一種提高苜蓿產(chǎn)量和品質(zhì)的組合物及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及生物技術(shù)領(lǐng)域中一種提高首猜產(chǎn)量和品質(zhì)的組合物及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 紫花首猜（MedicagosativaL.)性喜溫暖、耐寒、適應(yīng)性廣，營養(yǎng)豐富，蛋白質(zhì)含 量高，適口性好，是當(dāng)今世界分布最廣的栽培牧草。首猜種子小，自身攜帶的養(yǎng)分少，處于正 常萌發(fā)狀態(tài)的種子，對干旱、寒冷等不利播種條件的抵抗能力相應(yīng)較弱。因此在種植之前， 一般會(huì)對首猜種子進(jìn)行丸衣化等技術(shù)處理。
[0003] 根瘤菌是一類革蘭氏陰性需氧桿菌，能夠與豆科植物共生，形成根瘤并固定空氣 中的氮?dú)鉃橹参锾峁I養(yǎng)。接種首猜根瘤菌能促進(jìn)紫花首猜生長和結(jié)瘤固氮，從而提高紫 花首猜的產(chǎn)量和品質(zhì)。但是，大田生產(chǎn)中的環(huán)境條件復(fù)雜多變，室內(nèi)篩選出與紫花首猜共生 固氮效果好的菌株，在田間的接種效果往往不佳。
[0004]水蘇堿（Stachy化ine，分子式：(：化3側(cè)2,分子量：143. 185,CAS:471-87-4,別名： k水蘇堿，水秀克堿，（2S)-1，1-二甲基化咯燒-2-甲酸），具有活血調(diào)經(jīng)，利尿消腫，收縮 子宮的作用。 陽0〇5] 葫蘆己堿燈rigonelline，分子式：C品N02,分子量：137. 14,CAS:535-83_1，別名： 1-甲基化晚鐵-3-甲酸內(nèi)鹽），具有溫腎，桂寒，止痛的功效。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是如何提高首猜（如紫花首猜）的固氮能力，進(jìn)而提 高首猜的產(chǎn)量和品質(zhì)。
[0007] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先提供了用于制備根瘤菌培養(yǎng)基的組合物。
[000引本發(fā)明所提供的用于制備根瘤菌培養(yǎng)基的組合物，其活性成分由組分A和組分B組成，所述組分A可為水蘇堿或其鹽酸鹽，具體可為鹽酸水蘇堿；所述組分B可為葫蘆己堿 或其鹽酸鹽，具體可為葫蘆己堿鹽酸鹽。
[0009] 上述組合物中，所述活性成分中所述組分A和所述組分B的摩爾比可為（1-2) :1， 具體可為1:1或2:1。
[0010] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明還提供了 一種根瘤菌培養(yǎng)基。
[0011] 本發(fā)明所提供的一種根瘤菌培養(yǎng)基，含有上述組合物。
[0012] 上述根瘤菌培養(yǎng)基是在普通根瘤菌培養(yǎng)基中加入上述組合物得到含有所述組分A 和所述組分B的培養(yǎng)基；所述根瘤菌培養(yǎng)基中，所述組分A的含量為10μM-20μΜ(如10μΜ 或20μΜ)，所述組分Β的含量為10μΜ;所述普通根瘤菌培養(yǎng)基不含所述組分A和所述組分 B。
[0013] 所述普通根瘤菌培養(yǎng)基為常用的培養(yǎng)根瘤菌的培養(yǎng)基，如YAM液體培養(yǎng)基或YM 固體培養(yǎng)基。
[0014] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明還提供了用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培 養(yǎng)物的制備方法。
[0015] 本發(fā)明所提供的用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物的制備方法，為方 法Q，所述方法Q包括將根瘤菌在所述根瘤菌培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到的培養(yǎng)物，即為所述用于提 高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物。
