ID小鼠中來研究總體藥物毒性，并且通過 測量肝毒性（ALT、ALP、AST),腎毒性（血液BUN、肌酸酢）和電解質（化、K等）來研究急性 藥物毒性。如圖22所示，小鼠的存活率為100%，即，化合物B呈現出無毒性且對小鼠存活 沒有影響。在圖23中還清楚地看到，化合物B顯示小鼠的重量不受時間影響，從而未呈現 機體毒性。有趣的是，在圖24至26中也清楚地顯示，化合物B即使按為小鼠實驗和人體中 所用順銷劑量的大約10倍的異常高劑量（10天X7mg/kg/天=70mg/kg)給予時也未在小 鼠體內誘導可觀察到的急性毒性，即，無肝毒性、無腎毒性且電解質無變化。
[0329] 6. 3 討論
[0330] 圖22至26中呈現的體內結果已清楚地顯示令人興奮的觀察結果，化合物B在小 鼠中不呈現毒性或呈現最小的毒性、無整體藥物毒性（對小鼠存活期和體重無影響）并且 無急性毒性（無肝毒性、無腎毒性且電解質無變化）。運些結果與在人正常細胞中觀察到 的體外結果（示于圖6至9中）很好地符合。因此證實了作為RSC的化合物B確實是無毒 的。
[0331] 實施例7.在小鼠中化合物B的體內藥代動力學（Pk)和藥效學（Pd)研究
[0332] 7. 1材料和方法 防33引 7. 1. 1撒據收集巧分析
[0334] 在對小鼠IP注射化合物后的不同時間點從小鼠隱靜脈采集血樣然后使用 HPLC-質譜法進行分析。
[0335] 7. 2 結果
[0336] 研究了作為示例性RSC的化合物B在SCID小鼠中的藥代動力學（PK)和藥效學 (PD)。首先，檢測血液中化合物B的顯著性水平。其次，在圖27中清楚地顯示，在i.p.注 射后約20分鐘觀察到化合物B的最高濃度并在約3小時時降至接近零。但預計化合物B 在（腫瘤）組織處達到最大濃度將耗時更久。所觀察到的結果顯示，化合物B可在數小時 內從體內充分排出，表明化合物B具有優異的藥代動力學和藥效學。
[0337] 實施例8.在雌性SCID小鼠中在人宮頸癌（ME-180)的異種移植小鼠模型中化合 物B的體內測試
[033引 8. 1材料和方案
[033引 8. 1. 1研究紀
[0340] 該實驗中的四個組是：（1)對照制品巧％乙醇/培養基）；（2)15GyX-射線照射； (3)含7mg/kg化合物B的5 %乙醇/培養基和（4)含7mg/kg化合物B的5 %乙醇/培養基 加15GyX-射線照射，如表2所示。
[0341] 表2.實施例8中的研究組
[0342]
陽34引8. 1. 2.細胸制備（收巧P又供巧下接種）
[0344]將ME-180(人宮頸癌）細胞在ATCC配制的補充有10% FBS的McCoy' S 5A培養 基中培養。將燒瓶中的細胞在37 °C下保持于含5%C〇2的潮濕氣氛中。將細胞用PBS沖洗， 用膜蛋白酶消化W便與燒瓶底部脫離，與新鮮生長培養基混合，并且離屯、W去除上清液。用 新鮮培養基將細胞重新懸浮到適當的濃度W供接種。注射體積為每只動物50 y 1 (1 X 1〇6個 細胞）。 陽34引8. 1. 3腫漓細胸務植（連體漓）
[0346]使用27號針將體積為50yL的ME-180腫瘤細胞皮下植入雌性SCID小鼠化至8 周齡）左側脾腸肌內。如此建立人宮頸癌的皮下（SC)異種移植小鼠模型。 防347] 8. 1. 4藥物巧放射劑量施用
[034引對小鼠進行單獨稱重并按照體重腹膜內注射如上研究組表中列出的注射濃度。注 射體積基于200 yL/20g小鼠計。用70%異丙醇擦拭皮膚表面W清潔注射部位。使用X-rad 225祀向照射儀對腫瘤施加放射。 。34引8. 1. 5撒據收集
[0350] 使用游標卡尺和micro MRI測量腫瘤尺寸隨時間的變化，W評估與治療相關的腫 瘤生長延遲。測量腫瘤時也對動物稱重。允許小鼠腫瘤生長至最大1000mm3,之后停止。 防35。 8. 1. 6在小鼠中藥物誘導的麻激的評價
[0352] 在預處理和治療期期間，在施用后并且至少每天一次（如果認為有必要更多次） 觀察所有動物的死亡率和發病率。具體地，監測動物的不健康跡象，例如體重下降、食欲改 變，行為改變例如改變步態、嗜睡，W及總應激表現。
[035引 8. 2結果
