一種提高羅漢果甜苷中羅漢果甜甙v純度的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及羅漢果加工領域，具體涉及一種提高羅漢果甜苷中羅漢果甜甙V純度的方法。
【背景技術】
[0002]羅漢果甜苷又稱羅漢果甜甙，萃取于廣西特產經濟植物一羅漢果，其甜度為蔗糖的300倍，其熱量為零，具有清熱潤肺鎮咳、潤腸通便之功效，對肥胖、便秘、糖尿病等具有防治作用。
[0003]羅漢果甜甙中的單體甙V是羅漢果甜甙的主要甜味成分。目前，提取羅漢果甜甙的方法有很多，但因其本身原料的原因，在提取過程中脫味脫色效果不理想，萃取出的羅漢果粉粉色偏深，并有不愉快的青澀味，即單體甙V純度不高，不適合工業用甜味劑要求。
【發明內容】
[0004]本發明的目的是克服現有技術的不足，提供一種能有效去除羅漢果甜苷的青澀味，并脫除色澤，提高羅漢果甜苷中羅漢果甜甙V純度的方法。
[0005]為實現上述目的，本發明采用如下技術方案:
一種提高羅漢果甜苷中羅漢果甜甙V純度的方法，包括以下步驟:
1)提取:將羅漢果原料進行破碎處理，再將破碎后的原料與體積濃度為30-35%的乙醇按重量比1:9-10混合均勻，在溫度70-75°C下，用三級單罐套式提取方法提取45-60min，過濾，得到含有羅漢果甜甙V (Mogroside V)的提取液，并將提取液冷卻至25_30°C ；
2)預濃縮:將上述冷卻后的提取液濃縮至提取液體積的1/5-1/4，得到濃縮液；
3)酶解:在上述濃縮液中加入酸溶液調節濃縮液pH至4.0-4.5，然后加入BrewersCompass復合酶，所述復合酶添加量為濃縮液重量的0.5_1%。，然后升溫至50-55°C，酶解30-40min ;酶解后濁度從大于4000NTU降至1-2NTU，單體甙V濃度提高10_15%，同時降低了苦澀味。
[0006]4) 一次過濾:將上述酶解后的濃縮液離心，采用l-2um的陶瓷膜過濾，得到一次濾液；
5)樹脂吸附、洗脫:將大孔吸附樹脂裝入吸附柱中，然后將上述一次濾液以2-3BV/h的流速流過吸附柱進行吸附，主要是吸附一次濾液中的皂甙類、色素及其他呈味物質，每根吸附柱吸附40-50倍吸附柱體積的一次濾液，吸附結束后用吸附柱體積3-4倍的洗脫液洗脫吸附柱上吸附的皂甙類成分、色素及其他呈味物質，所述洗脫液為濃度70-75%的乙醇，洗脫流速為l_2BV/h，收集洗脫液，所述洗脫液中的皂甙類成分為后續脫味(脫鹽)脫色的有效物；
6)濃縮、二次過濾:將上述收集的洗脫液濃縮至百利度為25-30%的濃縮液，再將濃縮液經l_2um陶瓷膜過濾，得到二次濾液；
7)樹脂柱脫鹽:采用D280大孔樹脂為脫鹽樹脂，將其裝入樹脂柱中，將上述二次濾液以1.5-2BV/h的流速流過樹脂柱，并收集流出液，然后用濃度70-75 %的乙醇為洗脫液進行洗脫并收集洗脫液，洗脫液用量為D280大孔樹脂體積的2.0-2.2倍，合并流出液和洗脫液，所得脫鹽液電導率為l-5us/cm ；
8)樹脂柱脫色:采用D392大孔樹脂為脫色樹脂，將其裝入樹脂柱中，將上述合并后的流出液和洗脫液以1.5-2BV/h的流速流過樹脂柱，進行脫色得到脫色液，所得脫色液為淡黃至無色；
9)活性炭脫色:在上述脫色液中加入其重量5-8%的活性炭，在溫度45-50°C下脫色50-60min，然后離心，棄沉淀，收集離心液，所得離心液為無色；
10)滅菌:將上述離心液滅菌、干燥，得到含高純度MogrosideV的羅漢果甜苷。
[0007]進一步，所述步驟I)中的羅漢果原料為成熟的鮮羅漢果或干羅漢果。
[0008]所述干羅漢果的水分含量小于10%。
[0009]所述干羅漢果的制備方法如下:將新鮮的羅漢果在溫度45_50°C下烘烤12-14 h，然后升溫至65-70°C，烘烤22-24h，再降溫至50_55°C，烘烤至水分含量小于10%，得到干羅漢果。
[0010]進一步，步驟2)和步驟6)中所述的濃縮均為真空濃縮。
[0011]所述步驟3)中的酸溶液為濃度2-2.5%的檸檬酸溶液或lmol/L的鹽酸溶液。
[0012]所述步驟4)和步驟9)中所述離心的轉速均為6500-7000r/min。
[0013]所述步驟5)中的大孔吸附樹脂為HPD750大孔吸附樹脂，其裝柱量為羅漢果原料的 1/10-1/9。
