一種具有神經保護作用的化合物及醫用用圖
【技術領域】
[0001] 本發明公開一種具有神經保護作用的化合物及醫用用途，設及本發明所述的化合 物和藥學上可接受的鹽，W及它們在治療對神經毒素損傷的神經細胞系具有明顯的修復 作用中的用途、W及在制造用于運類治療的藥物中的用途，屬于醫藥技術領域。
【背景技術】
[0002] 帕金森病（PD)是一種慢性中樞神經系統退化性失調。它會損害患者的肢體功能， 語言能力等，臨床表現為休息性震顫、僵直、運動遲緩和姿勢不穩定性與認知和情感障礙。 它的病因目前仍不明確，但其主要病理特征為黑質致密部中多己胺能神經元的損失和被稱 為路易體的胞漿內包含體的存在。
[0003] 6-徑基多己胺化-0HDA)是一種廣泛地用于在實驗動物中誘導帕金森綜合征的化 學物質化ane&Dunnett，2008)。6-0HDA經由多己胺和去甲腎上腺素重吸收轉運蛋白進入神 經元。因此，6-0HDA通常與選擇性去甲腎上腺素重吸收抑制劑（比如地昔帕明）一起使 用W選擇性地僅殺死多己胺能神經元。在體外，多己胺的氧化可導致6-0HDA的產生，所 W6-0HDA被認為是內源性毒素（Jellingeretal.，1995)。確實的證據表明6-0HDA產生活 性氧簇，并降低谷脫甘膚和過氧化物歧化酶的活性度etarbetetal.,2002)。在腦內注射 6-0HDA之后，紋狀體神經元在24小時內開始變性，并且在2-3天后紋狀體多己胺耗盡。
[0004] 近年來，部分合成小分子物質被證明具有神經保護的活性。
【發明內容】
[0005] 本發明目的在于提供了一種具有神經保護作用的化合物。
[0006] 本發明公開了該化合物的制備方法，可W用于工業化生產。
[0007] 本發明進一步公開了所述化合物在神經保護作用方面的藥物應用。
[0008] 本發明的具有神經保護作用的化合物，所述化合物具有W下化學式：
具體化學式為： 化合物 4a 腳=H,r2 =COzEtr3 =Pli, r4 =H, X=巧 化合物 4b 腳=H,r2 =COzEtr3 =Pli, r4 =Pli, X= S) 化合物 4c 腳=H, r2 =C〇2化，R3 =Pli, r4 = S-MeOCsH*,X=S) 化合物 4e 腳=H, r2 =C〇2化，R3 =Pli, r4 = 2-化CeH*,X=S) 化合物 4e 腳=4-Me,r2 =COzEtr3 = Pli,r4 = Pli, X=巧 化合物 4f 腳=4-Br,r2 =COzEtr3 = Pli,r4 = Pli, X= S) 化合物 4g腳=H,r2 =C〇2化，R3 =A-MeOCsHs,r4 =Pli,X=S) 化合物地腳=H,r2 =COzEtr3 =Pli,r4 =Pli,X=Se)
本發明的積極效果在于：公開了化學結構式I在制備神經保護藥物中的新用途，可W對神經毒素損傷的神經細胞系具有明顯的修復作用，用于制備神經保護藥物。
【附圖說明】
[0009] 圖1為4a對6-0HDA損傷的DPC12細胞的存活率的影響； 圖2為4b對6-0HDA損傷的DPC12細胞的存活率的影響； 圖3為4c對6-0HDA損傷的DPC12細胞的存活率的影響； 圖4為4d對6-0HDA損傷的DPC12細胞的存活率的影響； 圖5為4e對6-0HDA損傷的DPC12細胞的存活率的影響； 圖6為4f對6-0HDA損傷的DPC12細胞的存活率的影響； 圖7為4g對6-0HDA損傷的DPC12細胞的存活率的影響； 圖8為4h對6-0HDA損傷的DPC12細胞的存活率的影響。
【具體實施方式】
[0010] 下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，運些實施例僅用于說明本發明 而不用于限制本發明范圍。此外應理解，在閱讀了本發明的內容之后，本領域技術人員可 W對本發明作各種改動或修改，運些等價形式同樣落于本申請所附后權利要求書限定的范 圍。
[0011] W下試驗表明本發明所述化學式的化合物具有明顯神經保護作用，可在治療或預 防老年癡呆和帕金森藥物或保健品中應用： 實驗例1: 本發明W細胞存活率為指標，通過MlT法檢測的結果，反映4a樣品對抗神經毒素 6-0HDA的毒性作用大小，W說明其神經保護作用。