[0354] 在人宮頸癌（ME-180)的異種移植小鼠腫瘤模型中研究了化合物B與X-射線照射 的組合的體內放射增敏（例如抗癌劑）作用。如圖28至30所示，清楚地看到，相較于腫瘤 模型中僅放射或化合物的治療，化合物B與X-射線照射的組合顯著增強了對腫瘤生長的抑 審IJ。結果顯示，化合物B與電離福射的組合在體內達成非常明顯的腫瘤生長延遲直到21天。 鑒于在本實驗中僅使用單個劑量（7mg/kg)的化合物B和單個放射劑量15GyW及化合物 B經觀察沒有整體和急性毒性或著具有最小的整體和急性毒性，合理地預計，運些結果可擴 展到多個分次放療（例如，整個療程可采用5X7mg/kg與5X4Gy的5個分次劑量），W便可 在增強療效方面達到最大協同效應。
[0355] 在任何治療的動物中均記錄無毒性或不健康的跡象，既無整體藥物毒性（對小鼠 存活期和體重無影響），也無急性毒性（無肝毒性、無腎毒性且電解質無變化）。
[0356] 本文引述的參考文獻均通過引用整體并入。
[0357] 上述實施方式僅旨在示例。在不背離僅由所附權利要求限定的本公開內容的范圍 的情況下，本領域技術人員可實現特定實施方式的變更、修改和變化。
[035引參考文獻
[035引1.P.G.Rose, B.N.Bundy, E. B. Watkins,J.T. Thigpen,G.Deppe, M. A. Maiman,D. L. Clarke-Pearson, S. Insalaco. Concurrent cispI atin-based radiotherapy and chemotherapy for locally advanced cervical cancer.N.Engl. J.Med.340, 1144-53(1999).
[0360] 2. D. M. Reese, Anticancer drugs, Na化re 378, 532 (19%).
[0361] 3. Q.B. Lu, US/WO Patent (WO/2011/026219)，"Novel Combination Ilierapy of Cisplatin with Non-Toxic Molecular Promoters(Compounds)for Cancer Treatment".
[0362] 4. Q. -B. Lu,Molecular Reaction Mechanisms of Combination Treatments of Low-Dose Cisplatin with Radiotherapy and Photodynamic Therapy, J. Med. Chem. 50,2601-2604 (2007).
[0363] 5. Q.-B.Lu,Effects of Ultrashort-Lived Prehydrated Electrons in Radiation Biology and Their Applications for Radiotherapy of Cancer, Mutat. 民es. -Rev. Mutat. Res. 704, 190-199 (2010) ?
[0364] 6. M. D. Rrados et al. "A phase 3randomized S化dy of radio化erapy plus procarbazine, CCNU, and vincristine (PCV) with or without BUd民for the treatment of anaplastic astrocytoma:a preliminary report of民TOG 9404"，Int. J.民adiat. Oncol. Biol. Phys. 45, 1109(1999).
[0365]7. A. Choudhury et al.，Targeting homologous recombination using imatinib results in enhanced tumor cell chemosensitivity and radiosensitivity，Mol Cancer TherS，203-2013 (2009).
