(暢行若，王宏新，周光治.禿瘡花化學成分及組織 形態研究.藥物分析雜志，1982，2，273-277;劉大護等，禿瘡花生物堿類化學成分研 究，中草藥，2011,8(42) :1505-1508;YanDang,eiaA，Alkaloidfrom 招as leptopodum(Maxim)Fedde,ChinChemLett,2009,20,1218-1220.；MeiZhong,eial.,knewquaternaryprotoberberinealkaloidisolatedfromDicranostigmaleptopodum (Maxim)Fedde,NatProdRes,2014,28(9):507-510；YanjuanLiu,etal.Structuraland mechanisticbasesoftheanticanceractivityofnaturalaporphinoidalkaloids, CurrTopMedChem，2013，13(24) :2116-2126.))，該類生物堿大都具有鎮痛，鎮靜及腎上 腺能受體樣作用，部分化合物具有抗癌活性。
[0003] 對罌粟科禿瘡花屬植物禿瘡花化學成分及抗癌活性成分的篩選研究中，發現 該植物中含有大量的異紫堇堿(音譯名：異可利定)，它的含量雖然豐富但是其抗癌活性 較差，發明人的前期抗癌活性化合物篩選研究中，通過半合成方法對異紫堇堿進行結構 改造，得到的異紫堇二酮（isocorydione)，其抗癌活性得到了明顯改善(專利【申請號】 201110085388. 6, 201110085389. 0)。通過化學結構的進一步優化制備的8-氨基-異可利 定（即8-氨基-異紫堇堿，專利申請號201210340250. 0)，體外細胞活性篩選研究，發現該化 合物具有較好的抑制腫瘤細胞生長的活性，可以作為抗癌藥物使用。但在動物體內抗癌活 性研究中發現該化合物在水溶液中的穩定性較差，其在體內的抗癌作用與體外的抗癌活性 不一致，主要原因在于藥物在體內吸收和分布以及起效前，必須經過肝臟的代謝首過效應， 8_氨基-異可利定通過首過效應，經過肝藥酶的氧化還原或代謝轉化，其原型藥物失活，故 在體內沒有體現出抗癌活性。同時，在對8-氨基-異可利定的穩定性研究中發現，其在水 溶液中并不穩定，容易發生脫氫的氧化反應轉化，主要原因在于該化合物化學結構中具有 的對氨基酚結構片段，在水溶液中不穩定，容易發生化學轉化。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于提供一種阿樸菲類生物堿及其制備方法。
[0005] 本發明根據藥物化學的"前藥"基本原理，通過化合物的結構修飾，增加化合物在 水溶液中的穩定性，掩蔽其易氧化的活性位點，使其在體內經過肝臟的代謝轉化，逐漸釋放 原型藥物，延長藥物的清除半衰期，使其充分發揮抗癌活性。
[0006] -種阿樸菲類生物堿，化合物為8-乙酰氨基-異可利定，化合物的化學結構用式 I表示，
本發明提供的化合物8-乙酰氨基-異可利定的化學結構經過IDNMRCHNMR^CNMR、DEPT)，2DNMR(COSY、HMQC、HMBC)，HR-ESI-MS等現代光譜及波譜技術的鑒定得到確認，并 具有以下理化常數和譜學特征： 棕色粉末狀固體，[]+172° (1.0,MeOH) ;HR-ESI-MS餘々 399.1914 [M+H]+ (計算值 C22H27N205 為 399. 1920) ^H-NMR(400MHz,CD30D-i/4) : 7. 53 (1H, s,H-3), 3.00 (2H, m,H-4), 2.43 (2H, m,H-5), 3.00 (1H,m, H-6a), 2.88 (1H, dd, /= 16.4, 2.0 Hz,H-7), 2.60 (1H, dd, /= 16.4, 2.0Hz, H-7), 6.73 (1H, s,H-9), 2.48 (3H, s,N-CH3), 3.43 (3H,s,l-〇CH3), 3.90 (3H,s, 2-〇CH3), 3.86 (3H,s,l〇-〇CH3); 2. 22 (3H,s,C0CH3). 13C-NMR(100MHz,CD30D-i/4) : 146. 3 (C-l), 128.0 (C-la), 128.5 (C-lb), 151.9 (C-2), 113.2 (C-3), 126.4 (C-3a), 29.4 (C-4), 52.7 (C-5), 61.8 (C-6a), 31.0 (C-7), 122.3 (C-7a), 141.4 (C-8), 107.1 (C-9), 150.9 (C-10), 146.1 (C-ll), 123.8 (C-lla), 61.3 (1-0CH3), 56.1 (2-0CH3), 55.5 (11-0CH3), 43.6 (N-CH3), 21.1 (C0CH3)〇
[0007] 本發明利用8-氨基-異可利定化學結構中的8位氨基官能團的親核化學特性，通 過親核取代反應，在氨基官能團引入保護基團乙酰基，改善8-氨基-異可利定在水溶液中 的化學穩定性和增強其在肝臟首過效應中生化代謝穩定性。
[0008] 本發明提供的化合物的制備方法，其特征在于該方法將反應原料8-氨基-異可 利定溶解在1-6倍量的有機溶劑中，機械攪拌使反應物全部溶解，攪拌下將相當于反應物 0.8-8倍量摩爾比的乙酰化試劑加到8-氨基-異可利定的有機溶劑溶液中，攪拌1-2小 時；薄層色譜鑒別，待反應完全后，用氨水調節pH值至中性，停止反應；反應物傾倒入水溶 液中，用有機溶劑萃取3次，合并有機溶劑萃取層，回收有機萃取溶劑得8-乙酰氨基-異可 利定粗品；柱色譜純化得到目標化合物8-乙酰氨基-異可利定。
[0009] 本發明所述的有機溶劑選自氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯或四氫呋喃。
[0010] 本發明所述的酰化試劑選自乙酰氯、醋酐或醋酸。
[0011] 本發明中的8-乙酰氨基-異可利定的生物活性是通過昆明種小白鼠的腫瘤異種 移植模型，即體內荷腹水型肝癌H22誘導的實體瘤實驗驗證，結果表明其具有較強的體內抑 制腫瘤生長作用，具有較好的抗癌活性。
【附圖說明】
[0012] 圖1為式?化合物的高分辨率質譜圖。
[0013] 圖2為式I化合物的13C_NMR圖譜。
[0014] 圖3為8-乙酰氨基-異可利定對于荷H22昆明種小白鼠的腫瘤抑制效果對比：其 中A組為生理鹽水組（NS)，B組為8-乙酰氨基-異可利定給藥組(劑量：50mg/kg)，C組 為8-乙酰氨基-異可利定給藥組(劑量：100mg/kg),D組為8-乙酰氨基-異可利定給藥 組(劑量：200mg/kg)，E組為陽性藥物對照組環磷酰胺組（CTX)。
[0015] 圖4為-乙酰氨基-異可利定給藥期間各組小白鼠體重增長情況。
[0016] 圖5為-乙醜氨基-異可利定治療第10天時各組小白鼠體重差異情況。
[0017] 圖6為-乙酰氨基-異可利定各給藥組小白鼠H22腫瘤重量統計結果。