[0014]所述步驟7)的D280大孔樹脂的裝柱量為羅漢果原料的1/40-1/38，所述步驟8)的D392大孔樹脂的裝柱量為羅漢果原料的1/40-1/38。
[0015]所述步驟10)中滅菌是指溫度134-138°C下滅菌30_35s，所述干燥為噴霧干燥。
[0016]本發明步驟I)通過低濃度酒精浸提方式，能夠保證羅漢果單體甙V的浸出，又能降低其他雜質的溶出，降低后續分離純化難度。后續一般通過一次吸附分離即可將產品的羅漢果單體甙V含量提高至45%以上，比現有水提工藝提高了 20%左右。
[0017]本發明步驟2)通過低溫真空預濃縮，避免破壞料液中的有效成分。同時，預濃縮至一定濃度再進行后續吸附純化，可將傳統吸附純化所需時間(48h左右)縮短至1h左右，提高工作效率并且物料不發生變質。
[0018]本發明步驟3)所述Brewers Compass復合酶購買至DSM公司(帝斯曼公司)，Brewers Compass復合酶主要含有纖維素酶、果膠酶，酸性蛋白酶及β _葡聚糖酶等，果膠酶及蛋白酶主要起澄清、降低粘性及改善風味作用，纖維素酶及葡聚糖酶能提高有效物質的溶出，本發明通過酶解，可以除去物料中果膠和其他大分子粘性物質，如蛋白質，及多肽等苦味物質，降低過柱吸附時上柱壓力，并降低雜質成分。本發明的酶解澄清方法，與傳統的絮凝劑澄清方法相比，對羅漢果單體甙V的損耗幾乎為0，澄清效果高效迅速，一般30min左右即可完成澄清，并且可提高羅漢果單體甙V得率10-15%左右。通過酶解工藝，可以解決傳統工藝中甜苷出現后渾的問題。
[0019]本發明步驟5)的吸附柱經洗脫液洗脫后，依次采用5%Na0H的水溶液清洗，5%的鹽酸水溶液清洗可實現回收循環利用。步驟7)脫鹽(脫味)樹脂采用5%的鹽酸水溶液清洗實現回收循環利用。步驟8)脫色樹脂經洗脫液流經吸附后，依次采用飽和NaCL溶液洗脫色樹脂，5%NaOH的水溶液清洗實現循環利用。
[0020]本發明采用以上的技術方案，料液流經吸附柱的過程中，吸附柱對料液中的主要有效物進行吸附，同時吸附物料中的呈味物質，再用洗脫液洗脫吸附柱上的有效物，最后將洗脫液經脫鹽(脫味)樹脂吸附呈味物質、經脫色樹脂去除色素，最后通過活性炭吸附，進一步去除雜質。由于羅漢果提取液中主要的呈味物質為鹽類、多肽、多酚類物質，主要雜質為色素類成分，通過本發明方法，最后制得的產品中mogroside V含量大于60%，總阜式大于90%，產品色澤雪白，總多酚含量小于1%，因此，能有效改善產品口感，增加有效物含量。
[0021]本發明在脫除不愉快味道及色素的同時，最大程度的保留了物料的有效成分，提高了產品的外觀及口感，產品顏色雪白，無異味，口感清甜，后甜綿長，類白砂糖，甜度為砂糖的500-1000倍，同時熱量幾乎為0，可應用于代糖產品及減肥保健食品中。
【具體實施方式】
[0022]一種提高羅漢果甜苷中羅漢果甜甙V純度的方法，包括以下步驟:
1)提取:將羅漢果原料進行破碎處理，再將破碎后的原料與體積濃度為30-35%的乙醇按重量比1:9-10混合均勻，在溫度70-75°C下，用三級單罐套式提取方法提取45-60min，過濾，得到含有Mogroside V的提取液，并將提取液冷卻至25_30°C ；
2)預濃縮:將上述冷卻后的提取液通過單效真空蒸發器濃縮至提取液體積的I/5-1/4，得到濃縮液；
3)酶解:在上述濃縮液中加入酸溶液調節濃縮液pH至4.0-4.5，然后加入BrewersCompass復合酶，所述復合酶添加量為濃縮液重量的0.5-1%,升溫至50-55 °C，酶解30-40min ；
4)一次過濾:將上述酶解后的濃縮液在6500-7000r/min的轉速下離心，然后用l_2um的陶瓷膜過濾，得到一次濾液；
5)樹脂吸附、洗脫:將HPD750大孔吸附樹脂裝入吸附柱中，然后將上述一次濾液以2-3BV/h的流速流過吸附柱進行吸附，主要吸附一次濾液中的皂甙類、色素及其他呈味物質，每根吸附柱吸附40-50倍吸附柱體積的一次濾液，吸附結束后用吸附柱體積3-4倍的濃度70-75%的乙醇為洗脫液洗脫吸附柱上吸附的皂甙類成分、部分色素及其他呈味物質，洗脫流速為l_2BV/h，收集洗脫液；
6)濃縮、二次過濾:將上述洗脫液通過單效真空蒸發器進行濃縮，得到百利度為25-30%的濃縮液，再將濃縮液經l_2um陶瓷膜過濾，得到二次濾液；
7)樹脂柱脫鹽:采