【主權項】
1. 一種用于與電離輻射組合使用的生物相容性放射增敏劑化合物或其藥學上可接受 的鹽，所述化合物具有通式I:其中A為含有O至2個選自由N、0和S組成的組中的環雜原子的5元或6元芳基或雜 芳基環，其余環原子為碳， 1?3和R b獨立地為Η、0H、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環 基、雜芳基或電子轉移促進基團，其中Ra和Rb中至少一個為電子轉移促進基團； Re在每次出現時獨立地為Η、0H、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳 基、雜環基、雜芳基、離去基團，或兩個相鄰的Rtl基團連同其所連接的環原子一起形成5元 或6元飽和、部分飽和或不飽和環，所述環含有O至2個選自N、0和S的環雜原子并且可選 地被1至4個Rd取代；其中至少一個IT為離去基團； 1^獨立地為0H、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環基或雜芳 基；并且 η = 1 至 4， 其中所述烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環基和雜芳基部 分各自可選地被取代。2. 如權利要求1所述的化合物，其中所述電子轉移促進基團選自由-NH2、-NHR、-NR2、-O H、-NHC0CH3、-NHC0R、_0〇13和-OR組成的組中，其中R為取代或未取代的烷基。3. 如權利要求2中任一所述的化合物，其中R 3和R b各自為電子轉移促進基團。4. 如權利要求1至3中任一項所述的化合物，其中RlP Rb在相鄰的環碳上。5. 如權利要求1至4中任一項所述的化合物，其中所述電子轉移促進基團為-NH 2。6. 如權利要求1至5中任一項所述的化合物，其中所述離去基團為鹵素。7. 如權利要求6所述的化合物，其中所述鹵素為Cl、Br或I。8. 如權利要求1至7中任一項所述的化合物，其中環A上的兩個IT基團為選自由C1、 Br和I組成的組中的鹵素。9. 如權利要求1至9中任一項所述的化合物，其中環A為6元芳基或雜芳基環。10. 如權利要求9所述的化合物，其中環A為苯、吡啶或吡嗪。11. 如權利要求1至10中任一項所述的化合物，其中所述環A為苯。12. 如權利要求1至10中任一項所述的化合物，其中環A為苯、吡啶或吡嗪；Ra和Rb各 自為順2;環A上的兩個R ε取代基為鹵素，其各自在環A上位于Ra和Rb的間位和對位；并且 任何其余IT基團如權利要求1中所定義。13. 如權利要求12所述的化合物，其中環A為苯。14. 如權利要求13所述的化合物，其中環A上的其余碳為未取代的碳。15. 如權利要求12中任一所述的化合物，其中環A為吡啶。16. 如權利要求15所述的化合物，其中環A上的其余碳為未取代的。17. 如權利要求12所述的化合物，其中環A為吡嗪。18. 如權利要求1所述的放射增敏劑化合物或其藥學上可接受的鹽，所述化合物具有 通式II :其中： X和Y獨立地為C-R3或N ; R3為Η、0H、鹵素、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環基或雜 芳基； 1?3和R b獨立地為Η、0H、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環 基、雜芳基或電子轉移促進基團，其中Ra和Rb中至少一個為電子轉移促進基團； R1和R 2獨立地為Η、0H、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環 基、雜芳基或離去基團；其中R1和R2中至少一個為離去基團， 其中所述烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環基和雜芳基部 分各自可選地被取代。19. 如權利要求18所述的化合物，其中所述電子轉移促進基團選自由-NH2、-NHR、-NR2、 -OH、-NHC0CH3、-NHCOR、_0〇13和-OR組成的組中，其中R為取代或未取代的烷基。20. 如權利要求19中任一所述的化合物，其中所述電子轉移促進基團為-NH 2、-NHR 或-NR2021. 如權利要求18至20中任一項所述的化合物，其中所述電子轉移促進基團為-NH 2。22. 如權利要求18至21中任一項所述的化合物，其中RlP Rb各自為電子轉移促進基 團。23. 如權利要求18至22中任一項所述的化合物，其中所述離去基團為鹵素。24. 如權利要求23所述的化合物，其中所述鹵素為Cl、Br或I。25. 如權利要求18至24中任一項所述的化合物，其中R 1和R2各自為選自由Cl、Br和 I組成的組中的鹵素。26. 如權利要求18至25中任一項所述的化合物，其中X和Y為C-R。27. 如權利要求18至25中任一項所述的化合物，其中X為C-R并且Y為N。28. 如權利要求26或27所述的化合物，其中R為H。29. 如權利要求18至25中任一項所述的化合物，其中X和Y各自為N。30. 