[0012] 取對數生長期的PC12細胞，用完全培養基稀釋成3*105個/ml的細胞懸液，每孔 100y1接種于96孔板，置于37°C，5%C02培養箱中培養2地。移去培養基，加入100y1的 4a溶液(終濃度10ymol/ml，20ymol/ml，由基礎培養基作為溶劑配制)，模型組和對照組分 別加入100y1基礎培養基，每組4個復孔。藥物預處理化后，在給藥組與模型組分別加入 6-0HDA(終濃度為100ymol/1)，培養2地，加入5mg/ml的MTT10y1，37°C培養箱中培養 4h。棄去上清后每孔加入DMSO150yI，震蕩均勻，于540nm波長處測定各孔吸光度值來反 映PC12細胞的存活率。 陽01引 上述MlT測定結果顯示(參考圖1，細胞由4a(IOyM, 20yM，40yM)預處理化，而 后加入100ym6-0HDA處理2地。數據均W對照組的百分比呈現，相比對照組##郵<0. 001， 相比模型組（100ym6-0HDA)卸<0. 05)，在只加入6-0HDA時，細胞存活率較對照組明顯下 降，說明6-0HDA對PC12細胞具有明顯的損傷作用；4a與6-0HDA共解育時，可W明顯抑制 細胞存活率的下降，說明4a具有顯著的神經保護作用。
[0014] 6-0HDA損傷PC12細胞模型是研究帕金森病常用的神經細胞模型，結合W上化學 分析，可見，4a具有神經保護作用。 陽〇1引 實驗例2: 本發明W細胞存活率為指標，通過MlT法檢測的結果，反映4b樣品對抗神經毒素 6-0HDA的毒性作用大小，W說明其神經保護作用。
[0016] 取對數生長期的PC12細胞，用完全培養基稀釋成3*105個/ml的細胞懸液，每孔 100y1接種于96孔板，置于37°C，5%C02培養箱中培養2地。移去培養基，加入100y1的 4b溶液(終濃度10ymol/ml，20ymol/ml，由基礎培養基作為溶劑配制)，模型組和對照組分 別加入100y1基礎培養基，每組4個復孔。藥物預處理化后，在給藥組與模型組分別加入 6-0HDA(終濃度為100ymol/1)，培養2地，加入5mg/ml的MTT10y1，37°C培養箱中培養 地。棄去上清后每孔加入DMSOISOiil，震蕩均勻，于540nm波長處測定各孔吸光度值來反 映PC12細胞的存活率。
[0017] 上述MlT測定結果顯示(參考圖2,細胞由4b(IOyM, 20yM，40yM)預處理化，而 后加入100ym6-0HDA處理2地。數據均W對照組的百分比呈現，相比對照組##郵<0. 001， 相比模型組（100ym6-0HDA)*p<0. 05，***p<0. 001)，在只加入6-0HDA時，細胞存活率較對 照組明顯下降，說明6-0HDA對PC12細胞具有明顯的損傷作用；4b與6-0HDA共解育時，可 W明顯抑制細胞存活率的下降，說明4b具有顯著的神經保護作用。
[0018] 6-0HDA損傷PC12細胞模型是研究帕金森病常用的神經細胞模型，結合W上化學 分析，可見，4b具有神經保護作用。
[0019] 實驗例3: 本發明W細胞存活率為指標，通過MlT法檢測的結果，反映4c樣品對抗神經毒素 6-0HDA的毒性作用大小，W說明其神經保護作用。
[0020] 取對數生長期的PC12細胞，用完全培養基稀釋成3*105個/ml的細胞懸液，每孔 100y1接種于96孔板，置于37°C，5%C02培養箱中培養2地。移去培養基，加入100y1的 4c溶液(終濃度10ymol/ml，20ymol/ml，由基礎培養基作為溶劑配制)，模型組和對照組分 別加入100y1基礎培養基，每組4個復孔。藥物預處理化后，在給藥組與模型組分別加入 6-0HDA(終濃度為100ymol/1)，培養2地，加入5mg/ml的MTT10y1，37°C培養箱中培養 地。棄去上清后每孔加入DMSOISOiil，震蕩均勻，于540nm波長處測定各孔吸光度值來反 映PC12細胞的存活率。 陽02U 上述MT測定結果顯示(參考圖3,細胞由4c(IOyM，20yM，40yM)預處理化，而 后加入100ym6-0HDA處理2地。數據均W對照組的百分比呈現，相比對照組##郵<0. 001， 相比模型組（100ym6-0HDA)***p<0. 001)，在只加入6-0HDA時，細胞存活率較對照組明顯 下降，說明6-OHDA對PC12細胞具有明顯的損傷作用；4c與6-OHDA共解育時，可W明顯抑 制細胞存活率的下降，說明4c具有顯著的神經保護作用。
[0022] 6-0HDA損傷PC12細胞模型是研究帕金森病常用的神經細胞模型，結合W上化學 分析，可見，4c具有神經保護作用。
[0023] 實驗例4: 本發明W細胞存活率為指標，通過MlT法檢測的結果，反映4d樣品對抗神經毒素6-0HDA的毒性作用大小，W說明其神經保護作用。
[0024] 取對數生長期的PC12細胞，用完全培養基稀釋成3*105個/ml的細胞懸液，每孔 100y1接種于96孔板，置于37°C，5%C02培養箱中培養2地。移去培養基，加入100y1的 4d溶液(終濃度10ymol/ml，20ymol/ml，由基礎培養基作為溶劑配制)，模型組和對照組分 別加入100y1基礎培養基，每組4個復孔。藥物預處理化后，在給藥組與模型組分別加入 6-0HDA(終濃度為10