[0016] 上述方法中，所述培養(yǎng)物可為培養(yǎng)容器內(nèi)的所有物質(zhì)。
[0017] 上述方法中，所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物與普通根瘤菌培 養(yǎng)物相比，所述普通根瘤菌培養(yǎng)物按照方法P制備，所述方法P與所述方法Q的區(qū)別僅在于 將所述方法Q中的所述根瘤培養(yǎng)基替換為所述普通根瘤菌培養(yǎng)基。
[001引上述方法中，所述根瘤菌為首猜中華根瘤菌（SinorhizobiummeliloU)ACCC17631。
[0019] 本發(fā)明所提供的利用上述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物的制備 方法制備的所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物也屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0020] 本發(fā)明所提供的含有所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物的首猜 種子根瘤菌種衣劑也屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
[0021] 上述首猜種子根瘤菌種衣劑，由含有根瘤菌劑、粘著劑和基質(zhì)的原料制成，所述根 瘤菌劑、所述粘著劑和所述基質(zhì)運(yùn)Ξ種組分每種組分均獨(dú)立包裝；所述根瘤菌劑由上述用 于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物與根瘤菌吸附劑混勻而成；所述根瘤菌吸附劑 由菌劑載體、碳源、過憐酸巧、石灰、鋼酸錠、棚酸和水組成；所述根瘤菌劑中鋼酸錠的質(zhì)量 百分含量為0. 1 % -0. 2 %;所述根瘤菌劑中，所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培 養(yǎng)物與所述根瘤菌吸附劑的配比滿足lOOg所述根瘤菌劑中鋼酸錠的含量為（0. 1-0. 2)g， lOOg所述根瘤菌劑中所述根瘤菌的含量為> 5Xl〇iic化。
[0022] 上述首猜種子根瘤菌種衣劑中，所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng) 物中，所述根瘤菌為首猜中華根瘤菌（Sinorhizobiummeliloti)ACCC17631。 W23] 上述首猜種子根瘤菌種衣劑中，所述根瘤菌劑中所述根瘤菌的含量為 > 5X1〇9?；?邑，如 5X1〇9?；?邑。
[0024] 上述首猜種子根瘤菌種衣劑中，所述根瘤菌吸附劑中所述菌劑載體為草炭，所述 碳源為薦糖，所述根瘤菌吸附劑中菌劑載體、碳源、過憐酸巧、石灰、鋼酸錠、棚酸和水的質(zhì) 量比為488. 5g菌劑載體：Ig碳源：0. 5g過憐酸巧：10g石灰：（1-1. 5)g鋼酸錠：0. 005g棚 酸：(21-31)g水。
[0025] 上述首猜種子根瘤菌種衣劑中，所述原料由所述根瘤菌劑、所述粘著劑、所述基 質(zhì)和脫脂乳組成，所述根瘤菌劑、所述粘著劑、所述基質(zhì)和所述脫脂乳的質(zhì)量比滿足100 : (1.6-2. 0) :300 :(0.02-0. 04)。
[00%] 上述首猜種子根瘤菌種衣劑中，所述粘著劑可為簇甲基纖維素鋼，所述基質(zhì)可為 膨潤上。
[0027] 本發(fā)明還提供了下述1)-29)中任一種應(yīng)用：
[0028] 1)所述組分A和所述組分B在制備根瘤菌培養(yǎng)基中的應(yīng)用；
[0029] 2)所述組分A和所述組分B在制備根瘤菌培養(yǎng)物中的應(yīng)用；
[0030] 3)所述組分A和所述組分B在制備根瘤菌種衣劑中的應(yīng)用；
[0031] 4)所述組分A和所述組分B在制備丸衣首猜種子中的應(yīng)用；
[0032] 5)所述組分A和所述組分B在提高首猜產(chǎn)量中的應(yīng)用；