如權利要求1或18所述的化合物或其藥學上可接受的鹽，所述化合物具有通式 III， CN 105164107 A f乂 利安氷"fb 3/6 頁其中 X和Y獨立地為C-R3或N ; R3為Η、0H、鹵素、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環基或雜 芳基； R1和R 2獨立地為Η、0H、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環 基、雜芳基或離去基團；其中R1和R2中至少一個為離去基團， 其中所述烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、環烯基、環炔基、芳基、雜環基和雜芳基部 分各自可選地被取代。31. 如權利要求30所述的化合物，其中所述離去基團為鹵素。32. 如權利要求31所述的化合物，其中所述鹵素為Cl、Br或I。33. 如權利要求30至32中任一項所述的化合物，其中R 1和R2各自為選自由Cl、Br和 I組成的組中的鹵素。34. 如權利要求30至33中任一項所述的化合物，其中X和Y為C-R。35. 如權利要求30至33中任一項所述的化合物，其中X為C-R并且Y為N。36. 如權利要求34或35所述的化合物，其中R為H。37. 如權利要求30至33中任一項所述的化合物，其中X和Y各自為N。38. 如權利要求1、18和30中任一項所定義的化合物，選自由下列組成的組中： CN 105164107 A _權利要求書_ _4/6 頁39. 如權利要求1至38中任一項所述的化合物，所述化合物具有大于OeV的電子親和 力。40. 如權利要求1至39中任一項所述的化合物，所述化合物具有介于約+0. 2eV與約 +5eV之間的電子親和力。41. 如權利要求1至40中任一項所述的化合物，所述化合物具有介于約+0. 5eV與約 +2. 5eV之間的電子親和力。42. 如權利要求1至41中任一項所述的化合物，用于增強放射療法在接受所述放射療 法的受試者中的效果。43. 如權利要求42所述的化合物，其中所述受試者接受放射療法作為癌癥治療方法。44. 如權利要求1至41中任一項所述的化合物，用于治療接受放射療法的受試者的癌 癥。45. 如權利要求1至41中任一項所述的化合物，用于與放射療法組合治療癌癥。46. 如權利要求1至41中任一項所述的化合物，用于制造用來治療接受放射療法的受 試者的癌癥的藥劑。47. 如權利要求1至41中任一項所述的化合物，用于制造用來與放射療法組合治療癌 癥的藥劑。48. 如權利要求1至41中任一項所述的化合物在接受放射療法的受試者中增強所述放 射療法的用途。49. 如權利要求1至41中任一項所述的化合物在治療接受放射療法的受試者的癌癥中 的用途。50. 如權利要求1至41中任一項所述的化合物在制造用于治療接受放射療法的受試者 的癌癥的藥劑中的用途。51. -種用于與電離輻射組合治療癌癥的藥物組合物，包含： 有效量的如權利要求1至41中任一項所述的化合物；和 藥學上可接受的載體或稀釋劑。52. -種用于癌癥的組合療法，包括如權利要求1至41中任一項所定義的放射增敏劑 化合物和電離輻射。53. -種在有需要的受試者中增強放療的方法，包括： 將有效量的如權利要求1至41中任一項所定義的放射增敏劑化合物與有效量的電離 輻射組合施用至所述受試者。54. -種在癌細胞中提供抗癌作用的方法，包括： a) 對所述癌細胞施用有效量的如權利要求1至41中任一項所述的化合物；和 b) 對所述癌細胞施用有效量的電離輻射， 其中a)和b)被依次施用或同時施用，從而提供所述抗癌作用。55. 如權利要求54所述的方法，其中所述抗癌作用是殺傷所述癌細胞。56. 如權利要求54或55所述的方法，其中所述癌細胞是腫瘤細胞。57. -種治療有需要的受試者的癌癥的方法，包括： a) 對所述受試者施用有效量的如權利要求1至41中任一項所述的化合物；和 b) 對所述受試者施用有效量的電離輻射， 其中a)和b)被依次施用或同時施用。58. 如權利要求57所述的方法，其中，在施用所述電離輻射之前、期間或之后施用所述 化合物。59. 如權利要求58所述的方法，其中，在所述電離輻射之前施用所述化合物。60. -種治療有需要的受試者的癌癥的方法，包括，在有效量的電離輻射之前或同時對 所述受試者施用治療有效量的如權利要求1至41中任一項所述的化合物。61. -種商業包裝或試劑盒，包括如權利要求1至41中任一項所定義的化合物；以及 與電離輻射組合使用的說明書。62.如權利要求61所述的商業包裝或試劑盒，其中所述說明書是關于與電離輻射組合 用于治療癌癥。
【專利摘要】本文公開了可用于與放射療法組合的放射增敏劑化合物，例如，用于治療癌癥和其它病癥的協同組合療法。所述放射增敏劑化合物具有通式I：其中A表示芳族核心；Ra和Rb中至少一個為如本文所定義的電子轉移促進基團，例如，NH2；并且至少一個Rc為如本文所定義的離去基團，例如，鹵素；并且所述分子的其余部分如本文所定義。還公開了包含所述放射增敏劑化合物的藥物組合物、方法、用途、試劑盒和商業包裝。
【IPC分類】C07D213/73, A61K31/135, A61K31/4965, C07C211/52, A61K31/44, C07D241/20, A61P35/00
【公開號】CN105164107
【申請號】CN201380073147
【發明人】盧慶彬
【申請人】盧慶彬
【公開日】2015年12月16日
【申請日】2013年12月20日
【公告號】CA2895526A1, EP2935215A1, US20150343059, WO2014094178A1