[0033] 6)所述組分A和所述組分B在提高首猜根瘤數(shù)中的應(yīng)用；
[0034] 7)所述組分A和所述組分B在提高首猜品質(zhì)中的應(yīng)用；
[0035] 8)所述組合物在制備根瘤菌培養(yǎng)基中的應(yīng)用；
[0036] 9)所述組合物在制備根瘤菌培養(yǎng)物中的應(yīng)用；
[0037] 10)所述組合物在制備根瘤菌種衣劑中的應(yīng)用；
[003引 11)所述組合物在制備丸衣首猜種子中的應(yīng)用；
[0039] 12)所述組合物在提高首猜產(chǎn)量中的應(yīng)用；
[0040] 13)所述組合物在提高首猜根瘤數(shù)中的應(yīng)用；
[0041] 14)所述組合物在提高首猜品質(zhì)中的應(yīng)用；
[0042] 15)所述根瘤菌培養(yǎng)基在制備根瘤菌培養(yǎng)物中的應(yīng)用；
[0043] 16)所述根瘤菌培養(yǎng)基在制備根瘤菌種衣劑中的應(yīng)用；
[0044] 17)所述根瘤菌培養(yǎng)基在制備丸衣首猜種子中的應(yīng)用；
[0045] 18)所述根瘤菌培養(yǎng)基在提高首猜產(chǎn)量中的應(yīng)用；
[0046] 19)所述根瘤菌培養(yǎng)基在提高首猜根瘤數(shù)中的應(yīng)用；
[0047]20)所述根瘤菌培養(yǎng)基在提高首猜品質(zhì)中的應(yīng)用；
[0048]21)所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物在制備根瘤菌種衣劑中的 應(yīng)用；
[0049] 22)所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物在制備丸衣首猜種子中的 應(yīng)用；
[0050] 23)所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物在提高首猜產(chǎn)量中的應(yīng) 用；
[0051] 24)所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物在提高首猜根瘤數(shù)中的應(yīng) 用；
[0052] 25)所述用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物在提高首猜品質(zhì)中的應(yīng) 用；
[0053]26)所述首猜種子根瘤菌種衣劑在制備丸衣首猜種子中的應(yīng)用；
[0054] 27)所述首猜種子根瘤菌種衣劑在提高首猜產(chǎn)量中的應(yīng)用；
[0055] 28)所述首猜種子根瘤菌種衣劑在提高首猜根瘤數(shù)中的應(yīng)用；
[0056] 29)所述首猜種子根瘤菌種衣劑在提高首猜品質(zhì)中的應(yīng)用。
[0057] 上述應(yīng)用中，所述首猜產(chǎn)量體現(xiàn)為單株產(chǎn)量，所述單株產(chǎn)量指一株處于現(xiàn)蕾期首 猜的地上部分的平均干重。
[0058] 上述應(yīng)用中，所述首猜品質(zhì)體現(xiàn)為單株首猜莖葉粗蛋白含量。
[0059] 上述應(yīng)用中，所述根瘤數(shù)具體可為單株根瘤總數(shù)。
[0060] 上述應(yīng)用中，所述丸衣首猜種子具體可為用上述首猜種子根瘤菌種衣劑和首猜種 子制成的種子。 W61] 上述應(yīng)用中，所述根瘤菌為首猜中華根瘤菌（SinorhizobiummeliloU)ACCC17631。 陽062] 上文中，所述首猜可為中首一號紫花首猜。
[0063] 本發(fā)明通過使用上述方法Q制備的用于提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物 制備的所述首猜種子根瘤菌種衣劑，提高了首猜（如紫花首猜）的產(chǎn)量和品質(zhì)。所述用于 提高首猜產(chǎn)量和/或品質(zhì)的根瘤菌培養(yǎng)物為將上述根瘤菌在上述根瘤菌培養(yǎng)基中培養(yǎng)得 到的培養(yǎng)物，所述根瘤菌培養(yǎng)基為在普通根瘤菌培養(yǎng)基中加入所述組合物得到的培養(yǎng)基，